应用SP免疫组化法检测宫颈鳞癌组织中SOX2蛋白表达水平的临床价值分析

胡 幸，徐曙光，符青云(.江门市五邑中医院病理科，广东 江门 5900；.江门市妇幼保健院病理科，广东 江门 5900)

宫颈癌是临床常见的恶性肿瘤疾病，具有较高的发病率和死亡率，直接影响着女性患者的身心健康[1]。目前，有研究结果证实，白血病、结肠癌、肺癌等中均存在肿瘤干细胞，可见其在肿瘤发生、发展中发挥着重要作用。SOX2蛋白属于干细胞转录因子，在胚胎干细胞、生殖肿瘤细胞中均有表达[2-3]。分析SOX2蛋白在宫颈鳞癌、CIN组织以及正常宫颈组织中的表达情况，探讨其在宫颈鳞癌发展中的参与作用，现报告如下。

1 资料与方法

1.1一般资料：选取2011年6月～2016年6月96例宫颈鳞癌组织、75例宫颈CIN组织，术中切除并行组织病理学检查证实。96例宫颈鳞癌患者，年龄39～68岁，平均(49.62±2.43)岁，TNM分期：56例Ⅰ期，40例Ⅱa期；分化程度：36例低分化，33例中分化，27例高分化；38例合并淋巴结转移，58例无淋巴结转移。74例CIN患者，年龄35～64岁，平均(50.26±3.26)岁，44例正常宫颈组织均来源于子宫肌瘤切除术患者，年龄31～60岁，平均(24.26±2.65)岁。以三组患者年龄对比，差异无统计学意义(P>0.05)，具有可比性。

1.2SP免疫组化检测：取宫颈组织标本行切片、脱蜡、水化处理。取pH值6.0枸橼酸钠对抗原行修复处理，对切片进行加热，加热温度控制100℃，并取PBS冲洗切片。依次滴入过氧化酶阻断液、非免疫生动物、第一抗体、生物素标记的第二抗体、SP溶液，每滴入1次溶液，于常温下孵育10 min，最后滴入DAB显色剂显色，于室温下孵育5 min，将切片置于显微镜下观察染色情况。

1.3结果判断标准：于显微镜下观察细胞核染色情况，若为棕褐色颗粒状，则提示SOX2为阳性表达。判定标准：①观察细胞核染色深度积分，分值为0～3分，0分为无染色，1分为弱染色，2分为中度染色，3分为强染色；②观察细胞的染色率，分值为0～3分，0分为无染色，1～3分染色率临界值分别为25%、50%。两种判定标准值：将染色深度和细胞染色率分值相加，0分提示SOX2为阴性表达，<2分为弱阳性，3～4分为中度阳性，>5分为强阳性。

2 结果

2.1不同宫颈组织的SOX2-mRNA的表达情况：宫颈鳞癌组织的SOX2-mRNA相对表达量为0.895±0.197，明显高于CIN组织0.453±0.068和正常宫颈组织0.218±0.065，差异具有统计学意义(P<0.05)，见表1。

表1 同宫颈组织的SOX2-mRNA的表达对比

注：与宫颈鳞癌组织相比，①t=18.58，P<0.05；②t=22.86，P<0.05

2.2宫颈鳞癌临床病理表表现与SOX2表达的关系：Ⅱa期宫颈鳞癌组织的SOX2阳性表达率为82.50%，显著高于Ⅰ期51.79%，低分化宫颈鳞癌组织的SOX2阳性表达率94.44%，显著高于中分化(69.70%)和高分化(51.85%)，有淋巴结转移宫颈鳞癌组织的SOX2阳性表达率84.21%，显著高于无淋巴结转移的50.34%，差异均具有统计学意义(P<0.05)。见表2。

表2 宫颈鳞癌临床病理表表现与SOX2表达的关系[例(%)]

3 讨论

SOX属于SRY相关基因中的一种，在胚胎干细胞、生殖道细胞、肿瘤中的阳性表达相对较高。梁洪享等指出，SOX蛋白可直接参与神经、器官发育中，若其出现病变，可能诱发疾病[4]。随着临床对SOX的是深入研究，发现SOX2作为SOX的转录因子在肺癌、乳腺癌的阳性表达率相对较高[5-6]。有文献指出，食管鳞癌的SOX2阳性表达率高达56.0%显著高于食管癌正常黏膜组织。临床研究表明，宫颈鳞癌的发生、发展可能与SOX2表达存在直接关系。HPV感染是宫颈鳞癌发病的高危影响因素，部分HPV感染的细胞球可能病变为肿瘤细胞，诱发宫颈鳞癌[7]。

本研究中，宫颈鳞癌组织的SOX2-mRNA相对表达量为0.895±0.197，明显高于CIN组织和正常宫颈组织，差异具有统计学意义(P<0.05)。Ⅱa、低分化以及存在淋巴结转移患者宫颈鳞癌组织的SOX2阳性表达率相对高，与Ⅰ期、中高分化、无淋巴结转移的宫颈鳞癌组织相比，差异具有统计学意义(P<0.05)。结果显示,SOX2可能参与至宫颈鳞癌的发展中。陈淑贞等[8]分析SOX2在胃癌中的表达情况，发现与正常胃组织相比，SOX2-mRNA呈明显上升趋势。蔡永萍等[9]提出SOX2在骨肉瘤中的阳性表达率相对较高，本研究结果与其相符。有研究表明，肿瘤分期与分化情况均存在SOX2阳性表达，含SOX2蛋白细胞可能是肿瘤细胞，但该研究结果结果还有待进一步证实。谷冀晖等认为，SOX2的阳性表达与肿瘤分化程度呈负相关关系，可能与肿瘤组织的浸润深入有关[10]。

综上所述，SOX2与宫颈鳞癌的分化程度、淋巴结转移情况等存在直接关系，对患者的预后诊治具有指导意义。

4 参考文献

[1] 蔡春芳,谭国胜,俞 奇，等.转录因子SOX2在宫颈上皮内瘤样病变及宫颈癌中的表达及临床意义[J].南方医科大学学报,2013,33(1):128.

[2] 李鹏飞,吕慧娜,韩立波，等.转录因子Oct4、Sox2在人肺癌中的表达及其临床意义[J].山东医药,2012,52(20):79.

[3] 盖文君,姚 宏,姚孟飞，等.SOX2 OCT4β-连环蛋白p120ctn在甲状腺癌中的表达及临床意义[J].中国药物与临床,2014,21(7):885.

[4] 梁洪享,钟 竑,罗 勇，等.肿瘤干细胞标志物CD133、CD44、SOX2、OCT4、ALDH1在非小细胞肺癌组织中的表达及临床意义[J].肿瘤防治研究,2013,40(12):1138.

[5] 张广杰.转录因子SOX2在常见肿瘤研究中的新进展[J].重庆医学,2012,41(21):2221.

[6] 姚孟飞.SOX2 OCT4基因在恶性肿瘤转移中的研究进展[J].中国药物与临床,2014,11(7):917.

[7] 常晓晗,张 晶,魏 恒，等.沉默SOX2对宫颈癌细胞增殖及侵袭能力的影响及机制研究[J].医学临床研究,2014,9(6):1056.

[8] 陈淑贞,许 玲,刘凤军，等.SOX2在胃癌组织中的表达与临床意义[J].中国现代普通外科进展,2012,15(7):537.

[9] 蔡永萍,万 阳,刘德宝，等.Sox2在骨肉瘤组织中的表达及其临床病理意义[J].中国组织化学与细胞化学杂志,2014,23(1):6.

[10] 谷冀晖,王 心,胡春艳，等.宫颈鳞癌组织中Sox-2的表达变化及意义[J].山东医药,2012,52(30):36.