贵州省猪繁殖与呼吸综合征血清学调查

李照伟 李涛 皮泉张霞 刘霞 （贵州省动物疫病预防控制中心 550008）

猪繁殖与呼吸综合征 （Porcine Reproductive and Respiration Syndrome，PRRS）又称为 “猪蓝耳病”，是由尼多病毒目，动脉炎病毒科，动脉炎病毒属的猪繁殖与呼吸综合征病毒 （Porcine Reproductive and Respiration Syndrome Virus，PRRSV）[1-2]引起的一种病毒性传染病，OIE将其列为法定报告的动物疫病，我国也将其列为二类动物疫病[3]。该病主要表现为母猪繁殖障碍，怀孕后期发生流产，产死胎和木乃伊胎；幼龄仔猪发生呼吸系统疾病，断奶前死亡率高[2-4]。现今集约化、规模化猪饲养程度日趋升高，该病对我国养猪业威胁较大，高致病性毒株感染、大量引种、猪只流通、与其他猪病毒病和细菌病混感等情况越来越频繁[5-6]，经济损失严重。本调查旨在对2013～2016年连续4年采集PRRS疫苗免疫后的猪血清样品进行PRRS免疫抗体检测，通过不同年份、不同养殖场点类型以及不同地区样品免疫抗体阳性率的统计和比较，分析评估贵州省近4年PRRS免疫预防的整体情况，以期对PRRS防控提供科学的理论依据。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 血清样品

2013～2016年于活疫苗免疫后随机采集猪血并及时分离血清，-20℃保存备用。采集场点覆盖全省9个市 （州），包括贵阳市、遵义市、安顺市、铜仁市、毕节市、六盘水市、黔南州、黔东南州和黔西南州。

1.1.2 检测试剂盒

猪繁殖与呼吸综合征病毒ELISA抗体检测试剂盒，购自武汉科前动物生物制品有限公司。

1.1.3 仪器设备

酶标仪、恒温培养箱、震荡器、微量移液器。

1.2 方法

1.2.1 血清样品检测方法：按照ELISA检测试剂盒说明书进行操作，于630nm处测定各孔的OD值。

1.2.2 结果判定

在酶标仪上测各孔OD630nm值。试验成立的条件是阳性对照孔OD630nm值均≥1.0，阴性对照孔OD630nm值均＜0.2，计算样品的KQ值，KQ值=样品OD630nm值/阳性对照OD630nm×100值平均值。样品KQ值≥20，判为阳性；样品KQ值＜20，判为阴性。

2 结果与分析

2.1 不同年份PRRSV抗体检测结果

2013～2016年于贵州省9个市 （州）随机采集了猪血清样品115445份进行PRRSV抗体检测，检出阳性95345份，抗体阳性率为82.59%。由表1、图1可看出，不同年份猪血清PRRSV抗体阳性率分别为84.55% （14856/17570）、82.47% （25002/30318）、 81.29% （27942/34372） 和 83.00%（27545/33185），其中不同年份PRRSV抗体阳性率由大到小依次为2013年>2016年>2014年>2015年，连续4年PRRSV抗体阳性率均达到农业部规定要求 （70%以上）。

2.2 不同养殖场点类型PRRSV抗体检测结果

由表2、图2可看出，不同养殖场点类型猪血清PRRSV抗体阳性率存在一定差异。从总体阳性率来看，PRRSV抗体阳性率由大到小依次为种猪场>商品代饲养场户>散养户>市场，种猪场、商品代饲养场户、散养户、其他养殖场点类型PRRSV抗体阳性率均达到农业部规定要求 （70%以上），但市场的PRRSV抗体阳性率未达到。从不同年份来看，各养殖场点类型PRRSV抗体阳性率高低又有不同，其中2014年PRRSV抗体阳性率由大到小依次为商品代饲养场户>散养户>种猪场>市场，2015年PRRSV抗体阳性率由大到小依次为种猪场>市场>商品代饲养场户>散养户，而2013年和2016年PRRSV抗体阳性率由大到小依次为种猪场>商品代饲养场户>散养户>市场。

图1 不同年份猪血清PRRAV抗体阳性率比较——农业部标准

2.3 不同地区PRRSV抗体检测结果

由表3、图3可看出，不同地区PRRSV抗体总阳性率及不同年份各地区PRRSV抗体阳性率均达到农业部规定要求（70%以上）。从总体阳性率来看，9个市 （州）PRRSV抗体阳性率由大到小依次为贵阳>铜仁>毕节>黔西南>黔南>安顺>六盘水>黔东南>遵义。其中，黔西南地区4年间PRRSV抗体阳性率逐年呈上升趋势，六盘水地区4年间PRRSV抗体阳性率逐年呈下降趋势，其余7个地区4年间PRRSV抗体阳性率呈上下浮动状态，与总体抗体阳性率均存在一定差异。

图2 不同养殖类型猪血清PRRAV抗体阳性率比较——农业部标准

图3 不同地区猪血清PRRAV抗体阳性率比较--农业部标准——农业部标准

3 结论与讨论

本次调查发现，2013～2016年于贵州省 9个市 （州）115445份猪血清样品中，共检出PRRS免疫抗体阳性血清95345份，抗体阳性率为82.59%(95345/115445)。不同年份样品的抗体阳性率分别为2013年84.55%、2014年82.47%、2015年81.29%和2016年83.00%，连续4年均达到农业部规定免疫抗体合格率70%以上要求，这表明贵州省对于PRRS的免疫预防有显著效果。

对于不同养殖场点类型样品的调查发现，PRRSV总体抗体阳性率依次为种猪场>商品代饲养场户>散养户>市场，其中种猪场、商品代饲养场户和散养户总体PRRSV抗体阳性率达到了80%以上，免疫效果理想。但市场PRRSV总体抗体阳性率为67.69%，低于规定要求，这可能与市场流动性强、猪只来往调运频繁、不同批次混合饲养、应激等因素有关，间接反映了市场环节PRRS的免疫防控相对比较薄弱。如果从不同年份比较各养殖场点类型PRRSV抗体阳性率情况，存在一定程度的差异，其中浮动较大的也是市场环节，进一步说明市场可能是PRRS免疫防控的一个关键点，应加强重视程度。

表2 不同养殖场点类型猪血清PRRSV抗体阳性率

表3 不同地区类型猪血清PRRSV抗体阳性率比较

对于不同地区样品的调查发现，PRRSV总体抗体阳性率均达到70%以上，其中8个市 （州）的抗体阳性率达到80%以上，且黔西南地区4年间PRRSV抗体阳性率逐年呈上升趋势，其余地区不同年份间PRRSV抗体阳性率虽有上下浮动，但总体上仍保持抗体高水平，这说明PRRS免疫防控成效在贵州省是较普遍的。

综上所述，初步表明贵州省近4年实施的PRRS免疫防控措施是积极有效的，PRRS抗体水平是反映猪群感染状态或免疫状态的重要指针[7]，为进一步稳定和提高PRRS免疫抗体水平，应更加规范免疫程序，优化免疫方法，加强免疫抗体的监测[8]，结合病原学监测，双重评价疫苗免疫效果。此外，还应加强PRRS的综合防控，建立科学合理的饲养环境，定期清洗消毒[9-10]，带毒猪只及时淘汰并无害化处理，防止混合感染和继发感染等[11-13]，尤其是对市场环节的防控力度应该加大，加强管理，降低流动过程中的各项风险因素。

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