红花黄色素联用奥美沙坦对肾性高血压大鼠循环及心肌组织IL-6和IL-10水平的影响

汪汉东 周忠荣 张春天 徐 钢

(黄石市爱康医院肾病内科，湖北 黄石 435000)

高血压是动脉粥样硬化、冠心病和脑血管疾病的重要致病因素之一〔1〕。研究表明高血压为一种持续低度的炎症反应状态，而促炎性细胞因子在高血压的发生发展过程中起着关键的作用，如白细胞介素(IL)-6、肿瘤坏死因子(TNF)-α等，它们不仅产生胰岛素抵抗，而且还与高血压性心脏病、冠心病甚至心力衰竭密切相关〔2,3〕；研究显示抗炎性细胞因子IL-10特别是在减轻炎症方面表现出了许多机体保护的作用〔4〕，因此升高IL-10的水平可能对机体有利。血管紧张素受体拮抗剂和红花黄色素(SY)均可以降低循环中促炎性细胞因子如TNF-α、IL-1β、IL-6等的水平〔5,6〕，但对IL-10的影响尤其是二药联用的实验观察鲜有报道。本研究观察SY联用奥美沙坦(OM)治疗对高血压大鼠血液及心肌组织内IL-6和IL-10水平的影响。

1 材料与方法

1.1材料 清洁级雄性Wistar大鼠由烟台绿叶制药动物实验中心提供；SY由山西华辉凯德制药有限公司生产，国药准字Z20050594；OM酯由第一三共制药(上海)有限公司生产，国药准字H20060371；IL-6 和 IL-10酶联免疫吸附法(ELISA)检测试剂盒由武汉贝因莱生物科技有限公司提供。

1.2方法

1.2.1高血压大鼠模型的制备 大鼠术前禁食、称重，按0.3 ml/100 g体重给予10%水合氯醛腹腔注射麻醉，沿左肋弓下缘至髂前区域剪毛，继以碘伏消毒后，逐层剪开腹腔，手术组大鼠于左肾后上方分离肾动脉，在左右肾动脉分支点以上的腹主动脉的下方穿入手术丝线，沿血管走行方向放置磨钝的5号针头与腹主动脉以丝线一并结扎，然后抽出针头，造成腹主动脉狭窄程度50%以上，再逐层缝合腹壁；假手术组大鼠切开腹腔分离腹主动脉后即缝合腹腔，术后常规给予青霉素10万U/kg肌注3 d。

1.2.2分组 选取体重170～250 g雄性大鼠50只，随机分为手术组和假手术组。手术组分别为模型组、SY组、OM组及联合用药组，各组分别按照上述方法进行手术。各组实验中均有动物死亡。

1.2.3给药方法 大鼠术后3 d开始给药，各组大鼠给药均按1 ml/100 g的容量以灌胃方式进行，1次/d，时程7 w。给药剂量分别为：SY组SY 100 mg/kg，OM组OM 10 mg/kg,联合用药组OM 10 mg/kg+SY 100 mg/kg,SO组及MC组给予等量灭菌饮用水。

1.2.4取材 给药结束后，将大鼠麻醉后剪开腹腔，腹主动脉内取血，然后摘取心脏，把分离的血清和组织放入-80℃冰箱保存。

1.2.5标本测定 采用ELISA测定大鼠血清及心肌组织匀浆IL-6、IL-10的水平，免疫组织化学检测心肌组织IL-6、IL-10表达。

1.3统计学方法 采用SPSS13.0软件进行方差分析。

2 结 果

2.1各组血清及心肌组织IL-6和IL-10水平比较 与假手术组相比，模型组血清及心肌组织IL-6 和 IL-10 水平均明显升高，差异有统计学意义(P<0.001)；与模型组相比,药物治疗组血清及心肌组织内 IL-6 水平均明显降低(均P<0.001)，而血清及心肌组织内IL-10水平无明显变化(P>0.05)；与单药治疗相比，联合用药组心肌组织IL-6 水平下降更加明显(P<0.001),但对IL-10水平及血清IL-6水平的影响变化不大(P>0.05)。见表1，表2。

表1 各组血清IL-6和IL-10水平比较

与假手术组比较:1)P<0.001；与模型组比较:2)P<0.001；与联合用药组比较:3)P<0.001

2.2各组心肌组织免疫组织化学结果比较 与假手术组相比，模型组心肌组织内IL-6 和 IL-10 水平均明显升高(P<0.001)；与模型组相比,药物治疗组心肌组织内 IL-6 水平明显降低(P<0.001)，而心肌组织内IL-10水平无明显变化(P>0.05)；与单药治疗相比，CT组心肌组织内 IL-6 水平下降更加明显(P<0.001),但对IL-10水平影响变化不大(P>0.05)。 见图1。

表2 各组心肌组织IL-6和IL-10水平比较

图1 各组心肌组织IL-6表达免疫组织化学结果(DAB，×200)

3 讨 论

高血压是严重危害人类健康的疾病之一，尽管已引起了全世界的关注，但其发病率仍呈逐年上升的趋势。长期、持续的血压增高，特别是肾素-血管紧张素-醛固酮系统(RAAS)的激活，导致机体神经内分泌及免疫系统的功能失调，进而促使各种靶器官损害的发生和动脉粥样硬化、心脑血管疾病等的形成〔7〕。在这一过程中，炎性机制起着极其重要的作用，炎性机制不仅参与高血压的发生，而且与高血压的发展密切相关〔8，9〕。促炎性细胞因子如IL-6，不仅导致高血压左室肥厚，而且也可导致心肌纤维化、心脏舒张功能的异常，并且颈动脉内膜厚度也与其水平的高低密切相关〔10〕，因此，降低IL-6在机体内的水平有益于高血压及其并发症的发生发展。

抗炎性细胞因子IL-10是近年来医学上越来越重视的一种细胞因子，研究显示其对机体有利的特性，IL-10不仅可改善血管紧张素Ⅱ介导的机体氧化应激反应和血管功能异常，在血管壁内发挥保护作用〔11〕，而且IL-10过度表达有延缓动脉粥样硬化发展的可能〔12〕，同时，IL-10还可以减轻血管对强烈收缩血管的物质内皮素-1的反应〔13〕，故提升机体内IL-10的水平也是高血压抗感染治疗的一个靶点。

血管紧张素Ⅱ在高血压的发生发展机制中起着决定性的作用，其活性增加不仅使血压升高，同时也促使炎性系统的激活而诱发炎性反应，故抑制RAAS的活性也是高血压抗感染治疗的一个手段。本研究表明高血压时存在炎性机制的激活，而血管紧张素受体I拮抗剂——OM能够明显降低IL-6在循环和心肌组织内的浓度，与相关研究结果一致〔14〕，而对抗炎性细胞因子的作用观察中，显示OM可能具有维持IL-10在机体内的浓度的作用，表明其对炎性机制的抑制作用不仅仅是通过降低促炎性因子活性这一途径。

中药为祖国医学的特色之一，近年来，越来越多的有效成分从传统中药中提取出来并应用于临床，在医疗保健中也发挥了重要的作用。SY是一种中药红花提取物，主要活性成分为查尔酮类化合物，具有抗氧化应激、抑制核因子-κB活性和保护血管内皮细胞功能等多种作用〔15〕，也有抑制炎症反应的功能，如降低IL-1β,TNF-α等mRNA的表达〔16〕,本研究显示SY也可明显降低高血压大鼠血清和心肌组织内IL-6的浓度，并可能具有维持抗炎性细胞因子IL-10在机体内的水平的作用。

4 参考文献

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