万寿菊与厚孢轮枝菌联合对烟草根结线虫病的防治效果

杨章明　常宁涛 　吴先华　甘勇　杜方志

摘要 [目的]明确万寿菊与厚孢轮枝菌联合对烟草根结线虫病的防治效果。[方法]在大田试验中设置3个处理（单独间作万寿菊、单独施用厚孢轮枝菌、间作万寿菊同时施用厚孢轮枝菌），对万寿菊與厚孢轮枝菌联合防治烟草根结线虫病的协同增效效应进行综合评价。[结果]烤烟间作万寿菊同时施用厚孢轮枝菌，能显著增加烤烟的株高和叶片宽度，烟草根结线虫病的防效高达68.1%，较单独间作万寿菊的防效提高了25.6%，较单独使用厚孢轮枝菌的防效提高了20.9%。[结论]万寿菊与厚孢轮枝菌联合防治烟草根结线虫具有显著的协同增效效应。

关键词 万寿菊；厚孢轮枝菌；联合防治；烟草根结线虫病

中图分类号 S435.72 文献标识码 A 文章编号 0517-6611（2018）27-0160-03

Integrated Control Effect of Tobacco Rootknot Nematode Disease by Tagetes erecta and Verticillium chlamydosporium

YANG Zhangming ，CHANG Ningtao，WU Xianhua et al

（Panzhihua Branch of Sichuan Tobacco Corporation， Panzhihua，Sichuan 617000）

Abstract [Objective]To identify the integrated effect of Tagetes erecta and Verticillium chlamydosporium against tobacco rootknot nematode disease. [Method]A threetreatments （single intercropping T. erecta ， single using V. chlamydosporium， intercropping T. erecta at the same time using V. chlamydosporium） field experiment was set to make a comprehensive evaluation on integrated T. erecta and V. chlamydosporium against tobacco rootknot nematode disease. [Result]Intercropping T. erecta while using V. chlamydosporium could significantly increase the height and maximum width of tobacco， which gained a high control efficiency of 68.1%， the control efficacies increased by 25.6% and 209% in single intercropping T. erecta and single using V. chlamydosporium. [Conclusion]The synergism of T. erecta and V. chlamydosporium shows obviously increase effects on controlling tobacco rootknot nematode disease.

Key words Tagetes erecta；Verticillium chlamydosporium；Integrated control；Tobacco rootknot nematode disease

作者简介 杨章明（1979—），男，四川攀枝花人，助理农艺师，从事烟叶生产技术推广工作。*通讯作者，农艺师，从事烟叶生产技术推广工作。

收稿日期 2018-05-26； 修回日期 2018-06-05

全球每年因植物线虫造成的损失高达数千亿美元[1]，其中以根结线虫Meloidogyne sp.为害最为严重[2]，已成为我国经济作物的重要病原线虫[3]。近年来，复种指数居高不下、连作频频，导致全国烟草根结线虫病为害面积呈逐年增加趋势[4]。目前防治根结线虫仍以化学防治为主[5]，其生产成本相对较高，且毒性相对较大，长期使用不仅会污染环境，而且对人畜健康存在巨大的潜在威胁[4]，近年来，由于烟草上大批化学杀线虫剂被禁止使用[6]，研究环境友好型其他防治措施来替代已迫在眉睫[7]。研究应用新的环境友好型生物防治技术来防治烟草根结线虫病，已成烟草行业公认的有效防治措施[8]。

长期以来，国内外学者在利用杀线虫植物防治根结线虫方面进行了大量研究，并取得了显著成果[9]，近年来研究较多的杀线虫植物为万寿菊[10-12] 。厚孢轮枝菌（Verticillium chlamydosporium）是一种在许多国家被广泛开发应用的食线虫生防真菌[11]，其能够寄生于胞囊线虫及其虫卵内，对根结线虫具有良好的防治效果[12-13]，因而被广泛应用于根结线虫生物防治领域[14-18]，但由于田间生态环境复杂多变，且近年来气候条件不断变化，致使厚孢轮枝菌表现出防效不稳定且见效慢的现象[19]。为解决上述问题，国内学者对利用植物组织提取物与根结线虫生防真菌联合防治根结线虫病进行了大量研究，但主要集中在植物组织提取物与淡紫拟青霉联合应用上[8，20-21]，鉴于此，笔者联合利用万寿菊与厚孢轮枝菌2种线虫生防因子，探索它们之间的协同增效机制，以期为烟叶生产中根结线虫病防治提供参考。

1 材料与方法

1.1 材料

供试植物：万寿菊，由云南绿叶生防科技有限公司提供的万寿菊种子培育。

供试菌剂：2.5亿活孢子/g厚孢轮枝菌，由云南陆良酶制剂有限责任公司提供。

供试作物：烤煙云85，由四川省烟草公司攀枝花市公司提供。

1.2 方法

大田试验安排在攀枝花市仁和区干坝子植烟区，海拔1 830 m，试验地属于根结线虫病历年发病较为严重地块，各试验小区的土壤类型 、栽培条件及水肥管理条件等均匀一致。烟株于4月27日移栽，株行距1.2 m×0.5 m。试验共设4个处理，3次重复，共12个小区，每小区植烟60株，采用完全随机区组排列方式。试验设计见表1。

1.3 测定项目及方法

1.3.1 烟株农艺性状。

于烤烟打顶期在各小区定株测量 5 株烤烟的株高、 茎围、 最大叶长、 最大叶宽，进行农艺性状比较，调查方法参照文献[22]，略有改动。

1.3.2 根结线虫病发病情况。

烟叶采收结束，采用5点取样法，在各处理小区挖取10 株完整的烟株根系，按照 GB /T 23222—2008 标准记载各处理烟株根部烟草根结线虫病的发病情况，计算各处理小区的病情指数及防效。

病情指数 = ∑[（ 病级数 × 该病级株数）/（ 调查总数 ×最高级值）] × 100

防治效果 =（ 空白病情指数 - 处理病情指数）/空白病情指数 × 100%

1.4 数据处理

采用DPS 7.0软件中Duncans新复极差法进行多重比较并进行显著性差异检验分析[23]。

2 结果与分析

2.1 不同处理烟株农艺性状比较

从表1可以看出，打顶期，与对照组相比，试验组各处理均能在一定程度上对烤烟农艺性状有所改善，其中株高促进效率以处理TV最高，达406%；茎围在处理VC与TV之间差异不显著，但显著优于空白；烤烟最大叶长在试验组各处理间差异不显著，但显著优于对照；烤烟最大叶宽以处理TV最大，达43.0 cm，较对照增加了47.8%。因此，烤烟间作万寿菊同时施用厚孢轮枝菌处理的烤烟农艺性状综合表现最好。

2.2 不同处理防治效果比较

从表2可以看出，烤烟采收结束，处理TV平均防效最高，达68.1%，较单独间作万寿菊平均防效提高25.6%，较单独施用厚孢轮枝菌防效提高209%。这说明万寿菊与厚孢轮枝菌之间具有显著的协同增效作用，两者联合使用，既能改善烤烟的综合农艺性状，又能提升烟草根结线虫病的防治效果。

3 结论与讨论

该研究结果表明，万寿菊与厚孢轮枝菌联合使用时能使厚孢轮枝菌对烟草根结线虫病的防治效果提高20.9%，且显著改善烤烟的高度与叶片宽度，这说明万寿菊与厚孢轮枝菌之间存在显著的协同增效作用，两者联合使用可作为1种具有生防潜质的根结线虫综合生防因子加以研究与应用。

土壤抑菌作用被认为是影响生防菌防治效果的重要因素[24]，研究发现，万寿菊根部提取物对多种病原菌具有明显的抑制作用，如枯萎病病菌、青霉、枯草芽孢杆菌等[25-26]。该研究发现，间作万寿菊同时施用厚孢轮枝菌能显著提高烟草根结线虫病的防治效果，这可能是万寿菊根系产生了某些具有抑制病原菌的生物碱解除了部分土著病原菌（青霉、枯草芽孢杆菌）对厚孢轮枝菌的抑制作用，从而提高了厚孢轮枝菌在土壤中的定殖率，更有利于根结线虫病的防治，但此假设还需要大量的抑菌试验加以验证。

Kerry等[27]认为，衡量1株根结线虫生防菌生防潜质的重要指标应包括以下3个方面：①产孢能力；②对线虫及虫卵的作用活性；③菌株在土壤中的定殖能力。研究表明，万寿菊与淡紫拟青霉在防治根结线虫之间存在显著协同增效机制[8，21]，这些协同增效机制主要包括：万寿菊适合淡紫拟青霉生长、产孢和萌发，能促进淡紫拟青霉对根结线虫卵的抑制，淡紫拟青霉 Paecilomyces lilacinus 和厚孢轮枝菌 V.chlamydosporium 是防治根结线虫的2种重要生防真菌，它们同属丝孢纲，具有一定的相似性[28]。该研究发现，万寿菊与厚孢轮枝菌联合防治烟草根结线虫具有显著的协同增效机制，这一协同增效机制可能与万寿菊与淡紫拟青霉的协同增效机制相似，但这一假设，还需通过万寿菊对厚孢轮枝菌的生长适应性、产能和萌发，促进厚孢轮枝菌对根结线虫卵的抑制等进一步验证。土壤中的 Cu2+和Mg2+是影响厚孢轮枝菌在土壤中定殖和生长的2种重要金属离子[29]，该研究万寿菊促进了厚孢轮枝菌对根结线虫防治效果可能是万寿菊根系分泌物影响了烟株根系土壤中Cu2+和Mg2+所致，这一假设还需要进一步研究。万寿菊根、茎、叶、花等对根结线虫都具有一定的毒杀作用，不同部位效果不同， 在防治烟草根结线虫方面建议联合厚孢轮枝菌使用，既能增产，又能提高根结线虫的防治效果，但在两者之间如何更好地联合使用（使用时间、间作密度、使用根或秸秆或叶或花）还需要进一步研究。

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