热应激条件下添加中草药渣对獭兔生产性能、血液生化及免疫功能的影响

李艳军， 温旭杰，2， 代发文*， 高 来， 叶应建， 霍小东*

（1.北京大伟嘉生物技术股份有限公司，北京通州 101105；2.山西农业大学动物科技学院，山西太谷 030801）

近年来，大量研究表明，中草药渣作为畜禽饲料原料，在畜禽日粮中应用获得较好的饲喂效果,一方面可作为非常规饲料源，降低饲养成本，另一方面药渣中存留一定活性物质，具有促生长、保健和抗应激作用（王向民，2008；耿春银，2007）。 但中草药渣在獭兔方面的研究报道较少。因此，本试验在饲料中添加清瘟败毒中草药渣，研究其对热应激条件下生长獭兔生产性能、血液生化指标和免疫力的影响,为进一步开发中草药渣饲料资源提供理论依据。

1 材料与方法

1.1 试验材料 淸瘟败毒中草药渣是制备清瘟败毒口服液（由栀子 、黄连、牡丹皮、黄芩、赤芍、玄参、知母、连翘、桔梗、甘草、淡竹叶等组成）后的残渣。经测定，药渣中含粗蛋白质14.1%、粗脂肪1.7%、粗纤维15.8%、酸性洗涤纤维31.0%、中性洗涤纤维67.7%、钙1.7%、磷0.3%。

1.2 试验日粮 试验日粮参照美国（NRC，1977）和獭兔营养标准（谷子林，2002），利用当地主要饲料原料设计饲料配方并压制成Φ4.5×2.5 mm的颗粒。基础日粮配方及营养水平见表1。

1.3 试验动物及设计 试验采用单因子试验设计，选用 42 日龄体重相近[平均体重（650±50）g]、健康无病的生长兔80只,随机分成4组（即：Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ四组），每组5个重复,每个重复4只。Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组为试验组，分别用1%、2%、3% 的清瘟败毒中草药渣等量替代基础日粮中的麸皮。Ⅳ组为对照组，饲喂基础日粮；预试期7 d，预试期结束后进行空腹称重，经统计分析，差异不显著 （P＞0.05），正式期为42 d，自由饮水和采食。试验结束前3 d天采集各组料样，将每个重复3 d收集的粪便烘干混匀，粉碎，过40目筛备用。于试验结束次日早晨空腹采血，每组随机抽取3只，每只采血5 mL，3000 r/min离心10 min得血清，分装到小离心管中，-20℃保存，待测。

表1 基础日粮组成及营养水平(风干基础)

1.4 试验时间和地点 试验于夏季高温季节（2017年7月15日～9月3日）在河北保定俊英兔场进行，每天分别于 6∶00、14∶00 和 22∶00 测定兔舍环境温度，其平均值为当日兔舍温度。

1.5 指标测定 粗蛋白质(CP)采用凯氏定氮法；粗脂肪(EE)采用醚浸提法；酸性洗涤纤维（ADF）和中性洗涤纤维（NDF）采用 Van Soest（1963）方法；钙（Ca）采用高锰酸钾滴定法；磷（P）采用钼黄比色法；尿素氮（BUN）、胆固醇（CHO）采用酶法；乳酸脱氢酶（LDH）、天门冬氨酸氨基转移酶（AST）、丙氨酸氨基转移酶（ALT）、肌酸激酶（CK）、碱性磷酸酶（ALP）采用酶动力学速率法；总蛋白（TP）采用双缩脲法;白蛋白（ALB）采用溴甲酚绿法；三碘甲腺原氨酸（T3）、四碘甲腺原氨酸（T4）和皮质醇（Cortisol）采用放射免疫分析方法测定。

1.6 统计分析 采用SPSS(13.0)软件进行ONEWAY ANOVA方差分析,用Duncan氏检验进行数据的多重比较。

2 结果

2.1 添加清瘟败毒中草药渣对生长兔生产性能的影响 由表2可知，1～2周,采食量方面，Ⅰ、Ⅱ组和Ⅲ组的分别高于Ⅳ组0.03%、0.01%、0.04%，差异均不显著（P＞0.05）；在日增重方面，Ⅰ、Ⅱ组和Ⅲ组的分别高于Ⅳ组0.10%、0.09%、0.02%，差异均不显著（P＞0.05）；在料重比方面，Ⅰ组和Ⅱ组低于Ⅳ组0.07%、0.08% ，Ⅲ组高于Ⅳ组0.02%，差异均不显著（P ＞ 0.05）。

3～4周,采食量方面，Ⅰ组和Ⅱ组分别高于Ⅳ组 0.01%、0.02% ，差异均不显著（P＞0.05）；在日增重方面，Ⅱ组高于Ⅳ组0.03%，差异不显著（P＞0.05）；在料重比方面，Ⅰ组高于Ⅳ组0.01%，差异不显著（P＞0.05）。

5～6周，采食量方面，Ⅱ组高于Ⅳ组0.02%，差异不显著（P＞0.05）；在日增重方面，Ⅰ、Ⅱ组和Ⅲ组的分别高于Ⅳ组0.02%、0.09%、0.05%，差异均不显著（P＞0.05）；在料重比方面，Ⅰ组、Ⅱ组和Ⅲ组分别低于Ⅳ组0.01%、0.06%、0.05%，差异均不显著（P ＞ 0.05）。

全期，采食量方面，Ⅰ、Ⅱ组和Ⅲ组分别高于Ⅳ组0.01%、0.02%、0.01%，差异均不显著 （P＞0.05）；在日增重方面，Ⅰ、Ⅱ组和Ⅲ组的分别高于Ⅳ组 0.04%（P ＞ 0.05）、0.07%（P ＜ 0.05）、0.02%（P＞0.05）；在料重比方面，Ⅰ、Ⅱ组和Ⅲ组低于Ⅳ组0.03%、0.05%、0.02% ，差异均不显著（P ＞ 0.05）。

2.2 添加清瘟败毒中草药渣对生长兔血液生化指标的影响 由表3可见，Ⅰ、Ⅱ组和Ⅲ组与Ⅳ组相比，CHO 分别降低了 19.62%、22.43%、33.64%,各组间差异不显著 （P＞0.05）；BUN分别降低了9.82%、10.50%16.37%,各组间差异不显著 （P＞0.05）；CK 分别降低了 11.66%、11.64%、12.00%，Ⅰ、Ⅱ组和Ⅲ组与Ⅳ组相比差异显著（P＜0.05）；随着清瘟败毒中草药渣量的增加，血清中LDH、ALP、AST和ALT分别呈现降低趋势。LDP分别降低了 7.05%、1.39%、20.86%；ALP分别降低了2.48%、5.58%、24.28%；AST分别降低了 3.23%、5.38%、13.50%；ALT分别降低了 17.87% 、20.60%、33.80%，各组间差异均不显著（P ＞ 0.05）。与Ⅳ相比,TP分别提高了0.32%、0.76%、5.58%，ALB趋于稳定，球蛋白的含量表现为先降低后增高的趋势，Ⅰ组降低了2.63%，Ⅱ组、Ⅲ组分别增高了 0.57%、10.80%，差异均不显著（P ＞ 0.05），白球比例表现为先增高后降低趋势，Ⅰ组、Ⅱ组分别增高了5.88%、3.14%，Ⅲ组降低了8.24%，各组间差异不显著（P ＞ 0.05）。

表2 添加清瘟败毒中草药渣对生长兔生产性能的影响

表3 添加清瘟败毒中草药渣对生长兔血液生化指标的影响

2.3 添加清瘟败毒中草药渣对生长兔免疫指标的影响 表4显示，Ⅱ、Ⅲ组lgA含量比Ⅳ组提高了9.00%、18.01%，各组间差异均不显著（P＞0.05）；lgM含量分别比对照组提高了1.47%、2.35%、5.28%，各组间差异不显著（P＞0.05）；lgG含量分别提高了12.11%、13.15%、14.53%。差异均显著（P＜0.05）。添加清瘟败毒中草药渣，提高了血液中lgG含量，表明添加清瘟败毒中草药渣有增强机体免疫力的作用。

表4 添加清瘟败毒中草药渣对生长兔免疫指标的影响g/L

2.4 添加清瘟败毒中草药渣对生长兔T3、T4、皮质醇的影响 表5显示，Ⅰ、Ⅱ组和Ⅲ组与Ⅳ组相比，T3含量分别提高了 28.13%（P ＞ 0.05）、30.47%（P ＞0.05）、48.44%（P ＜ 0.05）；T4含量分别提高了5.96%、7.24%、13.53%，各组间差异不显著 （P＞0.05）。Ⅰ、Ⅱ组和Ⅲ组与Ⅳ组相比皮质醇含量分别降低了 13.37%（P ＞ 0.05）、44.01%（P ＜ 0.05）、50.77%（P＜0.05）。表明添加清瘟败毒中草药渣，有提高血清中T3、T4组的趋势，其中Ⅲ组差异达到显著水平（P＜0.05）；而皮质醇含量有明显的降低趋势，其中Ⅱ组和Ⅲ组达到差异显著水平（P＜0.05），表明添加清瘟败毒中草药渣对生长兔有抗热应激作用。

表5 添加清瘟败毒中草药渣对生长兔 T3、T4、皮质醇的影响ng/mL

3 讨论

3.1 添加清瘟败毒中草药渣对生长兔生产性能的影响 试验期间，兔舍最高平均温度为32℃，最低平均温度为28℃，平均温度为30℃。热应激时兔采食中枢的兴奋受到抑制，维持需要的能量降低，采食量下降（宋智娟，2006），导致兔的生产性能降低。药渣含有的活性成分具有解肌清热、凉血止血、生津解毒、清热泻火等作用。全期，Ⅱ组日增重达到了差异显著水平（P＜0.05）。表明添加清瘟败毒中草药渣能有效地缓解生长兔热应激，提高生长兔生产性能的作用。

3.2 添加清瘟败毒中草药渣对生长兔血液生化指标的影响 血液生化指标是衡量兔生理健康状况的重要指标之一，对于科学研究有重要的意义。本试验獭兔血清中CHO有一定程度的降低，表明药渣具有降低CHO的作用。BUN是衡量肾功能主要指标，也是衡量动物对蛋白质利用效率的指标。当肾功能损害时，BUN的浓度升高。本试验中血清中BUN的浓度均有不同程度的下降，表明清瘟败毒中草药渣不会造成肾损害，同时对于提高蛋白质的利用率有一定作用。CK是热应激的重要指标，试验组血清中CK有明显的下降趋势 （P＜0.05），表明添加清瘟败毒中草药渣能有效的缓解生长兔的热应激作用。各试验组中ALP（P＞0.05）、LDH（P ＞ 0.05）、AST（P ＞ 0.05）、ALT（P ＞ 0.05）含量均有不同程度的降低，表明清瘟败毒中草药渣能有效的改善獭兔的心脏、肝脏、肾脏系统。TP、球蛋白、ALB的含量与机体蛋白质的吸收和代谢状况有关,同时也可反映机体的免疫水平。ALB具有参与物质转运、维持血浆渗透压、合成组织蛋白的作用。血清球蛋白是抗体蛋白，可参与机体的免疫。本试验中獭兔血清中TP、ALB、球蛋白含量虽差异不显著（P＞0.05），但有一定程度的提高，表明清瘟败毒中草药渣对生长兔有效利用体内蛋白质,加强蛋白质的沉积，维持机体免疫机能有一定的作用。

3.3 添加清瘟败毒中草药渣对生长兔免疫指标的影响 血清中的IgA、IgM和IgG是机体主要免疫球蛋白,具有抗菌、抗病毒、抗毒素作用（吴德峰，2006），热应激时,机体免疫抑制与抗体水平下降（Franci，1996）。 试验组 IgA、IgM 和 IgG 均有不同程度的提高，其中IgG含量达到差异显著水平（P＜0.05）。清瘟败毒中草药渣含有生物碱、多糖、鞣质、甙类等生物活性物质,能够加速生长兔新陈代谢、刺激造血机能、促进红细胞再生，从而对机体的免疫器官和免疫细胞进行调节,提高机体的免疫力。

3.4 添加清瘟败毒中草药渣对生长兔T3、T4、皮质醇的影响 生长兔热应激时，可促进皮质醇的分泌,抑制甲状腺素分泌。由于皮质醇能加速机体分解反应,抑制蛋白质合成，导致生产性能降低。试验组中T3含量有明显的提高，其中Ⅲ组中T3含量达到差异显著水平（P＜0.05）；试验组中皮质醇含量有明显的降低，其中Ⅱ组和Ⅲ组中皮质醇含量达到差异显著水平（P＜0.05）。表明添加清瘟败毒中草药渣，能降低血清中皮质醇含量，提高血清中T3、T4含量，有效地缓解生长兔热应激。

4 结论

本试验结果表明，日粮中添加清瘟败毒中草药渣，能提高热应激条件下生长兔的生产性能和机体免疫力，并建议最适添加量为2%～3%。

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