DNA定量分析检查在宫颈病变筛查中的应用价值

梁建

[摘要] 目的 探究DNA定量分析检查于宫颈病变筛查中的应用价值。方法 整群选取该院2014年1月—2016年1月的4 213例患者做DNA倍体检测与宫颈液基细胞学检查，其中的138例液基细胞学阳性与DNA异倍体者做宫颈活检，总结DNA倍体检测于宫颈疾病筛查中的应用价值。结果 4 213例患者中，液基细胞学的阳性检出率为4.1%（共计171例），DNA异倍体细胞检出率为4.9%（共计206例），检出率的对比提示差异有统计学意义（P<0.05）；在DNA异倍体细胞检出增多的同时、液基细胞学阳性检出率也随之升高。234例DNA异倍体与液基细胞检查阳性者中有138例进行活检，少量、中量以及大量DNA倍体异常者检出率分别是8.7%、48.6%、41.3%；以DNA异倍体出现为活检标准，宫颈病变敏感性是98.6%。结论 DNA倍体检测具有精准、快速、客观的应用优点，可作为宫颈疾病筛查的的有效工具在临床做积极推广。

[关键词] DNA定量分析；宫颈病变；筛查；应用价值

[中图分类号] R4 [文献标识码] A [文章编号] 1674-0742（2018）01（b）-0027-03

[Abstract] Objective To study the application value of DNA quantitative analysis and examination in the screening of cervical lesions. Methods 4 213 cases of patients in our department from January 2014 to January 2016 were selected as a group for DNA ploid test and TCT examination， and 138 cases of positive liquid based cytology and DNA heteroploid patients were for cervical biopsy， and the application value of DNA ploid in the screening of cervical lesions was summarized. Results Of 4 213 cases， the positive test rate of liquid based cytology was 4.1%（171 cases in total）， and the test rate of DNA heteroploid cells was 4.9% （206 cases in total）， and the difference in the test rate between the two groups was statistically significant（P<0.05）， and with the increase of DNA heteroploid cell test， the positive test rate of liquid based cytology increased， and 234 cases of DNA heteroploid patients and 138 cases of positive liquid based cytology were for biopsy， and the test rates of a small amount， a medium amount， and a large amount of DNA heteroploid patients were respectively 8.7%，48.6%，41.3%， and the sensitivity of cervical lesions was 98.6% taking the DNA heteroploid as the biopsy standards. Conclusion The DNA ploid test is accurate， rapid and objective， which can be actively promoted as an effective screening means of cervical lesions.

[Key words] DNA quantitative analysis； Cervical lesions； Screening； Application value

宮颈癌为妇科普遍可见的一种恶性肿瘤，其发生率和致死率仅位居乳腺癌之后。宫颈癌会经历癌前病变、原位癌以及浸润癌这样一个漫长的病变过程，想要积极落实宫颈癌的防治，最重要的手段便是筛查与尽早诊断，当前临床上常用来筛查的方法便是宫颈细胞学检查，但是传统使用的巴氏涂片染色方法有较高的假阴性率[1]，因此，该次研究选用联合全自动DNA图像分析系统、液基薄层制片的手段，以该院2014年1月—2016年1月的4 213例患者为例，将其应用到对宫颈病变的临床筛查中去，将相关研究结果作出论述。

1 对象与方法

1.1 研究对象

整群选取该科进行妇科普查的患者共计4 213例，年龄最低22岁、最高70岁，平均年龄（45.7±3.6）岁。

1.2 方法

1.2.1 制片 在阴道窥器的直视条件下，使用宫颈刷采集宫颈脱落的细胞，并将其放到固定液里做固定和离心处理，抛弃上清液，分别把细胞悬液制成两张薄层细胞学片，进行风干处理，风干后，用浓度为95%的乙醇作为固定物，两张涂片分别做Feulgen染色做DNA定量分析，和巴氏染色做细胞学检查。

1.2.2 分析细胞DNA含量 Feulgen染色涂片使用全自动图像分析系统做细胞图像的分析处理，对受检的细胞进行分类和计数。之后打印出DNA倍体分析直方图和细胞点阵分布图，凭借于此做检测报告。NDA倍体异常细胞评价标准[2]：①少量：共计检出1～2个>5C（倍体）非整倍体细胞（即DNA指数≥2.5的细胞）；②中量：共计检出3～10个>5C的非整倍体细胞；③大量：共计检出超过10个的>5C非整倍体细胞。

1.2.3 液基薄层细胞学检查 对巴氏染色阅片结果分成5类：①正常亦或是良性；②未被确定诊断的不典型鳞状上皮细胞（ASCUS）、不排除高级别鳞状上皮内病变（HSIL）的ASCUS（ASC-H）；③低级别鳞状上皮内病变（LSIL）；④重度鳞状上皮不典型增生以及原位癌（HSIL）；⑤鳞状上皮浸润癌。在这5类中，除了第1项代表阴性之外，其它4项皆是代表阳性。

1.2.4 组织病理学检查 所确定的DNA倍体异常细胞者、液基检查阳性患者，组织病理学检查结果可明确为：正常良性，宫颈上皮内瘤变（CIN1，CIN2，CIN3）和宫颈癌。

1.3 统计方法

将该次研究所得数据输入SPSS 19.0统计学软件，进行总汇与处理，采用百分率（%）表示计数指标，行χ2检验，P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 患者一般情况概括

4 213例中，液细胞与（或）DNA异倍体阳性检出共计234例。其中113例患者无论是液基细胞还是DNA异倍体都是阳性。液基细胞学阳性检出率为4.1%（总计171例），DNA异倍体细胞检出率为4.9%（总计206例），组间数据差异有统计学意义（χ2=4.402，P<0.05）。当DNA异倍体细胞检出增多的同时，液基细胞学检出阳性率也随之升高，细胞病变越来越严重。见表1。

2.2 DNA异倍体检测与组织病理学检查结果的比较

234例患者中活检例数为138例，其中少量、中量、大量DNA倍体细胞异常者检出率分别是8.7%、48.6%、41.3%。在异常细胞数量增多时，继而也会提高宫颈癌前病变的发生率和宫颈癌的发生率，见表2。将DNA异倍体出现作为活检标准，宫颈病变敏感性为98.6%（136/138）。

3 讨论

临床上对宫颈癌和癌前病变的主要筛查方法便是宫颈细胞学检查，但是就以往常用的巴氏涂片来说，由于会受到各方面因素的影响，例如标本采集、制片和阅片者的水平高低等，都会容易导致发生较高的假阴性率[3]。

如果应用宫颈细胞学描述性诊断诊断报告系统联合液基薄层制片的方式，能够实现于液态条件基础上，落实细胞的固定处理，能够去除掉粘液的背景，有利于保证宫颈抹片强有效的可读性，并提高检出率、控制假阴性的发生率[4]。经过该文研究，依照结果来看，发现液基细胞检出率在4.1%，若将液基细胞阳性视作活检的标准依据，那么可得到宫颈病变敏感性是98.6%，这和细胞学医生的实际临床操作水平是有很大的相关性的，而且如果是在大规模普查的情况下，由于医生会伴有一定程度的眼睛疲劳，所以可能会发生误诊、漏诊的问题[5]。

人们正常的体细胞是有着较为既定的DNA倍体含量的，也就是二倍体，但是如果说由于细胞会受到致癌因素的影响，在此前提下染色体基因突变，继而DNA不仅在含量方面会发生变化，而且在信息方面也会发生变化，最终造成染色体数量上和结构上呈现出异常状态，异倍体细胞由此发生[6]。当DNA含量突飞猛进时，细胞会随时有分裂、增殖的表现，这也从某种程度上能够表明，可以把细胞核DNA的变化视作是反映肿瘤增殖能力的一个评价标准。就这点来说，国外发达国家在很早便已经开始借助DNA倍体检测系统来做对宫颈癌与癌前病变的检查了[5]。

以液基薄层制片作为基本，加上计算机技术的应用，这便是全自动细胞NDA倍体分析系统，它能快速、准确的确定细胞核与DNA的含量，以此來实现尽早明确癌变诊断[7]。结合该次研究结果来看，液基细胞学阳性检出率为4.1%（有171例）；DNA异倍体细胞检出率为4.9%（有206例）。组间数据差异有统计学意义（P<0.05）。这与徐姗等人[8]研究报道中：液基细胞学阳性率与DNA异倍体细胞检出率分别是8.98%、13.18%，差异有统计学意义（P<0.05）的这一结果相符。可见细胞DNA定量分析是可以减少漏诊的。另外，138例活检患者中，少量、中量、大量DNA倍体细胞异常者检出率分别是8.7%、48.6%、41.3%。

综上所述，DNA倍体检测具有精准、快速、客观的应用优点，可作为宫颈复查的有效工具在临床做积极推广。

[参考文献]

[1] 甘密密，张锡流.DNA定量分析及TCT技术诊断宫颈病变的临床研究[J].实用妇产科杂志，2014，30（9）：674-677.

[2] 王洪珍，史红锦，李峰，等.4种人乳头状瘤病毒DNA检测方法在宫颈病变诊断中的比较研究[J].中华医院感染学杂志，2014，23（9）：2329-2331.

[3] 林丹，罗新，蒋学风，等.DNA倍体分析联合高危型人乳头瘤病毒检测筛查宫颈病变[J].实用妇产科杂志，2014，30（7）：531-534.

[4] 张雪梅，覃福宁，孙奇，等.宫颈DNA倍体分析及TCT在宫颈病变早期筛查中的临床意义[J].重庆医学，2016，45（14）：1974-1976.

[5] 倪亚琴，艾小娥.高危型HPV-DNA检测联合阴道镜在宫颈病变筛查中的临床应用价值分析[J].中国医学创新，2017， 14（12）：62-65.

[6] 钟萍萍，顾依群，王军，等.宫颈癌筛查中DNA定量分析与薄层液基细胞学检查对比分析[J].中国基层医药，2014，21（8）：1129-1131.

[7] 李敏，张春梅，周仕娴，等.TCT 联合DNA 定量分析在宫颈病变筛查中的临床应用[J].重庆医学，2015，44（15）：2045-2047.

[8] 徐姗，梅金红，韩永良，等.宫颈脱落细胞DNA定量分析与薄层液基细胞学检查在宫颈早期病变筛查中的应用比较[J].广东医学，2013，34（9）：1387-1390.

（收稿日期：2017-10-14）