畜禽用多种微量元素注射液的制备工艺研究

谢鹏，蒋洪梅

(1.内江职业技术学院，内江 641100；2.四川恒通动物制药有限公司，内江 641000)

0 引言

微量元素是动物生长发育过程中必不可少的营养元素，虽然动物对其需求量较少，但是当饲料中缺乏时，将会对动物的生长发育造成极大的危害，因而在动物日常饲养管理中，我们都要补充一定量的微量元素。生产实践中补充微量元素的方法多种多样，如加入饲料或饮水中混饲、灌服、舔食等，这些方法目前在众多大中型养殖场中广泛使用，但它们存在浪费大、补充效果不确实等一些列弊端。为了更好地控制养殖成本，提高微量元素制剂的使用效率，我们考虑把动物所需的各种微量元素混合、溶解，制成针剂，利用注射的途径来补充动物对微量元素的需要，这样不仅最大限度的提升了微量元素及其制剂的使用效率，同时其补充量精确到了每一头畜禽，效果确实。下面将这种注射液的制备工艺报道如下。

1 试验材料

1.1 药品与试剂

柠檬酸铁（分子式C6H5FeO.5H2O）、硫酸锌（分子式ZnSO4.7H2O）、硫酸铜（分子式CuSO4·5H2O）、硫酸锰（分子式MnSO4·H2O）、硫酸钴（分子式CoSO4·7H2O）、亚硒酸钠（分子式Na2SeO3·5H2O），纯度均为AR级，购自上海天齐生物科技有限公司；注射用水；氢氧化钠（NaOH）缓冲液。

1.2 仪器

分析天平；1000 mL容量瓶；布氏漏斗；2 mL 曲颈易折安瓿，购自濮阳市鲁蒙玻璃制品有限公司；1000 mL烧杯；玻棒；pH试纸；单针竖式灌注器，RFJ安瓿熔封机，购自吉首市中诚制药机械厂；高压灭菌锅；YZ1/20型安瓿印字、包装机，长沙中南制药机械厂。

2 制备工艺[1-2]

2.1 原辅料及容器、设备的前处理

2.1.1 生产环境的清洁消毒

由于注射剂是直接注入动物体内的，因而对生产环境和设备的要求较高。要求整个生产区域在静态条件下检测到的尘埃粒子数、浮游菌数或沉降菌数必须符合国家标准。一般生产环境用0.1%的新洁尔灭喷雾消毒，按先上后下、先物后地、先折后洗、先零后整的原则进行。而后用带有消毒剂的拖把、抹布擦洗地板、墙壁，半小时后用注射用水冲洗干净，使生产环境达到万级洁净区。此外，生产环境的湿度应控制在45%～65%，最大不超过75%。

2.1.2 原料的准备

依据配方，利用分析天平准确称取柠檬酸铁（C6H5FeO7·5H2O）8.0 g、硫酸锌（ZnSO4·7H2O）3.5 g、硫酸铜（CuSO4·5H2O）1.8 g、硫酸锰（MnSO4·H2O）0.8 g、硫酸钴（CoSO4·7H2O）0.8 g、亚硒酸钠（Na2SeO3·5H2O）0.1 g置于洁净的烧杯中备用。

2.1.3 注射容器的处理

注射剂（尤其是小容量注射剂）的盛装容器主要是安瓿，试验中选择2 mL曲颈易折安瓿，要求所选择的安瓿为棕色，质量符合国家标准，用离子交换水灌瓶蒸煮，而后用注射用水冲淋，而后置于180 ℃的烘箱中干热灭菌1.5 h。

2.1.4 其他容器设备的处理

主要包括烧杯、容量瓶、漏斗、单针竖式灌注器等的清洗、消毒。烧杯、容量瓶等先用蒸馏水清洗3～5次，再用注射用水冲洗2～3次，并置于烘箱中烘干后备用。布氏漏斗、单针竖式灌注器先用2%～4%的NaOH消毒，再用蒸馏水清洗3～5次，最后用注射用水冲洗2～3次，烘干备用。

2.2 药液的配制与过滤

将准确称量的药品倒入洁净的烧杯中，向烧杯中倒入600 mL注射用水，将烧杯及其内容物置于80℃的恒温水浴锅中加热溶解，并不断用玻棒搅拌，直至烧杯中药品完全溶解为止。过滤装置选用布氏漏斗，粗滤时先用纱布垫在漏斗底部，在纱布上铺一层活性炭，而后再铺上一层纱布，将配制好的药液倒入漏斗中过滤。粗滤完成后，将漏斗中的纱布和活性炭取出，在漏斗中放入直径为1 um的多孔塑料，将粗滤后的滤液再次倒入漏斗中精滤。将精滤后的滤液倒入1000 mL的容量瓶中，再缓慢倒入注射用水，直至药液的总容积达到1000 mL时止。

2.3 药液的pH调整[3-4]

依据《中国药典》2000年版规定，注射剂的pH值为4.0～9.0之间。用氢氧化钠（N a O H）缓冲液（0.1 mol·L-1）调节制剂的pH值，观察调整后制剂的颜色（与标准比色剂比较）和澄明度，确定出药液的pH为4.5～6.5。结果表1：

表1 pH对畜禽用多种微量元素注射液澄明度与颜色的影响

2.4 药液灌封

选用单针竖式灌注器进行手工灌注。首先将配置好的药液倒入竖式灌注器内，利用定位螺丝和微调螺丝将灌注体积调整为2 mL。上提灌注器的唧筒，使筒内压力减小，下活塞开放，上活塞关闭，将药液吸入；而后再下压灌注器唧筒，增大筒内压力，使上活塞开放、下活塞关闭，将药液注入准备好的安瓿瓶内。如此反复，进行灌注。在灌装时一定注意不要将药液喷洒在安瓿瓶壁上，灌装结束后向安瓿内通入氮气一次。

灌装好的安瓿要及时熔封。熔封时首先连接好熔封机的燃气管道，插好电源，打开电源开关，而后慢慢开启燃气针型阀，直到点着针头，慢慢开启助燃气针型阀，直到两个针头发出细长蓝色火焰为止，此时熔封机处于工作状态，蓝色火焰越长越好。调整火焰的位置和高度，使火焰处于托盘中心和安瓿拉丝位置处，把灌好药液的安瓿放置于托盘上，并徐徐放入火焰中心，左手匀速转动瓶子，等烧到煅红色时右手用镊子把上截拉掉即可。安瓿熔封时应严密，无缝隙、不漏气，颈端应圆整光滑，无尖头及小泡。

2.5 药物的灭菌与检漏

将分装好的安瓿置于灭菌柜中，向灭菌柜通入100 ℃饱和蒸汽30 min，即可达到灭菌效果。

灭菌完成后，立即对安瓿进行检漏。向灭菌后且温度较高的灭菌锅内加入有颜色的水，使锅内安瓿突然遇冷，瓶内压力减小，当熔封效果不好时，颜色水即从漏气的毛细孔中进入瓶内而被检出。

2.6 药液的质量检查

为确保注射剂的质量，在分装完成后，常常要对药液进行质量抽查。注射液的质量检查主要包括以下几个方面的内容：

2.6.1 澄明度检查

注射剂的澄明度检查常选用24 in青光日关灯作为光源，其灯管直径为3.8 cm，20 w，做成伞棚式装置。背景用不反光的黑色绒布，并在背部面侧1/3处和底部为不反光的白色（供检有色物质）。检查时先抽样200支，擦净安瓿外表面，每次取6支，在距光源20 cm处轻轻转动试剂瓶进行检查，检查时间为18 s。当发现安瓿瓶内无异物或仅带少量白点时判定为合格。经检查，本试验抽检的200支安瓿瓶内无异物，因而判定本批试剂澄明度合格。

2.6.2 热原检查[5-7]

利用鲎试验法进行检测，其原理是利用鲎试剂与细菌内毒素产生的胶凝反应来判断细菌内毒素的限量是否符合规定。具体操作为：取装有0.1 mL鲎试剂的安瓿5支，其中2支加入0.1 mL供试品溶液作为供试管，1支加入0.1 mL细菌内毒素标准工作液作为阳性对照管，1支加入0.1 mL细菌内毒素检查用水作为阴性对照管，1支加入0.1 mL供试品阳性对照液（供试品中加入细菌内毒素标准液）做为供试品阳性对照管，将安瓿中溶液轻轻混匀后密封，垂直放于37 ℃的恒温器中，保温60 min，然后观察结果。

结果判断：将安瓿轻轻取出，缓缓倒转180°时，管内凝胶不变形，不从管壁脱落为阳性（+），凝胶不能保持完整，或脱滑者为阴性（-）。2支供试品管均为阴性（-）则认为供试品细菌内毒素检查合格，否则不合格。阳性对照管或供试品对照管为阴性（-），阴性对照管为阳性（+），则试验无效。如2支供试品管1支为阳性（+），1支为阴性（-），则需按上述方法另取4支供试品进行复试，4支供试品中有1支为阳性（+），则供试品细菌内毒素检查不合格。具体实验结果见表2。

表2 用鲎试验法检查试验品热原

从上述测定可以看出，本批次的注射剂热原含量符合国家标准。

2.6.3 无菌检查

主要利用直接接种法进行检查。基本操作方法是将供试品溶液接种于培养基上，培养数日后观察培养基上是否出现浑浊或沉淀，并与阳性及阴性对照品比较。经检查本试验品细菌含量符合国家标准。

2.7 印字、包装

注射剂经质量检测合格后方可印字与包装。每支注射剂均须印上品名、规格、批号等。印字方法主要选用手工印字法，所印字迹应清晰可见，且不易抹掉。

装安瓿的纸盒内应衬有瓦楞纸，并应放有割颈用小砂石片及使用说明书。盒外应贴标签，标签上须注明下列内容：（1） 注射剂名称（中文、拉丁文全名）；（2）内装支数；（3） 每支容量与主药含量；（4） 批号、制造日期与失效日期；（5） 处方；（6） 制造厂名称和地址；（7） 应用范围、用法、用量、禁忌；（8） 贮藏方法与条件。

3 讨论

（1）为确保注射液中各成分的含量，原料在溶解时一定要充分，溶解过程中的加热时间要短，否则在高温条件下可能会引发各种元素的衰减。同时在称量时可酌情增加投料量，具体投料量可选用以下公式进行计算：原料（附加剂）实际用量=原料（附加剂）理论用量×成品标示量百分数/原料（附加剂）实际含量；原料（附加剂）用量=实际配液量×成品含量%，实际配液量=实际灌注量+实际灌注时的损耗量。

（2）微量元素的保存受温度、光照等条件的影响较大，因而在分装药品一定要选择适当的盛装容器。其盛装容器的选择一定要参考药品的稳定性实验。本试验品选择棕色安瓿瓶盛装。

（3）试剂的pH值偏高或偏低均不利于注射液的吸收，同时还会影响药品性状和增加动物疼痛感，因而合理的药液pH对于药物的疗效也是十分重要的，同时药液的pH对微量元素的稳定性也会造成极大影响，，本品的pH定在4.5～6.5之间。

参考文献

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[2] 中国药典委员会.中华人民共和国药典2010版（二部）[M].北京：中国医药科技出版社，2010.

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[7] 方亮主编.药剂学，第8版[M].北京：人民卫生出版社，2016.