白蔹生品及其炮炙品挥发性成分对比研究

周意，卢金清，孟佳敏，肖宇硕

(湖北中医药大学/湖北省药用植物研发中心，湖北 武汉 430065)

白蔹为葡萄科植物白蔹Ampelopsisjaponica(Thunb.)Makino的干燥块根，又名白根、山地瓜、野红薯、山葡萄秧、五爪藤等。白蔹入药历史悠久，始载于《神农本草经》，归为下品，具有清热解毒、消痈散结、敛疮生肌等功能；临床用于痈疽发背、疔疮、瘰疬、烧烫伤等[1]。在临床上白蔹多以生品入药，也有炒黄入药。临床经验表明[2-3]，白蔹经炒黄后用以治疗手足皲裂及疖肿，疗效较好，然而2015年版《中华人民共和国药典》并未收载其炒黄品，因此，对白蔹炮炙品的物质基础研究十分必要。迄今为止，国内外文献中并无有关运用顶空固相微萃取法结合气质联用技术对白蔹挥发性成分进行分析的研究报道，也无对白蔹生品及其炮炙品进行对比分析的研究报道。故本研究首次采用顶空固相微萃取法结合气质联用技术对白蔹生品及其炮炙品中的挥发性成分进行分析和比较，探讨白蔹在炮炙前后挥发性成分的变化，旨在从挥发性成分的角度为临床合理应用白蔹提供参考。

1 仪器和药材

1.1 仪器

手动固相微萃取进样装置(德国 IKA公司)；Agilent6890/5973型气相-质谱-计算机联用仪(美国Hewlett-Packard公司)；顶空瓶(15 mL)；65 μm 聚二甲基硅氧烷-二乙烯基苯(PDMS/DVB)；萃取纤维头(美国 Supelco 公司)；ALC-210.2 型电子天平(北京赛多利斯天平有限公司，d=0.01 g)。

1.2 药材

白蔹药材购于保定市保康大药店，经湖北中医药大学鉴定教研室鉴定为葡萄科植物白蔹Ampelopsisjaponica(Thunb.)Makino的干燥块根。

2 方法

2.1 炒黄品的制备

参照2015版《中华人民共和国药典》四部0213炮制通则中的炮制方法：取100 g白蔹生品，置炒制容器内，用文火加热，并不断翻动，使药物表面呈黄色或颜色加深，取出，放凉。

2.2 GC-MS色谱与质谱条件

2.2.1 GC条件 色谱柱：HP-5MS石英毛细管柱(30 m×0.25 mm，0.25 μm)；升温程序：从50 ℃开始，以8 ℃·min-1升温至90 ℃，再以1 ℃·min-1升温至100 ℃，然后以15 ℃·min-1升温至190 ℃，最后以10 ℃·min-1升温至230 ℃，保留3 min；载气：高纯度He(99.999%)；柱流速：0.8 mL·min-1；进样口温度：230 ℃；

2.2.2 MS条件 EI 源；离子源温度230 ℃，电离电压70 eV；四级杆温度150 ℃；扫描质量范围35～550 m/z。

2.3 顶空固相微萃取条件

综合考察确定顶空固相微萃取的最佳条件：白蔹样品1.5 g，置于15 mL顶空瓶中，插入装有65 μm PDMS/DVB萃取纤维头的手动进样器，在120 ℃下平衡15 min后，再压缩手柄伸出萃取头萃取20 min，取出，立即插入气相色谱仪进样口(温度230 ℃)解析3 min，不分流进样。炒黄品实验条件同上。

3 结果

经化学工作站数据处理及用面积归一化法从各总离子流图中计算各组分相对百分含量，按各峰的质谱图经NIST质谱数据库检索，并结合相对保留时间，确定各个组分。从生品中分离出41种成分，并鉴定出26种成分，占挥发性成分总量的60.81%。从炒黄品中分离出24种成分，并鉴定出20种成分，占挥发性成分总量的89.69%。具体结果见图1～2及表1。

图1 HS-SPME-GC-MS联用分析白蔹生品挥发性成分总离子流图

图2 HS-SPME-GC-MS联用分析白蔹炒黄品挥发性成分总离子流图

峰号保留时间/min化合物名称分子式质量分数(%)生品炒黄品12 98己醛HexanalC6H12O0 95—23 44糠醛FurfuralC5H4O2—4 9334 34庚醛HeptanalC7H14O1 28—44 712，3⁃二甲基⁃环己⁃1，3⁃二烯2，3⁃Dimethyl⁃cyclohexa⁃1，3⁃dieneC8H12—0 854 84左旋⁃α⁃蒎烯1S⁃ alpha ⁃PineneC10H16—1 6464 89α⁃蒎烯 alpha ⁃PineneC10H162 61—

表1(续)

注：“—”表示成分不存在。

4 讨论

本研究结果表明，白蔹生品经炮炙后其挥发性成分组成和含量均发生了一定程度的变化。白蔹生品中鉴定出26种成分，占挥发性成分总量的60.81%；炒黄品中鉴定出20种成分，占挥发性成分总量的89.69%。生品中挥发性成分含量最高的为壬醛，占挥发性成分的7.75%，其次主要为1-石竹烯(5.94%)、1-(5-三氟甲基-2-吡啶基)-4-(1H-吡咯-1-基)-哌啶(4.12%)、癸醛(3.56%)、3-甲基-十四烷(3.41%)、2，6-二甲基-7-辛烯-2-醇(3.02%)、α-蒎烯(2.61%)、樟脑(2.53%)、薄荷醇(2.48%)、茴香脑(2.48%)。炒黄品中挥发性成分含量最高的为伪柠檬烯，占挥发性成分的19.36%，其次主要为邻苯二甲酸单(2-乙基己基)酯(7.8%)、3-蒈烯(7.63%)、莰烯(6.7%)、β-蒎烯(6.08%)、α-水芹烯(5.34%)、糠醛(4.93%)、3-乙基-2，5-二甲基-吡嗪(4.42%)、乙酸-1，7，7-三甲基-双环[2.2.1]庚-2-基酯(4.38%)、罗勒烯(4.12%)。白蔹炮炙前后的共有挥发性成分有4种，分别为壬醛、正十三烷、ALPHA-蒎烯、1-石竹烯，其中，白蔹经炒黄后壬醛和1-石竹烯的含量明显减少，正十三烷的含量明显增多，而ALPHA-蒎烯的含量基本不变。与白蔹生品相比，炒黄品中新增了16种成分，减少了23种成分，在炒黄品中未检测到醇类成分，且醛类成分的含量也相对减少，而烯类成分的含量明显增多，这可能是由于醛醇类成分加热分解转变成烯类成分。

白蔹生品中的特有成分薄荷醇、樟脑、茴香脑、丁香酚、松油醇和草蒿脑是中草药植物中的重要活性物质。薄荷醇是一种饱和环萜醇。研究表明，薄荷醇具有广泛的药理活性，如抗炎止痛、清凉止痒、抗真菌、胃肠道保护、抗肿瘤等[4]；樟脑具有兴奋、强心、消炎、镇痛、抗炎、止咳、促渗等药理作用[5]；茴香脑(Anethole，简称AN)又名茴香醚，在肿瘤、皮肤损伤、肝损伤等方面均有抗炎作用，对缺血性脑卒中具有神经保护和血脑屏障保护作用[6]；丁香酚为一种有机酚，主要存在于丁香油、樟脑油、肉桂叶油、肉豆蔻油中，研究表明，丁香酚具有镇痛、麻醉、抗氧化、抗菌、抗癌、抗虫活性[7]；松油醇又名梧桐油、松节油萜醇，天然存在于松树油、杂熏衣草油、伽罗木油、橙叶油、橙花油等精油中，研究表明，松油醇对大肠杆菌有明显的抑制作用[8]；草蒿脑是一种重要的香料，研究表明，草蒿脑具有较强的抗抑郁、杀菌、退热等多种药理活性[9]。然而，炒黄品中并未检测到这些活性成分，故从挥发性成分的角度考虑，白蔹生品“清热解毒”作用优于其炒黄品，故临床上多以生品入药，炒白蔹降低药性，药效缓和。通过对白蔹生品及其炮炙品中的挥发性成分进行对比分析，可为临床合理应用白蔹提供参考。

[1] 国家药典委员会.中华人民共和国药典：一部[S].北京：中国医药科技出版社，2010

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