HPLC在药物检测中的应用价值研究

杨斌 汤春燕 殷春锦 李丽丽

摘 要： HPLC在药物检测中的应用，可以满足药物组分鉴别、药物组分分析以及药物组分含量测定等要求，并且因为自身具有的强分离性、高效性等特点，已经得到了广泛的应用。为保证药物检测结果的可靠性与准确性，需要基于技术特点，确定应用管理要点，采取有效措施对整个检测过程进行控制，避免各项因素对结果产生的不良影响。

关键词： HPLC；药物检测；应用技术

HPLC即高效液相色谱法，与其他色谱法相比，将其应用到药物检测中可以取得可靠性更高的效果。为充分发挥HPLC在药物检测中应用具有的优势，需要对其检测原理以及应用要点进行分析，然后基于实际需求，来完成各项检测工作，确保检测结果的准确性。

一、HPLC药物检测应用方向

1.中药检测

应用HPLC来进行中药有效组分分析，能够准确确定中药饮品以及制剂质量和疗效是否达到相关标准。例如对干姜有效组分进行含量测定，经过对各有效组分的超临界CO2萃取处理，得到干姜油，整个测量过程更为简单和灵敏，并且具有良好的重现性，能够将测定结果作为干姜与制剂质量控制的依据。就HPLC实际应用效果来看，还可以测定分析中药内所含有效成分，经过对中药制剂的对比检测，可确定有效组分含量，具有很强的灵敏性，对控制重要制剂质量有着重要指导作用[1]。

2.化学药物

以化学药物作为对象，应用HPLC来对其进行检测，主要是针对杂质检测，对药物合成过程中产生的副产物进行测定，避免药物内含有有毒有害产物，经过测定后确认杂质含量是否在规定标准内。同时，也可以利用HPLC来对化学药物的主要成分含量进行测定，例如对烧烫灵软膏内的磺胺醋酰钠以及磺胺含量进行测定时，可以在3min内得到结果，不仅快速简便，并且可以保证结果的可靠性[2]。

二、HPLC药物检测应用要求

1.HPLC条件选择

HPLC近年来已经被广泛的应用到药物检测领域中，对提高药物质量控制效率具有重要意义，其中涉及到的内容包括组分分析、组分鉴别、含量测定以及相关物质测定等。为提高HPLC药物检测应用效果，必须要做好条件选择控制，提高分析结果的准确性与可靠性，可以作为药物质量控制的依据。基于HPLC分析方法特点与要求，提高对整个应用过程的重视，总结以往经验来对测定分析过程进行控制，保证对各细节的高效控制，提高实际应用效率。

2.有效性评价

HPLC作为一种定性、定量分析方法，被有效应用到药物分析中，务必保证测量结果的可靠性、准确性，可以对药物样品信息进行有效说明，为药物质量控制提供依据。这样就需要确定有效性评价体系，通过有效性评价参数、专属性手段措施以及有效性评价参数接受标准等控制，基于测定结果来对药物进行有效评价。其中，有效性评价参数的选择灵活性很高，且能够根据实际需求来确定接受标准。有效性评价过程即在特定条件下，对分析效果过程进行观察，根据观察所确定的分析效果是否符合期望值，来确定此评价方法是否有效。

三、HPLC药物检测应用分析

1.药物与仪器

1.1降压药对照品

氢氯噻嗪片、酒石酸美托洛尔片、曲克芦丁片、盐酸特拉唑嗪片、富马酸比索洛尔片、盐酸普萘洛尔片、吲达帕胺片、氯沙坦钾片、硝苯地平片、替米沙坦片、盐酸地尔硫片、尼莫地平片、非洛地平缓释片等共15种对照药品，且全部由市场购买所得，按照含量标示经过100%折算后使用[3]。

1.2检测仪器

选择应用Agilent 1200高效液相色谱仪，并且配套有自动控温自动进样器、液相四元泵和紫外可调波长监测器；台式高速离心机、电子天平以及超声波发生器等。

1.3检测试剂

检测试验选择醋酸铵作为分析纯试剂，甲醇与乙腈为色谱纯，全部用水为纯化水。

1.4药物样品

检测分析所用样品药物为珍菊降压片，其规格为每片重0.25g，含有0.03mg盐酸可乐定、5mg氢氯噻嗪以及20mg的芦丁，且试验样品由市场直接购买。

2.检测过程

2.1色谱条件

检测应用4.6mm×250mm，5μmAgilent Extend-C18色谱柱，流动相为0.02mol·L-1醋酸铵溶液，流动相B为2：1的甲醇-乙腈。采用梯度洗脱，检测波长为230nm，控制流速1.0ml·min-1，柱温为30℃，进样量为2μL。

2.2制备样品与对照溶液

（1）样品溶液

选择一片珍菊降叶片将其研磨成分，进行精密称量后放入到锥形瓶内，向其中添加20mL甲醇，超声处理15min，然后取出静置一段时间后继续高速离心处理，待离心结束后选取上清液进行测定。

（2）对照溶液

将对照样品研磨成分，经过精密称量后选择对照化合物10mg放入到锥形瓶内，向其中精密加入20mL甲醇，超声处理10min，结束后静置一段时间，然后对溶液进行高速离心处理后选择上清液，作为药品测定试验对照液备用。

2.3分析确定线性关系

选择适量制备好的对照液稀释10倍，以设定好的色谱条件分别进样2μL、4μL、6μL、8μL、10μL分析，然后对选择的15种降压药进样量对峰面积进行线性回归，确定其线性良好。

2.4色谱峰保留时间

在本实验确定的色谱条件下，对稀释后的对照液进行重复进样，各色谱峰保留时间基本上均在0.01%～0.1%范围内，证明该流动相系统稳定性高。设定曲克芦丁保留时间为1，对其他各峰相对保留时间进行计算，降低测定难度。

2.5样品药物检查

选择提前制备好的待测药品珍菊降压片的样品溶液，按照设定的色譜条件进行测定，得到色谱图。对色谱图进行分析，确定其中出现与氢氯噻嗪对照样品色谱峰保留时间一致的色谱峰，证明可检出样品内含有的氢氯噻嗪。

3.结果分析

为提高样品药物有效组分测定结果可靠性，需要科学选择分离条件，即流动相与色谱柱的选择，保证测定过程的灵敏性和稳定性，降低各项因素对测定结果带来的影响。并且在制备样品与对照溶液时，需要尽量在避光条件下，尽量缩短操作时间。

结束语：

应用HPLC对药物进行检测，能够得到可靠的有效组分以及杂质含量的准确数值，对提高药物质量控制效率具有重要意义。■

参考文献

[1] 王丽娟，张骊，叶玫，吴成业.采用HPLC法和HPLC-MS/MS法检测水产品中喹诺酮类药物方法比较[J].福建水产，2015，37（05）：378-385.

[2] 刘倩.HPLC在药物检测中的应用价值分析[J].当代医药论丛，2014，12（04）：252-253.

[3] 陈惠玲，封令霞.HPLC检测中药中非法添加化学降压药物[J].中国现代应用药学，2011，28（S1）：1346-1348.