猪伪狂犬疫苗及评估

赖 志，高俊锋，马晶晶，吴碧青，韩相敏

（上海创宏生物科技有限公司，上海 201619）

伪狂犬病（Pseudorabies，PR）是伪 狂 犬 病 病 毒（Pseudorabiesvirus，PRV）引起的高度接触性传染病，主要通过接触和空气传播，家畜的主要症状有奇痒、发热、脑脊髓炎和繁殖障碍等症状，一旦疫病发生，该病毒可感染脑神经，形成“潜伏感染”，终身带毒，很难根除，给养殖业造成巨大的经济损失。

1　猪伪狂犬疫苗的分类

目前，对该病的防控，国内外均以疫苗免疫预防为主，结合伪狂犬病毒gE抗原和gE抗体检测淘汰、净化野毒感染猪。国内外临床应用的PR疫苗大体可分为以下两类：一是灭活疫苗，灭活疫苗又分为两种。其中将分离的野毒或强毒经甲醛灭活后，加佐剂乳化制成油乳剂“全病毒”灭活疫苗，因为无法做到疫苗毒和野毒感染的鉴别诊断，已经不再批准新疫苗生产；另一种是将分离的流行毒株进行gE基因缺失后经灭活剂灭活后加佐剂制成的基因缺失灭活疫苗，这类灭活疫苗安全、免疫原性好，还可以做到鉴别诊断，有利于猪伪狂犬病的净化，将是猪伪狂犬疫苗研发的主要方向。二是基因缺失活疫苗，活疫苗也分为两种。一种是将分离的野毒经低温、高温或变温复传代致弱研制的基因缺失弱毒疫苗，称为“自然基因缺失活疫苗”；另外一种是利用基因工程技术构建的基因缺失疫苗，称为“人工基因缺失活疫苗”。这些疫苗在PR的防控方面起到非常重要的作用。

2　猪伪狂犬病免疫程序的设计及疫苗的选择

根据猪伪狂犬病感染和发病特点，我们需要从这几方面进行设计免疫程序和选择相应的疫苗。

2.1 黏膜免疫

猪伪狂犬病主要通过空气和鼻腔接触传播，鼻腔接种是防控猪伪狂犬病的最佳免疫途径。由于鼻腔免疫是提升黏膜免疫，所以需要接种活疫苗。鼻腔接种活疫苗不仅可以提升黏膜免疫，还可以促使疫苗毒株，进入脑神经细胞提前“占位效应”，抵抗野毒感染，为猪伪狂犬病净化打下坚实基础。所以，在感染压力大的猪伪狂犬病阳性猪场，必须进行滴鼻免疫（一般建议在1～3日龄进行）。黏膜免疫效果如何，与疫苗毒株、接种剂量、佐剂成分等有关。尤其是佐剂，最好选择非油性佐剂。据研究纳米佐剂可以提升猪伪狂犬病黏膜免疫的水平，例如使用于猪伪狂犬耐热保护剂活疫苗（C株）上的AD04纳米佐剂。

表1　新注册PR疫苗和检测试剂盒统计表

表2　PR疫苗生产企业统计表

2.2 细胞免疫

猪伪狂犬病毒有很强的细胞免疫效果，接种后可以产生大量的细胞因子和干扰素，迅速压制感染的病毒。这就是猪群暴发伪狂犬病毒感染时，进行紧急接种，可以在短时间内控制疫情的原因。伪狂犬细胞免疫效果与接种抗原含量、毒株毒力强弱等因素有关系，因此，一旦暴发疫情，建议使用抗原含量高（每头抗原含量≥106.0TCID50）的新流行毒株伪狂犬活疫苗。

2.3 体液免疫

体液免疫是控制猪群排毒和再感染的主要环节，猪群排毒的主要环节在种猪，因此，核心群一定要做好猪伪狂犬病的免疫。体液免疫的主要指标是中和抗体。高水平中和抗体的母猪不仅可以消除猪伪狂犬病的垂直传播，而且有高的母源抗体传递给仔猪，抵抗伪狂犬野毒的感染，这也是猪伪狂犬病阳性母猪可以产出猪伪狂犬病阴性的仔猪（后备母猪）的原因。做好种猪免疫，提高猪伪狂犬病体液免疫是猪场伪狂犬病净化的关键环节。体液免疫效果好坏与PR疫苗毒株、抗原含量、佐剂等等有直接关系。种猪结合免疫“灭活疫苗”和“活疫苗”的目的也在于此。

2.4 PR免疫程序设计

一般根据猪场种猪、商品猪的gE、gB抗体检测结果来制定免疫程序。由于疫苗毒株缺失gE基因，因此，免疫后不会产生gE抗体，如果检测到猪群的gE抗体，可以确定为PR野毒感染。从而区分PR疫苗毒感染和野毒感染。

1）种猪免疫程序制定：公猪和母猪免疫程序，每年需要全群普免3～4次PR基因缺失活疫苗，提高猪群的中和抗体水平，以确保猪群不排毒或不被感染，减低猪场的感染压力和感染风险。如果母猪阳性率比较高，可以在产前4～5周加强免疫一次PR基因缺失灭活疫苗，目的是控制母猪排毒，同时提升仔猪的母源抗体，PR阳性母猪可以生产出阴性的仔猪（后备母猪）。

2）商品猪免疫程序制定：PR阳性猪场，仔猪1～3日龄需要滴鼻免疫0.5～1头份PR基因缺失活疫苗。由于PR母源抗体持续时间比较长，一般可以持续至9～12周龄。此时，需要进行gB抗体检测，以确定保育猪PR的免疫时间。建议时间定在母源抗体下降至80%阳性率的时候，一般是安排在8～10周进行首免。此外，大量的PR抗体水平检测结果告诉我们，肥猪15～17周龄再次加强免疫1头份PR基因缺失疫苗，可以防控PR在肥猪阶段暴发的呼吸道疾病。

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2.5 PR疫苗选择原则

1）gE基因缺失疫苗，可以进行与野毒的鉴别诊断。为猪场净化PR打下基础。

2）抗原含量（以农业部发布的质量标注为准）高的PR疫苗，每头份抗原含量≥106.0TCID50。

3）安全性好的基因缺失活疫苗，一般认为自然基因缺失的活疫苗会更安全。

4）副作用小的灭活疫苗，亲水性佐剂的灭活疫苗副作用会轻一些。

5）近年来，PR出现新的流行变异毒株，因此，选择最新流行毒株的PR疫苗。

根据公开信息，目前国内新注册了3种猪伪狂犬病相关生物制品（2种疫苗及1种检测试剂盒）（见表1），共47家企业获得9种猪伪狂犬病相关生物制品（包括7种疫苗和2种检测试剂盒）有效批准文号65个，见表2。

2.6 PR疫苗评估要点

1）安全性：不管活疫苗还是灭活疫苗，安全性是第一要素，因此，免疫后的副作用成为PR疫苗免疫的主要指标。

2）有效性：PR疫苗免疫后， gE、gB抗体的阳性率、中和抗体等都是评估PR疫苗和免疫程序的有效性指的重要指标。

综上所述，选择合适的PR疫苗和制定正确的免疫程序是防控猪伪狂犬病的重要手段。