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镉胁迫条件下硅对果蔗幼苗生理生化特性的影响

2018-05-17王天顺蒋文艳杨玉霞罗丽红莫磊兴

河南农业科学 2018年3期
关键词:生理叶绿素幼苗

王天顺,廖 洁,陈 伟,蒋文艳,杨玉霞,罗丽红,莫磊兴*

(1.广西农业科学院 农产品质量安全与检测技术研究所,广西 南宁 530007;2.农业部甘蔗品质监督检验测试中心(南宁),广西 南宁 530007)

果蔗汁多清甜,脆嫩爽口,有润津止渴、清凉解毒之美誉,赢得越来越多消费者的青睐,其种植面积正逐年扩大。但由于果蔗长期连作,以及农业投入品的不合理使用,导致重金属镉(Cd)在土壤中日渐积累,Cd污染状况日益严重,进而会给消费者的身体带来安全隐患[1]。因此,对果蔗生长土壤中的Cd进行防治调控意义重大。硅(Si)是地球上丰富度仅次于氧的元素,也是植物生命周期内所需的重要营养元素,Si可以调控植物对重金属的抵抗力[2-3]。研究表明,Si能调控植物叶片的光合作用及光合效率;能降低根系细胞的透性,提高根系活力,促进根系的繁育生长;能改善抗氧化酶活性用以抵御植物体内自由基伤害等,进而缓解Cd对植物的影响[4-7]。笔者前期研究了Cd胁迫下Si对果蔗幼苗鲜质量、株高、根长的影响以及Cd在果蔗幼苗根、茎、叶中的积累分布[8-10],但没有研究Cd胁迫下Si对果蔗幼苗生理生化指标的确切影响,而且对相应的影响机制未做深入探讨。为此,采用砂培试验,研究Cd胁迫下不同Si用量对果蔗幼苗生理生化指标的影响,以期进一步揭示Cd胁迫下Si对果蔗毒害的缓解机制,为合理利用Si缓解重金属对植物的毒害提供科学依据。

1 材料和方法

1.1 试验材料

供试果蔗品种为Badila。

1.2 试验方法

采用生物组培方法培育果蔗幼苗,培育50 d后,选取生长均匀的果蔗幼苗,将根部用超纯水反复冲洗干净后,栽种3棵于砂桶中,砂桶直径20 cm、高25 cm,每桶装12 kg砂粒。按文献[10]方法配制pH值为5.5左右的营养液,间隔3~5 d向砂桶中施浇营养液一次,每次0.5 L。预培养60 d后,施含Cd、Si的营养液。含Cd、Si的营养液共设置5个质量浓度,每个质量浓度4次重复。T0:Cd为0 mg/L,Si为0 mg/L;T1:Cd为10 mg/L,Si为0 mg/L;T2:Cd为10 mg/L,Si为10 mg/L;T3:Cd为10 mg/L,Si为20 mg/L;T4:Cd为10 mg/L,Si为40 mg/L。分别以T0和T1处理作为Cd空白对照和Si空白对照,初次施含Cd、Si的营养液2 L,7 d后再施含Cd、Si的营养液2 L,然后间隔3~5 d施不含Cd、Si的营养液0.5 L,30 d后采样。

1.3 样品采集

处理30 d后采取果蔗叶片,用去离子水把叶片反复冲洗干净,再用吸水纸将叶片擦拭干净,液氮速冻,超低温保存备用。

1.4 测定项目及方法

采用氮蓝四唑法测定超氧化物歧化酶(SOD)活性[11];采用紫外吸收法测定过氧化氢酶(CAT)活性[11];采用硫代巴比妥酸比色法测定丙二醛(MDA)含量[11];采用酸性茚三酮比色法测定游离脯氨酸(Pro)含量[11];采用比色法测定叶绿素含量[12]。

1.5 数据处理及分析

采用Excel 2010处理数据,采用 SPSS 18.1 进行数据差异显著性分析。

2 结果与分析

2.1 Cd胁迫下Si对果蔗叶片抗氧化酶活性的影响

2.1.1 SOD活性 由图1可知,相比T0处理,T1处理果蔗叶片因受Cd胁迫影响SOD活性提高,提高幅度为9.58%,但差异不显著;其余处理SOD活性均降低,差异也均不显著,分别降低7.05%、7.49%、11.90%。与T1处理相比,各添加Si处理果蔗叶片SOD活性均不同程度降低,分别降低15.18%、15.58%、19.60%,差异均未达显著水平。因此,在一定质量浓度的Cd胁迫下,无Si处理时Cd胁迫提高了果蔗叶片SOD活性,但施用不同质量浓度Si后,果蔗叶片SOD活性均所下降,可见施Si缓解了Cd胁迫对果蔗叶片的影响。

相同字母表示处理间差异不显著(P>0.05),下同

2.1.2 CAT活性 由图2可知,相比T0处理,T2处理果蔗叶片CAT活性降低,降低幅度为20.01%,差异不显著;其余处理CAT活性均提高,分别提高11.43%、14.27%、8.37%,但差异均未达显著水平。与T1处理相比,T3处理果蔗叶片CAT活性升高,提高幅度为2.46%;T4处理果蔗叶片CAT活性降低,降低幅度为2.57%;T2处理果蔗叶片CAT活性降低,降低幅度为28.21%,差异均不显著。因此,在一定质量浓度的Cd胁迫下,果蔗叶片CAT活性变化与施Si量有关,一定施用量的Si能缓解Cd对果蔗叶片的影响。

图2 不同处理对果蔗叶片CAT活性的影响

2.2 Cd胁迫下Si对果蔗叶片MDA含量的影响

由图3可知,相比T0处理,其余各处理果蔗叶片MDA含量均有所增加。其中,T1处理因受Cd胁迫影响,MDA含量显著增加了27.66%,T2、T3 和T4处理分别增加了8.52%、23.40%和14.90%,加Si各处理间差异不显著。与T1处理相比,各添加Si处理果蔗叶片MDA含量均不同程度减少,分别减少了15.00%、3.33%和10.00%,差异均未达显著水平。这表明加Si减少了因Cd胁迫引起的果蔗叶片MDA含量的增加程度,但减少程度不随Si用量的增加而发生明显变化。因此,在一定质量浓度的Cd胁迫下,施Si能缓解Cd对果蔗叶片的影响。

不同字母表示处理间差异显著(P<0.05),下同

2.3 Cd胁迫下Si对果蔗叶片Pro含量的影响

由图4可知,T1处理果蔗叶片受Cd胁迫影响Pro含量增加,增加幅度为10.42%;其余处理Pro含量均减少,分别减少34.14%、16.48%和31.98%,加Si各处理间差异不显著。与T1处理相比,各添加Si处理果蔗叶片中Pro含量均下降,分别减少了40.35%、24.36%和38.40%,T2和T4处理差异显著。这表明加Si降低了因Cd胁迫引起的果蔗叶片Pro含量。因此,在一定质量浓度的Cd胁迫下,施Si缓解了Cd对果蔗叶片的影响。

图4 不同处理对果蔗叶片Pro含量的影响

2.4 Cd胁迫下Si对果蔗叶片叶绿素含量的影响

各处理果蔗叶片叶绿素含量如图5所示,与T0处理相比,只有T3处理果蔗叶片叶绿素含量有所增加,增加幅度为8.92%;T1、T2和T4处理果蔗叶片叶绿素含量均有一定幅度降低,其中T1处理因受Cd胁迫影响,降低14.17%,T2 和T4处理分别降低5.35%和16.04%。与T1处理相比,施Si处理果蔗叶片叶绿素含量随着Si质量浓度的增加呈先增加后减小趋势,T2处理叶绿素含量增加10.28%,T3处理增加25.23%,T4处理减少2.18%,差异均未达显著水平。T3处理果蔗叶片叶绿素含量最多,是T0处理的107.49%,是T1处理的125.23%。因此,在一定质量浓度的Cd胁迫下,施Si缓解了Cd对果蔗叶片的影响。

图5 不同处理对果蔗叶片叶绿素含量的影响

3 结论与讨论

植物体在逆境条件下会启动膜保护系统,用于清除体内产生的自由基[13]。当植物体内产生的活性氧自由基得到及时清除时,其体内的活性氧自由基才能保持平衡,减少对植物的伤害。SOD和CAT是逆境胁迫下维持植物生存的重要酶类,是植物抗氧化酶系统的重要组成部分,其活性大小可用来评价逆境胁迫条件下植物抗胁迫能力的强弱[14-16]。本研究结果表明,在Cd胁迫条件下,相较T0处理果蔗体内不仅SOD活性有一定幅度升高,而且CAT活性也有一定幅度升高。施用不同质量浓度Si后,相较T1处理果蔗体内SOD活性均呈下降趋势,Si的作用开始发挥,降低了Cd胁迫的伤害;CAT 活性较T1处理先下降后变化不大,说明随着Si质量浓度的增加,Si的抑制伤害效果开始降低。综上,施Si减弱了Cd胁迫下果蔗幼苗受的伤害。这与前人[17-19]的研究结果类似。

植物组织在遭受重金属胁迫时,会启动自身膜系统来抵御重金属对其细胞膜组织的伤害,从而在体内发生一系列的生化反应用于自我保护,MDA就是这一作用过程中的产物,MDA含量可在一定程度上反映植物体内自由基的变化[20],可反映逆境条件下植物膜系统受伤害的程度[21-22]。本研究结果表明,当遭受重金属Cd胁迫时,明显刺激了果蔗叶片的膜系统,以致果蔗组织脂膜化作用加剧,MDA含量升高。施用不同质量浓度的Si后,果蔗叶片中MDA含量均比不施用Si处理有所降低,可见施Si减轻了果蔗叶片的膜脂过氧化程度,对Cd胁迫引起的膜系统危害有一定的缓解作用。但施用高质量浓度的Si时,缓解效果有所下降。说明在合适的质量浓度范围内,Si对Cd毒害才有缓解作用,这与张志雯等[23]、袁宇飞等[24]的研究结果相似。

Pro能有效保护植物细胞的膜系统[25],Pro在植物体内的积累可视为植物受到胁迫的一种信息指示[26-27],Pro含量可反映植物细胞结构和功能受损伤的程度,这是植物对逆境胁迫的本能防御反应[28]。本研究结果表明,当遭受重金属Cd胁迫时,果蔗幼苗叶片Pro含量升高,植物体内Pro含量的增加是植物对逆境胁迫的一种适应性反应,这与李文一等[29]的研究结果一致。随着Si的加入,各处理的Pro含量均较T1处理降低,说明Si在一定程度上缓解了Cd毒害对果蔗幼苗的影响,这与刘鸣达等[30]的研究结果类似。

叶绿素在植物进行光合作用过程中起着举足轻重的作用,是光合作用过程中必不可少的重要物质,其含量的高低能指示植物光合能力的强弱,也能衡量植物在逆境下受伤害的大小[31]。研究发现,Cd会致使叶绿体及色素解体,降低光合作用效率,从而导致植物叶片枯萎[32]。本研究结果表明,Cd胁迫减弱了果蔗叶片的光合作用,叶绿素含量降低;施Si后,随着Si用量的增加果蔗叶片叶绿素含量先增大后降低,在T3处理时叶绿素含量达到最大值,其中T2和T3处理果蔗幼苗叶绿素含量均高于T1处理,但T4处理果蔗幼苗叶绿素含量与T1处理差别不大。因此,在Cd胁迫条件下,一定质量浓度的Si可以缓解Cd毒害对果蔗幼苗的影响;但当Si的质量浓度过高时,缓解程度又有所降低。说明Si对Cd作用下果蔗幼苗叶绿素含量的影响是有限的,这与张志雯等[23]的研究结果类似。

综上,在Cd胁迫条件下,Si通过提高叶绿素含量、改善抗氧化酶的活性、调控MDA含量及Pro含量等途径,缓解重金属Cd胁迫对果蔗的毒害,使果蔗在逆境条件下得以生长。在Cd胁迫下,施用适量的Si可在一定程度上缓解Cd对果蔗幼苗造成的毒害,有关Si缓解果蔗幼苗Cd毒害的深层次生理机制尚待深入研究,可从果蔗组织内Cd的化学结合形态、亚细胞及分子分布方面开展进一步研究。

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