清肝降浊颗粒制备工艺研究

2018-05-22初洪波刘艳华成光宇

吉林中医药 2018年5期

初洪波，刘艳华，成光宇

（长春中医药大学附属医院，长春 130021）

“清肝降浊颗粒”是由长春中医药大学与吉林修正药业集团股份有限公司合作，以产学研的方式，研制开发的用于各类型脂肪肝治疗的中药复方新药。清肝降浊颗粒的处方来源于临床经验方，由黄芪、五味子、刺五加、决明子、陈皮、竹茹等中药组成，具有益气活血，化瘀通络的功能，主要用于各年龄段脂肪肝（气虚血瘀型）的治疗[1-8]。本研究采用正交试验法优选清肝降浊颗粒的提取工艺。

1 实验材料

1.1 药品与试剂黄芪、五味子、刺五加、决明子、陈皮、竹茹药材购于吉林省北药集团。五味子醇甲对照品（购于中国食品药品检定研究院，批号110857-201201）。试剂甲醇为色谱纯，其余试剂均为分析纯，水为超纯水。

1.2 仪器高效液相色谱仪（日本岛津LC-2010A），紫外检测器，Lab solution色谱数据工作站，CP225D型电子分析天平（德国塞多利斯天平有限公司），DZF型真空干燥箱（上海博迅）。

2 处方及制备工艺

2.1 提取工艺路线的设计[9-11]本处方是在临床基础上总结出来的经验方，由黄芪、五味子、刺五加、决明子、陈皮、竹茹等中药组成的汤剂，有较好的疗效，为了保证疗效，仍采用水煎煮的方法进行提取。

2.2 提取工艺条件的研究[12-14]对水提取来说，影响提取效果的因素主要有3个，即：加水倍数、煎煮次数、煎煮时间。使用正交表 L9（34）安排试验，每个因素选择了3个水平，见表1。

表1 水煎煮的因素水平表

2.2.1 考察指标以出膏率和五味子醇甲含量为水提工艺研究的考察指标。

2.2.2 样品制备按处方比例称取黄芪15 g、五味子10 g、刺五加10 g、决明子10 g、陈皮10 g、竹茹10 g为1份，共取9份，按照因素水平表的条件进行试验，滤过，合并提取液，减压浓缩，减压干燥，称重。

2.2.3 正交试验样品中红景天苷含量测定色谱条件与系统适应性试验以十八烷基硅烷键合硅为填充剂；以甲醇为流动相A ，水为流动相B ，按表2的规定进行梯度洗脱；检测波长为250 nm。

表2 梯度洗脱数据

2.2.3.1 对照品溶液制备取五味子醇甲对照品适量，精密称定，加甲醇制成每l mL含0.3 mg的溶液，即得。

2.2.3.2 供试品溶液制备取各组正交试验样品粉末（过三号筛）约0.5 g，置25 mL量瓶中，加甲醇适量，超声处理（功率250 W，频率20 kHz）30 min，放冷，加甲醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。

2.2.3.3 测定方法分别精密取对照品溶液与供试品溶液各10 µL，注入液相色谱仪，测定，计算，即得。结果见表3。

以出膏率和五味子醇甲含量的综合评分为考察指标进行分析，结果见表4～5。

表3 正交试验数据

表4 正交试验 [L9（34 ）] 及结果

表5 水煎煮提取的方差分析

由方差结果可知，各因素对试验结果影响的重要性依次为C＞B＞A，即煎煮次数C是主要影响因素，煎煮时间B及加水量A是次要影响因素。结合直观分析，煎煮法条件宜为A3B3C3，即：加8倍量水煎煮3次，每次2 h。由于方差分析得出A、B因素的任何水平对试验结果均无显著性影响的结论，为降低生产成本，节约提取时间，综合分析各因素对试验结果影响的重要程度，确定A3B2C3为最佳提取方案。即：加8倍量水煎煮3次，每次1.5 h。

2.3 制剂成型性研究[15-17]由于干浸膏有很强的吸湿性，直接制成颗粒在制备和贮存过程中都有一定的困难，需加入适量辅料以满足制备工艺和制剂要求，一般按干浸膏:辅料＝1:0.5～2 的比例加入辅料。

2.3.1 辅料的选择和用量糊精、蔗糖是常用的辅料，根据干浸膏有很强吸湿性的特点，经过试验摸索，确定干浸膏:辅料＝1:2 的比例加入适量糊精，用量是按处方在半成品（制颗粒前）时，加辅料至1000 g。

2.3.2 制颗粒所用湿润剂的选择由于干浸膏、糊精、蔗糖混合后仍有一定的吸湿性，故以不同浓度的乙醇为湿润剂，制软材，再制湿颗粒，结果见表6。