S100A8蛋白在口腔鳞癌中的表达及临床意义
2018-03-30瞿泽丰马洪段晓峰刘睿高琼
瞿泽丰 马洪 段晓峰 刘睿 高琼
550004 贵阳, 贵州医科大学附属口腔医院口腔颌面外科
口腔鳞状细胞癌(oral squamous cell carcinoma,OSCC)的发生和发展是一个渐进过程,表型的演变是以生物学事件和机制为基础的逐渐演进过程[1]。现已有研究报道S100A8在众多恶性肿瘤中表达升高,近年来对S100蛋白家族有关于肿瘤的研究逐渐增多,但该蛋白与口腔鳞癌关系的研究却鲜有报道。本文意在检测口腔鳞癌中的S100A8的表达情况,结合临床病例病理特点,探讨S100A8蛋白在口腔鳞癌的意义。
1 资料与方法
1.1 组织标本
收集2014~2016 年贵州医科大学附属医院口腔颌面外科病房、贵州省肿瘤医院病人标本共计65 例。均未行任何放化疗处理的35 例鳞癌标本及30 例正常组织标本。
1.2 试剂及方法
1.2.1免疫组织化学染色行SP法将蜡块以5 μm连续切片,实验均严格遵循SP免疫组化二抗试剂盒(北京中杉金桥生物技术有限公司)说明书进行常规染色。S100A8一抗(Abcam公司),PBS代替一抗作为空白对照组。
1.2.2免疫印迹法在组织中加入裂解液,离心后提取上清蛋白。蛋白浓度测定后取20 μg蛋白进行检测S100A8蛋白的表达。一抗兔抗人S100A8单抗(Abcam公司)、 内参鼠抗人GADPH单抗及HRP标记的羊抗兔、 抗鼠二抗(北京中杉金桥公司),最后加入化学发光剂(Millipore)并于暗室用X胶片显影定影。
1.3 统计学处理
应用SPSS 22.0软件包进行统计分析,P<0.05被认为有统计学意义。
2 结 果
2.1 免疫组化结果
S100A8阳性着色位于细胞核和细胞浆,偶见于细胞间质,出现棕褐色或棕黄色颗粒为阳性见图 1。免疫组化中OSCC组及正常组中的S100A8蛋白表达情况见下表 1。S100A8阳性表达与OSCC临床病理的相关性见表 2。
2.2 Western blot 结果
口腔鳞癌组织中可见S100A8较正常组织中呈高表达状态(图 2)。N即为正常组织(Normal),Ca为鳞癌组织(OSCC)。
图 1S100A8蛋白质表达情况 (AP,×200)
3 讨 论
S100A8蛋白被认为是与肿瘤发生发展紧密相关的因子[2]。本课题组于2011 年通过蛋白质组学的方法建立OSCC与正常口腔组织中的差异蛋白表达,发现口腔鳞癌的组织中S1OOA8较正常口腔组织表达上调[3]。此次研究是继上次研究的延续,发现S100A8的高表达与口腔鳞癌的分化状态有较显著的相关性,提示该蛋白有可能为判断恶性程度提供重参考。
综上所述, S100A8在口腔鳞状细胞癌呈高表达,该现象为早期预防及基因水平的治疗口腔鳞癌提供了重要的实验依据。
表 1 OSCC及正常组织中的S100A8的表达
表 2 S100A8在口腔鳞癌中的阳性表达与其临床病理参数的相关性
图 2Western blot 中S100A8蛋白的表达
[1]Dmitrenko AP. Lateral differences in Ki-67 in breast cancer[J]. Mol Clin Oncol, 2016, 4(6): 1041-1044.
[2]Shin JM, Chang IK, Lee YH, et al. Potential role of S100A8 in cutaneous squamous cell carcinoma differentiation[J]. Ann Dermatol, 2016, 28(2): 179-185.
[3]邱乐宏, 马洪. 口腔鳞癌组织蛋白差异表达的蛋白组学测定[J]. 口腔医学, 2011, 31(8): 453-455.