晚期肺鳞癌FOXM1表达水平与临床病理特征及吉西他滨化疗疗效的相关性

张琰 王强 单莉（通讯作者）

（新疆医科大学第三临床医学院肺内科一病区 新疆 乌鲁木齐830011）

非小细胞肺癌（non-smallcelllung cancer，NSCLC）是世界范围内病死率最高的恶性肿瘤。近年来，NSCLC的发病率呈增长趋势，手术是最有效的治疗手段[1]。NSCLC的主要病理类型包括肺腺癌和肺鳞癌，其中肺鳞癌约占20%～30%,NSCLC在疾病早期较难被发现，而进展期的NSCLC患者5年的生存率小于15%[2]。不同于肺腺癌在各个分子靶向药物中取得的突破性进展，晚期肺鳞癌的治疗效果远远不如腺癌[3]。以吉西他滨、紫杉类药物为主的化疗方案是目前治疗肺鳞癌的主要方案，但化疗效果存在个体差异。FOXM1作为FOX转录因子家族中的重要成员之一，在哺乳动物器官的发育、细胞的分化和增殖中发挥着极为重要的作用[4]，FOXM1具有刺激细胞增殖的作用，故其对于恶性肿瘤的形成及恶化中具有非常重要的意义。本研究探讨晚期肺鳞癌FOXM1表达水平与临床病理特征及吉西他滨化疗疗效的相关性

1.资料与方法

1.1 一般资料

收集新疆医科大学附属肿瘤医院2012年—2014年经组织病理证实为肺鳞癌患者105例进入本研究，均行表皮生长因子受体基因检测证实为野生型。组织学分型、分级采用2004年世界卫生组织公布肺恶性上皮性肿瘤组织分类，TNM分期采用国际肺癌研究学会（IASLC）2009年第7版分期。105例患者中男64例，女41例；年龄35～72岁，中位年龄54岁；病理类型均为鳞癌；分期为IIIB～IV期，IIIB期46例，IV期59例；淋巴结转移64例，无淋巴结转移41例；病理分级高中分化55例，低分化50例；有吸烟史64例，无吸烟史41例。

1.2 治疗方法及疗效评价

病人均采用吉西他滨1000mg/m2，第1天和第8天静点，卡铂注射液按照AUC=5计算，于第1天静点。每21天为1周期，每2周期复查CT进行疗效评价，疗效评价按照实体瘤疗效评价标准（RECIST）1.1版进行。分为完全缓解（CR）、部分缓解（PR）、疾病稳定（SD）及疾病进展（PD）。客观有效率（ORR）是指CR和PR患者占所有患者的比率。无进展生存时间(PFS)是指肿瘤患者从接受化疗开始到观察到疾病进展或者发生因为任何原因死亡的这段时间。

1.3 免疫组化染色

选取石蜡标本进行4um连续切片，然后行免疫组化染色，步骤参考试剂盒说明书。用已知的阳性切片作为阳性对照，PBS代替一抗作为阴性对照。FOXM1蛋白的阳性表达主要表现为细胞核内呈现棕黄色或棕褐色颗粒，同时细胞胞浆内也可呈现少量棕黄色颗粒，因此以细胞核或细胞浆内出现棕黄色颗粒为阳性细胞的判断标准。

1.4 FOXM1表达检测结果的判断标准

每例标本选择5个高倍视野，根据细胞质染色的程度和阳性染色细胞百分比进行综合评分。细胞质染色程度评分标准：不着色为0分，淡黄色为1分，黄色为2分，棕褐色为3分。阳性染色细胞百分比评分标准：阳性细胞小于1%为0分，1%～10%为1分，11%～50%为2分，＞50%为3分。染色程度评分与阳性染色细胞百分比评分的乘积大于或等于4分为FOXM1阳性表达，0～3分为FOXM1阴性表达。

1.5 统计学处理

采用SPSS19.0统计软件进行数据处理及统计学分析，计数资料以例数或百分率表示，组间比较采用χ2检验，无进展生存期（PFS）的比较采用Kaplan-Meier法。以P＜0.05为差异有统计学意义。

2.结果

2.1 免疫组化结果

FOXM1蛋白定位于细胞质或细胞核，呈棕黄色或棕褐色颗粒。在105例患者中，阳性表达47例，阴性表达58例，阳性表达率44.8%（47/105）。详见图1和图2。

2.2 FOXM1蛋白的表达与晚期肺鳞癌患者临床病理特征的关系：FOXM1蛋白的表达与晚期肺鳞癌患者的年龄、性别、分期及吸烟史无关（P＞0.05）；FOXM1蛋白的表达与晚期肺鳞癌患者肿瘤分化程度、淋巴结转移状态有关（P＜0.05）。详见表1。

2.3 FOXM1蛋白的表达与吉西他滨方案化疗疗效的关系

所有患者一线均选用吉西他滨联合卡铂方案，FOXM1蛋白表达阳性患者有效率低于FOXM1蛋白表达阴性的患者见表2；FOXM1蛋白表达阳性患者PFS短于FOXM1表达阴性患者（P＜0.05）见图3。

图1 免疫组化检测肺鳞癌组织中FOXM1的阳性表达

图2 免疫组化检测肺鳞癌组织中FOXM1的阴性表达

表1 FOXM1蛋白的表达与晚期肺鳞癌患者临床病理特征的关系

表2 FOXM1蛋白的表达与晚期肺鳞癌患者一线化疗疗效的关系

图3 FOXM1蛋白表达与患者PFS的关系

3.讨论

肺癌为全球范围内病死率最高的恶性肿瘤，迄今为止，肺癌患者的总体5年生存率依然处于较低水平，仅为15%左右，造成这种情况是由于大部分患者在确诊时已为晚期病例，采用放化疗等治疗手段效果不理想之故[5，6]。FOXM1作为FOX转录因子家族的主要成员之一，在细胞周期特异性基因的控制、细胞增殖与分化以及器官的发育等一系列生理进程中担当着重要的地位。最近几年的研究显示，FOXM1具有刺激细胞增殖的作用，所以其针对恶性肿瘤的产生和进展具有非常重大的意义。大量研究结果显示，在多种实体恶性肿瘤组织中均发现了FOXM1呈高表达这一情况。由于FOXM1参与了对多种肿瘤生长的调控，目前关于FOXM1表达的差异与晚期肺鳞癌吉西他滨化疗的疗效的关系鲜有报道。本部分研究中我们主要应用免疫组化的方法检测晚期肺鳞癌患者中FOXM1表达情况，研究其与晚期肺鳞癌患者临床病理参数及使用吉西他滨方案化疗疗效的关系，为评估晚期肺鳞癌患者预后以及吉西他滨方案化疗的疗效提供新的理论依据。

本研究中，FOXM1蛋白定位于细胞质或细胞核，呈棕黄色或棕褐色颗粒。在105例患者中，阳性表达47例，阴性表达58例，阳性表达率44.8%（47/105）。

FOXM1蛋白的表达与晚期肺鳞癌患者的年龄、性别、分期及吸烟史无关；FOXM1蛋白的表达与晚期肺鳞癌患者肿瘤分化程度、淋巴结转移状态有关。FOXM1蛋白表达阳性患者化疗有效率25.5%，低于FOXM1蛋白表达阴性的患者的有效率44.8%；FOXM1蛋白表达阳性患者PFS为2.8个月，短于FOXM1表达阴性患者4.1个月。

FOXM1作为一种增殖因子，大量研究结果表明，FOXM1与恶性肿瘤发生的调控进程相关，FOXM1在NSCLC组织中往往表现为过度活化，与NSCLC的产生以及恶性化过程直接有关，同时还能影响患者预后，故其对于恶性肿瘤的形成及恶化中具有非常重要的意义。有学者选用免疫组化方法对80例NSCLC组织以及癌旁相应正常组织中FOXM1蛋白的表达进行检查，观察到的结论为结论显示FOXM1在中低分化的鳞癌中的表达呈阳性[7]。类似的结论在本研究中同样得到了证实。最近几十年来，医学工作者们对于年龄、性别、临床分期、病理类型、血清癌胚抗原（carcino-embryonicantigen，CEA）水平、一般状况评分、初始治疗反应、化疗方案、放疗剂量、原发肿瘤大小、血清乳酸脱氢酶含量等临床病理参数与非小细胞肺癌化疗的疗效是否存在相关性进行了大量的探索，旨在寻找出某些规律，从而为非小细胞肺癌的化疗能够供新的分子标志物，从而开辟新的治疗方向。

FOXM1表达程度的异常升高对恶性肿瘤的发生具有促成作用，同时还可以使诸多的恶性肿瘤的临床期别增高、浸润及转移的范围扩大、淋巴转移可能性大、从而使得疗效和预后均削弱。因而可得出此结论，对FOXM1在恶性肿瘤组织中表达的检验，可以为肿瘤的诊断、医治与预后提供重要的根据。

FOXM1在对恶性肿瘤生长的调控过程中发挥了重要作用，且目前已有大量研究证实其与NSCLC患者的预后之间存在密切联系，但迄今为止有关FOXM1表达的差异与晚期肺鳞癌患者使用吉西他滨方案化疗疗效之间关系的研究依然较少。在肿瘤的增殖进程中细胞信号通路传导和其余生物学路径均可成为NSCLC预防和治疗的新靶点，有一部分研究着力于以FOXM1为靶点探究NSCLC医治的新策略。我们希望随着临床研究的深入发展及探索，以期望能够为晚期肺鳞癌的临床治疗指明新的方向。

综上所述，本研究FOXM1作为科研对象检测其在晚期肺鳞癌患者癌组织中的表达，剖析其与该部分人群患者病理参数、化疗疗效的相关性。结论显示FOXM1在大部分患者组织中表现为高表达状态，与晚期肺鳞癌患者的肿瘤分化程度、淋巴结转移状态有关，同时还与吉西他滨化疗的疗效相关，因此FOXM1有希望作为NSCLC化学治疗的靶标。但FOXMl是如何发挥促进转移、影响预后作用的仍需要进一步的深入研究。

【参考文献】

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[3]陈妍，张威威，吉兆宁，等.UGT1 A1基因多态性与吉西他滨治疗晚期肺鳞癌毒性和疗效的关系[J].齐齐哈尔医学院学报，2015,（22）:3277-3280

[4]Golson ML, Kaestner KH. Fox transcription factors: from development to disease. Development. 2016, 143(24): 58-4570.

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[7]Liu Y Q,Guo R H,Liu L K,et al[Correlation between expression of forkhead box M1(FOXM1)and clinicopathological features and prognosis in patients with non-small cell lung cancer(NSCLC)][J]. Zhonghua zhong liu za zhi[Chinese journal of oncology].2011,33(6):426-30.