87株儿童感染肺炎链球菌的临床耐药监测情况分析

黄锦莲

（福建省沙县医院检验科 福建 沙县365050）

肺炎链球菌是引起社区获得性肺炎的一种常见病原菌，可导致慢性支气管炎、中耳炎、肺炎等,严重者甚至并可引起脑膜炎、败血症等疾病。近年来，我国肺炎链球菌感染率呈上升趋势，已成为全球肺炎链球菌感染相关疾病死亡最为严重的国家之一。同时抗生素耐药的肺炎链球菌已在全球蔓延，导致肺炎链球菌感染治疗失败的危险性增高。肺炎链球菌对常用药物的耐药性不断增长，也存在明显地域差异。本研究通过对我院2014年1月至2017年6月分离到的87株肺炎链球菌进行临床耐药监测回顾分析，以便指导临床治疗合理用药。

1.材料与方法

1.1 临床资料

选择在我院门诊及住院病人诊断为肺炎的991例儿童，男576例，年龄2周～12岁，平均年龄3.82±1.18岁，女415例，年龄1周～13岁，平均年龄3.68±1.24岁，采集临床标本（痰液、咽拭子、血液、脑脊液等）进行肺炎链球菌分离培养鉴定等。

1.2 主要试剂及仪器

胆汁溶菌、奥普托欣纸片为杭州天和微生物试剂有限公司生产，哥伦比亚血平板，美国BD Phoenix 100全自动微生物分析仪及配套的试剂。

1.3 肺炎链球菌的分离培养、鉴定和药敏实验

取临床标本(痰液、咽拭子）接种于哥伦比亚血琼脂培养基上，置于5%的二氧化碳培养箱中，在37℃条件下培养18～24h，或者脑脊液血液标本接种于血培养瓶中，置于血培养箱仪中，阳性瓶报警后接种于血平板中。对疑似肺炎链球菌的菌落通过革兰染色镜检、奥普托欣(optochin)和胆汁溶解试验初步鉴定，菌落典型者采用美国BD Phoenix 100全自动微生物分析仪及配套试剂进行鉴定及药敏MIC测定，采用标准菌株肺炎链球菌ATCC 49619进行质控。

1.4 统计学分析

采用WHONET5.4软件对分离出的肺炎链球菌感染患儿的相关临床资料及药敏结果进行统计分析。

2.结果

2.1 标本的种类来源

991 份临床样本中，共分离到87株肺炎链球菌，阳性率为8.78%。见表1。

表1 标本种类来源情况

2.2 耐药情况分布

87株肺炎链球菌中，对红霉素、四环素、复方新诺明耐药率比较高，耐药率依次为72.41%、74.71%、67.82%，对厄他培南、利奈唑烷、万古霉素三种药物未发现耐药情况。见表2。

表2 耐药分布情况表

3.结论

本研究中通过对991份临床样本进行肺炎链球菌的分离培养，共分离到87株肺炎链球菌，阳性率为8.78%，阳性率略低可能有些肺炎儿童已经有自行服用抗生素后，对培养结果产生的影响。本文中的临床标本来源主要采集了患儿的痰液、咽拭子、血液、脑脊液等，通过这些标本的选择可以避免定植于鼻咽部的肺炎链球菌影响，有利于临床分离到致病的肺炎链球菌病原生物学鉴定。在991份标本中，从625份痰液标本中分离到47株，阳性率7.52%，235份咽拭子中分离到23株（9.79%），109份血液中分离到14株（12.84%），22份脑脊液中分离到3株（13.64%）。不同标本种类都能分离到肺炎链球菌，痰液标本是比较容易见到获取的标本，但需要严格控制是否为合格的临床标本，否则易影响到菌株的分离率。咽拭子也是比较好获取的标本，是无创检查，患儿及家属也较容易接受。而血液及脑脊液标本，是种有创检查，儿童及家属难于接受，一般在重症患儿才采集此类标本，为此本研究中血液及脑脊液的标本较少。

肺炎链球菌耐药已经成为全世界范围一个突出问题，且呈逐年增长。表2中结果显示，87株肺炎链球菌对抗生素耐药较高的为四环素74.71%（65/87）、红霉素72.41%（63/87）、复方新诺明67.82%（59/87）；同时青霉素34.48%（30/87）,阿莫西林32.18%、头孢噻肟24.14%、头孢曲松22.99%，也是出现不同程度的耐药；而厄他培南、利奈唑烷、万古霉素这三种未发现耐药菌株。不同药物的耐药机制是不一样的，如四环素耐药机制主要是通过主动外排系统，将药物排除菌体；其次为产生一种保护核糖体的蛋白，使药物不能与核糖体结合，本研究中四环素的耐药率为74.71%,是所监测的16种抗生素中耐药最严重的。本监测数据中发现红霉素耐药率为72.41%（63/87），与国内其他学者报导情况相近[1]。泰利霉素是种半合成的红霉素衍生物，对耐红霉素的肺炎链球菌表现出很高的抗菌活性，本研究显示泰利霉素敏感性高，其毒副作用低，可为临床治疗耐药肺炎链球菌提供一种抗生素选择。87株肺炎链球菌对青霉素耐药率34.48%（30/87）。肺炎链球菌对青霉素耐药的机制主要是细菌细胞壁上的青霉素结合蛋白（PBP）基因发生变异，随即高分子量PBP的结构发生改变，使其对抗生素分子的亲和力降低而产生耐药[2]。青霉素结合蛋白变异或多或少涉及到头孢菌素，这是肺炎链球菌对头孢菌素耐药的一个重要原因。监测结果显示对头孢噻肟和头孢曲松耐药率分别为24.14%和22.99%。本组资料左氟沙星耐药率为3.45%，氧氟沙星耐药率为1.15%，莫西沙星耐药率为1.15%，由于喹诺酮耐药率比较低，可作为耐青霉素肺炎链球菌感染的备用选择。厄他培南、利奈唑烷、万古霉素这三种抗生素对肺炎链球菌具有良好的抗菌效果，本研究的肺炎链球菌对该药物全敏感，与其他文献报道一致[3]。虽然体外药物敏感性较高，但由于氯霉素、万古霉素和喹诺酮类药物对儿童骨骼生长发育有影响，因此儿童对该类药物的使用受到较大的限制。

综上所述，肺炎链球菌感染引起的高发病率和致死率且对抗菌药物的耐药状况比较严峻，为此我们必须加强肺炎链球菌的筛查及耐药性监测，指导临床合理用药。

【参考文献】

[1]陈文标，朱焱，黄东红，等.2013-2014年泉州地区肺炎链球菌感染的分布与耐药性分析[J].海南医学，2015，26（24）：3655-3658.

[2]郭映辉，何宝花，王颖童,等.182株儿童患者肺炎链球菌的分子生物学鉴定及分型[J].中国感染控制杂志,2017,16(4):326-328.

[3]邓林强，陈会，郭建军，等.100株肺炎链球菌耐药性分析[J].实验与检验医学，2011，29（6）：633-634.