枝原净TM产品特点及在治疗肠道和呼吸道疾病中的使用

Ulrich Klein

本文是根据Ulrich Klein博士的主题演讲整理而成的听课笔记

Ulrich Klein博士是礼来动保猪产品全球技术服务经理和食品动物全球营销团队成员，还是国际动保联盟会员、欧洲猪健康管理协会会员。Ulrich Klein博士的主要研究领域为益生菌、抗球虫及抗生素产品在经济动物中的使用，并发表了与这些领域相关的大量出版物和论文。

Ulrich Klein博士（图1）说，枝原净（Denagard）TM是治疗猪呼吸道和肠道疾病的全球首選品牌，也是中国市场知名度很高的品牌。他从七个方面展开了其报告：一是枝原净TM产品介绍;二是枝原净TM生产过程;三是80%包被的枝原净TM/45%水溶颗粒一一西方特征;四是枝原净TM药动学/对于胞内劳森氏菌的药动/药效学;五是对肠道疾病的疗效;六是对呼吸道感染的疗效;七是总结。

1 枝原净TM产品特性

Klein博士说，枝原净的活性成分是泰妙菌素一一一种半合成抑菌抗生素，提取于高等真菌担子菌侧耳属Pleurotusmutilus，发酵得到截短侧耳素后再经化学合成得到。泰妙菌素属于大环内酯类抗生素，也是动物（猪和家禽）专用的抗生素。Klein博士补充说，大环内酯类抗生素不用于人呼吸道及肠道疾病的治疗。

2 截断侧耳素生产流程

Klein博士说，礼来动保的泰妙菌素生产基地位于奥地利昆德尔（Kundl），通过大规模的发酵过程，生产顶级质量截短侧耳素类抗生素。发酵的关键是自始至终地保持发酵过程不被（内毒素及其他杂质）污染。该生产基地全年不间断地发酵，连续生产。生产出的枝原净TM产品符合欧洲药典的要求。

3 配方特点

Klein博士说，礼来动保有两种类型的产品，即80%包被的枝原净（制粒、储存）和45%枝原净水溶颗粒。80%包被枝原净的特点是颗粒均匀、大小适宜、稳定性高、在饲料中的流动性高、易于混合均匀;45%乳糖包被的颗粒具有颗粒均匀、大小适宜、溶解迅速、长时间放置不析出的特点。

4 80%包被枝原净饲料中稳定性、均匀度和分离度试验

为检测80%包被枝原净在饲料中的稳定性、均匀度和分离度，Klein博士设计了一项试验：枝原净按40 mg/kg和120 mg/kg以及250 mg/kg和500 mg/kg的浓度分别加入猪饲料和家禽饲料（粉料和颗粒料）中，随后利用西班牙的IRTA&LDG检测设备，检测颗粒稳定性、有效储藏时间（3个月25℃，60%相对湿度）、饲料中的均匀度和分离性（运输100 kg）。Klein博士补充说，枝原净预混剂颗粒是在85℃～90℃的制粒温度下、作用时间大于2 min并添加4%水蒸气的苛刻条件下完成制粒的。通过高效液相色谱法（High PerformanceLiquid Chromatography，HPLC）对3批饲料的平均剂量检测发现，猪饲料制粒后仅损失6%，而家禽饲料制粒后只损失3%。因此，Klein博士总结说，（1）在严格的制粒条件下，80%包被枝原净具有较高的稳定性;（2）储存稳定性高（3个月），加入商业饲料中浓度不会下降;（3） 800/包被枝原净加入饲料后有很高的混合均匀度（颗粒大小一致）;（4）在运输过程中不会与饲料发生分离（粉料）。

5 45%枝原净水溶颗粒的水溶性研究

Klein博士说，为验证45%枝原净水溶颗粒的水溶性，特设计了一项与4种45%仿制品对比的水溶性试验。比较的条件：（1）水温（4℃，20℃）;（2）水的pH;（3）水硬度（CIPAC A-低硬度、CIPAC D中硬度、CIPAC C高硬度）;（4）软水（加入维生素C）。观察持续时间5 min和24 h，确定产品沉淀量和水着色。Klein博士总结说，（1）45%枝原净水溶颗粒具有最好的溶解性，在试验所设计的条件下溶解速度最快;（2）溶解24 h后无析出。

●猪群口服泰妙菌素药动力学研究（图2）

泰妙菌素口服（通过拌料或饮水）后，检测在猪不同组织中的活性。

结果表明：（1）口服后吸收迅速，并且组织中浓度高（>90%）;（2）口服使用时血浆内浓度低;（3）饮水比饲料添加使用药物在肺部浓度高;（4）在相同使用剂量条件下，饲料添加比饮水使用能使结肠和回肠有更高的药物浓度;（5）泰妙菌素药在结肠和回肠中的浓度比约为3：1;（6）作为水溶性物质，泰妙菌素药可以穿过细胞膜在细胞（肠细胞）内和组织中聚集，尤其是肺部组织。

6 枝原净药效学（最小抑菌浓度）

Klein博士说，利用从巴西（2株）和泰国（3株）分离到的猪胞内劳森氏菌分离株进行抗生素的最小抑菌浓度试验（图3），测定的抗生素有金霉素、利高霉素（图4）、林可霉素、秦妙菌素（枝原净）、泰乐菌素、沃尼妙林、其他抗生素。试验采用组织培养系统（McCov细胞），检测细胞内和细胞外对胞内劳森氏菌最小抑菌浓度（模拟真实感染条件，在细菌进入前和后让细菌与抗生素接触）。

Klein博士根据上述研究结果总结说：（1）抗生素对全球胞内劳森氏菌分离株最小抑菌浓度上升;（2）与其他地区的分离株相比，泰国和巴西的胞内劳森氏菌分离株体外试验药物性是独一无二的;（3）胞内劳森氏菌在细胞内滴度较高，对泰妙菌素敏感，对林可霉素和四环素类抗生素敏感性不高;（4）通过饲料添加治疗剂量（150 mg/kg）饲喂泰妙菌素后，回肠内容物中浓度高于胞内劳森氏菌最小抑菌浓度。

7 口服枝原净（预混剂）治疗增生性肠炎

方法：用胞内劳森氏菌菌株LR 189/5/83攻毒，细胞内最小抑菌浓度0. 125 μg/mL;枝原净预混剂，每千克体重7.5 mg，感染后7d开始使用;每千克体重2.5 mg，感染前2d和感染后21 d使用到试验结束。

Klein博士说，增生性肠炎通过感染胞内劳森氏菌获得，通过对药动和药效学数据的分析，试验结果证实枝原净效果显著，以预防和治疗剂量使用枝原净时完全有效（在回肠及结肠中没有可见及微观病变）。

●枝原净对肺炎支原体感染猪群的治疗效果（人工感染胸膜肺炎放线杆菌和多杀性巴氏杆菌）

Klein博士说，试验在巴西南部的一个育肥舍中进行，设阳性对照一一未治疗组猪群、氟苯尼考组（纽氟罗，40 mg/kg）、泰妙菌素药（枝原净，100 mg/kg）+金霉素（400 mg/kg）联合使用组和替米考星（泰勇）组（200 mg/kg）四个组。肺炎支原体阳性猪群鼻内接种多杀性巴氏杆菌（第7天）和胸膜肺炎放线杆菌（第21天）。药物通过饲料添加，从第14天起到第28天使用14 d，观察临床症状（咳嗽指数，临床得分：第14天、第21天和第28天）和尸检（可见肺部病变）评估。

Klein博士小结说，枝原净和金霉素联合使用后：（1）对呼吸道感染和临床症状起效快;（2）从第24天到试验结束，咳嗽指数最低;（3）能够有效地防治肺部病变，肺部病变区域最小（3.85%）;（4）临床得分较低，大多数猪没有肺部病变。

8总结

Klein博士在报告的最后总结说：（1）枝原净复杂的合成工艺一一基于连续的生产和质量控制过程生产出高质量的产品;（2）80%枝原净预混剂：耐高温制粒（85℃～90℃）储藏稳定，在猪料和家禽饲料中混合均匀，在运输过程中不会出现分离;（3）80%枝原净与仿制品相比，溶解速度快（不同水温、pH、水硬度和是否加入维生素C）;（4）药动/药效学方面，相同剂量使用，泰妙菌素通过饲料添加使用比通过饮水使用在回肠和结肠中有更高的浓度;（5）泰妙菌素对泰国和巴西的胞内劳森氏菌分离株的最小抑菌浓度试验表明细胞内高度敏感;（6）通过饲料添加150 mg/kg泰妙菌素药，回肠内容物中的浓度高于胞内劳森氏菌的最小抑菌浓度;（7）回肠炎感染试验证实，基于药动和药效学数据，枝原净预混剂对回肠炎的治疗有明显的效果;（8）呼吸道混合感染（肺炎支原体、胸膜肺炎放线杆菌和多杀性巴氏杆菌）研究证实，与其他抗生素治疗方案相比，枝原净和金霉素联合使用治疗有卓越的临床效果。