松杉灵芝液体发酵培养营养条件优化探讨

陈绍威

摘 要：松杉灵芝数子菌纲多孔菌科目中的内容，又被称为木灵芝，多产于黑龙江区域、吉林区域与甘肃区域，具备较高的营养价值与保健价值，对人体有着润肺平喘、抑制血脂与提升免疫力的作用，在抗肿瘤方面的应用较为广泛。因此，为了满足人们的健康需求，应针对松杉灵芝液体发酵培养进行分析，针对营养条件进行优化，生产质量较高的营养保健产品。

关键词：松杉灵芝；液体发酵培养；营养条件优化

在松杉灵芝液体发酵培养的过程中，需根据具体内容进行处理，掌控相关作用，并利用合理方式分析问题与解决问题，建立多元化与现代化的管理机制，保证在实际处理的过程中，针对营养条件进行合理优化，满足当前的发展需求。

1 分析材料与方式

对于松杉灵芝而言，其生长周期较长，且生长的效率很低，在产品制作的过程中，质量呈现不稳定的特征，会导致研究效果受到影响。因此，需做好试验工作，利用合理的方式对其处理。

1.1 试验材料分析

本次试验主要采用的为松杉灵芝1号菌株，由某生物实验室对其进行保存与处理。所选择的试剂为葡萄糖试剂、乙醇试剂、蛋白胨试剂、菌母浸膏试剂、蔗糖试剂、琼脂试剂、磷酸二氢钾试剂、硫酸镁试剂、维生素B1。联合玉米粉产品、麦麸产品、豆饼粉产品对其处理，并选择丙酮、无水乙醚对其进行研究与试验，通过合理方式做好工作。在选择仪器设备的过程中，主要应用烧杯，三角瓶、往复式振荡筛、无菌操作箱、旋转蒸发仪设备、冷冻离心机设备、冷冻干燥机设备、超净工作台设备、电子分析天平设备、真空干燥箱设备等。在实际使用的过程中，需针对机械设备质量进行全面管理与严格协调，保证其使用价值，增强管理效果，满足当前的实际使用要求，达到预期的处理目的。

对于斜面培养基而言，主要使用的为综合PDA培养基，其中为去皮马铃薯（200g）、葡萄糖（20g）、琼脂（20g）、水（1000ml），在120摄氏度的环境下灭菌30分钟。选择种子培养基，其中为土豆200g、葡萄糖30g、蛋白胨2g、酵母浸膏2g、磷酸二氢钾（1g）、硫酸镁（1g）、维生素B1（10mg）1片、水，在120摄氏度的环境中灭菌30分钟。在选择发酵培养基的过程中，其中为葡糖糖、玉米粉、麦麸、蛋白胨、酵母浸膏、硫酸镁、磷酸二氢钾、维生素B1、水，在120摄氏度的环境中灭菌30分钟。

1.2 试验方式

在试验的过程中，需做好种子培养工作，明确为液体的发酵培养方式，全面收集菌丝体，以便于提升试验效果。

第一，在种子培养的过程中，需针对活化斜面的菌种进行分割，使其形成蚕豆大小的块体，并在无菌环境中对其进行接种，以便于将其融入液体中更好的进行培养，将液体的剂量控制在250ml，将三角瓶的液量设置成为80ml，在28摄氏度的环境中保存七天左右。第二，在对液体发酵进行培养的过程中，可将已经培养成功的种子筛选10%的剂量，并接种在500ml剂量的三角瓶中，保证装液量为180ml，并在相同条件之下对其进行继续培养，时间为六天左右。第三，在收集菌丝的时候，应将发酵液放置在离心杯设备中，将其规格设计在4000r每分钟左右，离心的时间为十分钟，并针对菌丝进行沉淀处理，使用蒸馏水对其冲洗，保证实际处理的效果。同时，还要做好蒸馏水的冲洗工作，将其设置在六十摄氏度温度环境中衡量重量，做好生物量的计算工作，保证可以提升处理效果，满足菌丝的实际处理符合规定。第四，在胞外粗多糖提取的过程中，需针对过滤之后的发酵液实施真空浓缩处理，使其转变成为原来体积的20%，并在浓缩期间，在发酵液中添加3倍左右体积的乙醇，保证在4摄氏度环境中放置处理，在过夜之后，需对发酵液进行离心处理，将规格设置在4000r每分钟左右，离心时间为五分钟，使其形成沉淀反应。针对沉淀冷冻干燥情况，获得粗多糖提取物，然后对其获得率进行计算，以此提升处理效果。

表1 正交实验因素与水平分析

2 相关结果分析

在试验之后，需针对结果进行全面的分析，明确各方面要求与原则，利用合理的方式解决问题，创建现代化与多元化的控制机制，保证能够创建良好的营养条件。

2.1 不同碳源对营养条件的影响

在实际处理的过程中，可将葡萄糖试剂、可溶性淀粉产品、蔗糖产品、玉米粉产品与乳糖产品等融合在一起，替代培养基中的碳源，并保证其他成分没有变化，以便于对生物量进行测量，保证结果的准确性与可靠性。在实际培养的过程，不同碳源会对菌丝的生长产生不同影响，应对其进行合理的分析与明确，根据菌丝生物量进行分析，并对玉米粉与蔗糖等全面了解。虽然将玉米粉作为碳源进行培养不能保证可溶性淀粉的使用效果，但是，能够提升发酵液的处理水平，保证菌球的均匀性与合理性，明确具体的内容。对于玉米粉而言，其中含有较多核苷酸物质与纤维素物质，可以诱导灵芝中的胞外多糖的良好合成，明确具体的情况。在此期间，需针对培养成本进行综合的探讨，明确具体内容与要求，并将玉米粉作为碳源进行处理，以便于增强各方面的处理效果，协调相关工作之间的关系。

2.2 不同氮源对于营养条件的影响

在对营养条件进行优化的过程中，应选择合理的碳源，并对其进行严格的控制，将蛋白胨成分、麦麸成分、氯化铵成分、硝酸铵成分等作为液态培养期间的培养基氮源，利用摇床对其进行，在成分不变的情况下，能够更好的测定生物量与相关粗多糖的数量。经过相关研究可以得知，不同氮源对于松杉灵芝液体培养会造成一定影响，应合理筛选相关氮源进行处理，保证实际使用量。对于蛋白胨与麦麸成分而言，在使用期间多糖获得率较高，由于麦麸成分在实际采购的过程中成本较高，因此，需对培养基的造价进行综合探讨，明确具体的多糖情况，并利用资源控制的方式对其处理，将麦麸作为最主要的氮源进行处理，以此增强分析与控制效果，满足当前的发展需求[1]。

2.3 无机盐对于菌丝生物量的影响

经过相关研究可以得知，在最合適的氮源与碳源之下，无机盐会对菌丝的生物量产生一定影响，应明确具体成分的情况，并在成分不变的情况下，测定其中的粗多糖成分，明确含量信息与数据，保证工作效果。在实际处理期间，应添加少量的无机盐成分，对其合理的研究与分析，明确成分特点[2]。

2.4 正交试验对营养条件的影响

在实际培养的过程中，应科学使用正交试验的方式对其处理，利用科学的培养基方式形成现代化的管理机制，在与无交试验与正交试验相互作用的情况下，形成准确的结果。在此期间，需针对玉米粉的浓度进行严格控制，保证麦麸的浓度符合相关规定，并合理使用摇瓶的方式对其处理，明确具体多糖获得率，对其进行严格的分析，保证形成良好的营养条件[3]。

3 结束语

对于松杉灵芝液体发酵培养而言，与传统培养方式相较的生产周期较短，省工省力，生物利用度高。且容易对其质量进行控制，只需针对培养液营养条件进行优化，从而得到优质的松杉灵芝产品。以便于将松杉灵芝产品应用在食品领域、药品领域与化妆品领域中。

参考文献

[1]于海洋，弥春霞，陈欢等.松杉灵芝液体发酵培养营养条件优化[J].北方园艺，2015（4）：152-156.

[2]李爱欣，许利婷，张术影等.松杉灵芝发酵物对乙醇诱导小鼠胃溃疡的保护作用研究[J].食品与发酵科技，2015，51（3）：37-40，43.

[3]于海洋.松杉灵芝多糖的发酵和提取条件优化及抗氧化活性研究[D].牡丹江师范学院，2015.