盐酸小檗碱片含量测定方法的改进

2018-03-31张越千

中西医结合心血管病电子杂志 2017年36期

张越千

【摘要】目的改进盐酸小檗碱片含量测定的方法。方法用流动相溶解和改变过滤方式的方法处理样品。结果经过三种方法的对比，改进方法获得满意结果。结论改进的两种方法可靠，可用于盐酸小檗碱片样品溶液的制备。

【关键词】盐酸小檗碱片；高效液相色谱法；含量测定

【中图分类号】R927.2 【文献标识码】B 【文章编号】ISSN.2095-6681.2017.36..02

盐酸小檗碱片是一种抗菌药，临床上主要用于治疗肠道感染、如肠胃炎等。盐酸小檗碱片的含量測定的方法标准收载于《中国药典》2015年版二部[1]中，其含量测定的方法采用HPLC方法。在检验过程中发现含量测定项下由于对样品的处理不尽完善，导致测定结果偏低。同时也有相关文献报道[2]。因此对样品处理方法进行了相应的改进。分别采用流动相溶解并超声的方法和增加微孔滤膜

（0.45 μm）过滤弃去初滤液的方法。

1 仪器与试药

Agilent 1260高效液相色谱仪；电子天平（SARTOROUS CP225D）；盐酸小檗碱对照品（来源：中国药品生物制品检验所，批号：110713-201613，标示含量：86.8%）；盐酸小檗碱片样品（规格：0.1 g；市售品；批号：160613）；色谱纯乙腈；水为纯化水；其他试剂均为分析纯试剂。

2 方法与结果

2.1 色谱条件

色谱柱：Kromasil C18（4.6×250 mm，5 μm）；流动相：磷酸盐缓冲液[0.05 mol/L磷酸二氢钾溶液和0.05 mol/L庚烷磺酸钠溶液（1：1），含0.2%三乙胺，并用磷酸调节

pH值至3.0]-乙腈（40：60）；流速：1.0 ml/min；检测波长：263 nm；进样量：20 μL；柱温：35℃；理论塔板数不低于3000；小檗碱峰与相邻杂质峰分离度大于1.5。

2.2 对照品溶液的制备

精密称量盐酸小檗碱对照品20 mg，置于50 mL容量瓶中，加沸水使溶解，并稀释至刻度，摇匀。精密量取

5 mL，置于50 mL容量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀，作为对照品溶液。

2.3 供试品溶液的制备

2.3.1 药典法

取供试品20片，精密称定，研细，精密称取细粉适量（约相当于40 mg盐酸小檗碱），置于100 ml量瓶中，加沸水适量使溶解，放冷后用水稀释至刻度，摇匀，滤过，弃去初滤液（约8 ml），精密量取续滤液5 ml，置50 ml量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液。

2.3.2 改进方法

取供试品20片，精密称定，研细，精密称取细粉适量（约相当于40 mg盐酸小檗碱），置于100 ml量瓶中，加流动相使溶解，超声20分钟，用流动相稀释至刻度，摇匀，滤过，弃去初滤液约8 ml，精密量取续滤液5 ml，置50 ml量瓶中，用流动相稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液。

2.4 测定方法

精密量取20 μL，注入液相色谱仪，记录色谱图，按外标法以峰面积计算，即得。

2.5 线性范围

精密称量盐酸小檗碱对照品20 mg，置于100 ml容量瓶中，加沸水溶解，并稀释至刻度，摇匀；精密量取1 mL、2 mL、4 mL、8 mL、16 mL、32 mL置于50 mL容量瓶中，加水稀释至刻度。按照2.1色谱条件，精密量取20 μL，注入液相色谱仪，记录色谱图。以浓度C（μg/mL）为横坐标，峰面积A为纵坐标，进行线性回归。线性方程为

A=192.9C-154.25（R2=0.9996；n=6），表明浓度在4.07～130.27 μg/mL范围内，呈良好的线性关系。

2.6 精密度实验

用线性关系考察中盐酸小檗碱浓度为32.57 μg/mL的对照品溶液，重复进样5次，测得的RSD为0.63%。

2.7 重复性实验

精密称取同一批号的供试品5份，按2.3项下方法制备供试品溶液，含量测定结果的RSD为0.55%，表明重复性好。

2.8 回收率实验

精密称取含量已知的盐酸小檗碱片细粉（约相当于盐酸小檗碱30 mg），分别置100 mL容量瓶中，精密加入对照品，按照2.3.1方法配制成溶液。进样，记录色谱图并计算加样回收率，平均回收率为97.75%，RSD为1.3%。测得结果见表1。

通过对同一批盐酸小檗碱片采用三种方法同时3次的测定结果见表2。

结果表明，改进方法1略优于药典法，而改进方法2显著优于前两种方法，更接近于检验的真实值。

3 讨论

三种方法相比较，不同的溶解方法和过滤方式对盐酸小檗碱片的测定结果影响不尽相同，改进后的方法测得的含量准确性更高。分析在实验过程中，由于溶解方法和过滤方式的不合理、不完善将导致部分药品的含量测定的结果达不到国家规定的标准。

因此，建议采用流动相超声溶解并用微孔滤膜