对头孢唑啉敏感及耐药菌的K-B法验证结果分析

刘 霞，邹自英，刘 媛

肺炎克雷伯菌、大肠埃希菌、奇异变形杆菌都属于肠杆菌科细菌。根据2017 CLSI标准规定[1]，头孢唑啉是肠杆菌科细菌选药A组常规报告、首选试验的抗菌药物，主要用于由敏感的大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌和奇异变形杆菌等肠杆菌科细菌引起的非复杂性尿路感染的治疗[2]，判读标准是基于每8 h 2 g的治疗方案，试验结果还被用于预测口服头孢菌素类包括头孢克洛、头孢地尼、头孢泊肟、头孢丙烯、头孢呋辛、头孢氨苄和氯碳头孢的敏感性。但当头孢唑啉耐药时，头孢地尼、头孢泊肟和头孢呋辛需要单独试验，因为有的菌株可能头孢唑啉耐药而对这些药物敏感[3]。

由于梅里埃VITEK2 compact全自动微生物分析仪检测的头孢唑啉敏感性结果没有把敏感、中介和耐药区分开，为了准确报告头孢唑啉结果，笔者采用体外K-B法对其结果进行验证，以期为临床准确用药提供依据。

1 资料与方法

1.1 标本来源 收集2016年1月～2017年9月本实验室采用法国梅梅里埃VITEK2 compact全自动微生物分析仪检测的320株非尿液标本中头孢唑啉药敏结果为敏感以及164株尿液标本中头孢唑啉药敏结果为耐药的菌株。

1.2 K-B法药敏实验 使用K-B法对细菌的抑菌圈进行测定。选取320株非尿液标本中头孢唑啉药敏结果为敏感以及164株尿液标本中头孢唑啉药敏结果为耐药的菌株，用比浊仪将菌液调到0.5个麦氏点，并涂布于普通MH平板上，贴头孢唑啉药片（北京天坛药物生物技术公司），放置于37℃孵箱中18 h后取出，用游标卡尺测定抑菌圈直径。测量结果依据2017年美国国家实验室标准化协会（CLSI）制定的标准，判定药敏结果为敏感、中介、耐药。K-B法每张纸片中心的间距≥24mm。

1.3 统计学方法 采用描述性统计学分析方法。

2 结果

2.1 非尿液标本头孢唑啉药敏菌株来源分布320株非尿液标本中头孢唑啉药敏结果为敏感菌株主要分离自呼吸道、全血和脓液等标本（表1）。

表1 头孢唑啉药敏结果为敏感菌株来源分布

2.2 头孢唑啉药敏菌株K-B法验证结果 在仪器检测头孢唑啉敏感的320株菌株中，K-B法测细菌抑菌圈直径，92.50%为敏感，7.50%为中介，无耐药菌株。见表2。

表2 头孢唑啉药敏菌株K-B法验证结果[株（%）]

2.3 尿标本中头孢唑啉耐药菌株平板扩散法验证结果 梅里埃VITEK2 compact全自动微生物分析仪鉴定的164株尿液标本，用K-B法检测抑菌圈直径全部≤14mm，结果均为耐药,与仪器结果一致.

3 讨论

头孢唑啉在临床上主要用于敏感菌所致的呼吸道、泌尿生殖系、皮肤组织、骨和骨关节、胆道等感染，也可用于心内膜炎、败血症、咽和耳部的感染[4]，属于一代头孢，具有血药浓度较高及蛋白结合率高的特点[5]，国家卫生和计划生育委员会推荐头孢唑啉作为Ⅰ类切口手术常用预防抗菌药物[6]，目前在临床得到了广泛的应用。

按照临床用药规则，头孢唑啉属于肠杆菌科所致感染A组首选抗菌药物，准确报告其抗菌药物敏感性结果，对于临床是否可以选用及如何选用具有重要的指导作用[7-8]。目前微生物实验室广泛采用的梅里埃系列全自动微生物分析系统，对头孢唑啉最小抑菌浓度（MIC）检测的下限值是4μg/ml。按照2017 CLSI-M 100文件的规定，当头孢唑啉使用2 g/8 h的用药方案，治疗由大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌和奇异变形杆菌所致的除外非复杂性尿路感染时，最小抑菌浓度（MIC）≤2 μg/ml判断为敏感，MIC=4 μg/ml判断为中介，MIC≥8 μg/m l判断为耐药[1]。MIC≤4 μg/ml仪器判读为敏感的菌株中，包含敏感菌株和中介菌株，而中介菌株可能需要加大用药剂量或增加用药频次才能达到治疗效果。如果均按敏感报告结果，患者可能达不到预期的疗效，甚至可能使得治疗失败。当头孢唑啉采用1 g/12 h的用药方案，治疗由大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌和奇异变形杆菌所致的非复杂性尿路感染时，判断标准是：MIC≤16μg/ml为敏感，MIC≥32μg/ml为耐药。按照此判断标准，MIC≤4μg/ml仪器判断为敏感的菌株可全部报告敏感，MIC≥8μg/ml仪器判读为耐药的菌株可能有少部分为敏感菌株，结果报告可能限制了头孢唑啉的使用范围，但不会造成治疗剂量不当的后果。

目前各医院针对头孢唑啉的药敏检验报告仅有以下两种现状。一是将头孢唑啉浓度MIC≤4μg/ml的药敏结果屏蔽后不报，因此，致使临床医生在选用抗生素类型时，很少选用头孢唑啉。二是将所有头孢唑啉浓度≤4μg/ml的药敏结果判定为敏感，致使部分病例治疗效果达不到预期。

头孢唑啉作为一代头孢类药物在临床应用广泛，为更加准确地指导临床医生对头孢唑啉使用，需要在使用梅里埃VITEK2 compact全自动微生物分析仪进行肠杆菌科药敏试验时，同时进行头孢唑啉K-B法检测，仪器和手工两种检验方法相互补充后，方可出具头孢唑啉的药敏检验结果，为临床用药提供准确依据。

【参考文献】

[1]Performance standards for antimicrobial susceptibility testing;Twenty-seventh informational supplement[S].CLSI documents,M100-S27.CLSI,2017.

[2]崔社玲.合理应用头孢类抗生素[J].现代医药卫生,2000,10（5）:489-491.

[3]陈坚,黄堃.2011～2013年上海119家医院头孢唑林应用分析[J].中国医院用药评价与分析,2015,10（15）:1328-1330.

[4]石琳,李丽,贾晶星,等.头孢唑林治疗产妇产褥期感染的临床疗效分析[J].中华医院感染学杂志,2016,7（26）:1619-1621.

[5]汤颖,钟一红,丁小强,等.头孢唑林封管预防血液透析患者中心静脉导管相关感染的前瞻性研究[J].复旦学报（医学版）,2009,36（5）:523-527.

[6]王颖.头孢唑林与万古霉素治疗非甲氧西林耐药性金黄色葡萄球菌的疗效比较[J].中国医院药学杂志,2013,33（14）:1167-1171.

[7]叶华英.头孢唑啉钠在剖宫产围术期中的预防效果探讨[J].海峡医学,2016,12（28）:209-210.

[8]石海梅.头孢唑啉钠在剖宫产围术期预防应用分析[J].中国医药指南,2015,11（14）:1672-1673.