乳腺癌手术前后，cd44+/cd24—，aldh1+作为人乳腺癌肿瘤干细胞标志物血浆细胞含量变化与临床相关性分析

徐延森 马红艳 杨明月 王平 李秀清 鞠英博 孙杰 杜文雅

[摘要] 目的 观察正常人，乳腺癌患者手术前后cd44+/cd24-，aldh1+作为人乳腺癌肿瘤干细胞标志物血浆细胞变化情况，分析其与乳腺癌的临床相关性。 方法 方便选取该院30名健康医护人员以及自2016年1月—2017年6月收治的30例乳腺癌患者作为该次研究对象，检测健康人员与乳腺癌患者手术前后的cd44+/cd24-，并将aldh1+作为人乳腺癌肿瘤干细胞标志物血浆细胞含量，分析数据。 结果 健康人员与乳腺癌患者的aldh1+作为人乳腺癌肿瘤干细胞标志物，两组人员的血浆细胞含量差异无统计学意义（P>0.05），采用乳腺癌外周血中的cd44+/cd24-作为人乳腺癌肿瘤干细胞标志物时，乳腺癌患者的血浆细胞含量（5.3±2.1）%明显高于健康人组（0.0±0.0）%，两组对比差异有统计学意义（P<0.05），且手术后，乳腺癌患者cd44+/cd24-，aldh1+作為人乳腺癌肿瘤干细胞标志物血浆细胞含量均有降低，手术后cd44+/cd24-作为人乳腺癌肿瘤干细胞标志物血浆细胞含量（0.7±0.3）%明显小于手术前（5.3±2.1）%，手术后aldh1+作为人乳腺癌肿瘤干细胞标志物血浆细胞含量（0.8±0.3）%明显小于手术前（3.7±1.2）%，各组数据对比均差异有统计学意义（P<0.05）。结论 cd44+/cd24-，aldh1+作为人乳腺癌肿瘤干细胞标志物血浆细胞含量与乳腺癌疾病的发生和发展具有正相关关系。

[关键词] 乳腺癌手术；cd44+/cd24-；aldh1+；血浆含量；临床相关性

[中图分类号] R5 [文献标识码] A [文章编号] 1674-0742（2018）01（b）-0019-03

[Abstract] Objective To observe the correlation between the Plasma cell content changes and human breast cancer tumor stem cell marker using cd44+/cd24-， aldh1+ before and after breast cancer surgery. Methods 30 cases of healthy medical staff in our department and 30 cases of breast cancer patients admitted and treated in our hospital from January 2016 to June 2017 were conveniently selected as the research objects and the cd44+/cd24- of healthy staff and breast cancer patients before and after surgery was tested and the aldh1+ was used as the plasma cell content of the human breast cancer tumor stem cell marker， and the data were analyzed. Results There was no obvious difference in the plasma cell content between the two groups（P>0.05）， and the cd44+/cd24-was used as the human breast cancer tumor stem cell marker in the peripheral blood of breast cancer， and the plasma cell content of the breast cancer patients was obviously higher than that of healthy group， [（5.3±2.1）% vs （0.0±0.0）%]， and the difference was obvious（P<0.05）， after surgery， the cd44+/cd24-，aldh1+ of breast cancer patients decreased， and the content of cd44+/cd24- after surgery was obviously lower than that before surgery， [（0.7±0.3）% vs （5.3±2.1）%]， after surgery， the aldh1+ was obviously lower than that before surgery[（0.8±0.3）% vs （3.7±1.2）%]， and the difference was statistically significant（P<0.05）. Conclusion The cd44+/cd24-， aldh1+ as the human breast cancer tumor stem cell marker plasma cell content is positively correlated with the occurrence and development of breast cancer.

[Key words] Breast cancer surgery； cd44+/cd24-； aldh1+； Plasma content； Clinical correlation

LDH1属于功能型干细胞标志物，可对干细胞进行分离和鉴定[1-2]。因此，当前发现的2种不同类型的乳腺癌干细胞标志为ALDH1活性高和cd44+/cd24-表型。但是，目前关于肿瘤干细胞的血浆含量变化以及对ALDH1+和cd44+/cd24-表型的乳腺癌干细胞之间生物学特性的差异研究报道尚不多见[3-4]。为此该文特方便选取该院自2016年1月—2017年6月收治的30例乳腺癌患者和该科30名健康医护人员进行研究，旨在探究乳腺癌肿瘤干细胞标志物血浆细胞含量变化与临床相关性，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

方便选择该院收治的30例乳腺癌患者（设为研究组）和该科自愿加入该研究的30名健康女性医护人员（设为对照组）作为研究对象，研究组患者年龄分布为33～45岁，平均年龄为（35.3±1.8）岁，对照组医护人员的年龄分布为31～46岁，平均年龄为（34.7±1.6）岁，两组应试者的年龄、性别差异无统计学意义，可进行对比。

1.2 方法

研究者均行外周血中以cd44+/cd24-，aldh1+为表型的干细胞细胞检测，首先利用EDTA抗凝管采集应试者肘正中2 mL静脉血，并对血样标本进行离心处理，去除最上层的血浆层，取单个核细胞层制备细胞悬液（3.3×105.5/mL），然后将5 μL ALDH1特定抑制物溶液加入到对照组制备的细胞悬液中，研究组细胞悬液中加入5 μL激活的ALDH1底物溶液，使两组患者的细胞悬液发生乙醛脱氢酶1反應，待反应完全后，两组各取100 μL细胞液，加入CD44-PE-CY5、CD24-PE，然后采用流式细胞仪对细胞液进行检测，并记录两组应试者的cd44+/cd24-，aldh1+血浆细胞含量，并采用CELL QUEST软件对检测所获取的数据进行分析。

1.3 观察指标

比较健康人员及乳腺癌患者手术前后外周血中的cd44+/cd24-，aldh1+作为人乳腺癌肿瘤干细胞标志物血浆细胞变化情况[5-7]。

1.4 统计方法

采用SPSS 22.0统计学软件和CELL QUEST软件对该次研究所得数据进行分析和统计，用（x±s）表示计量资料，采用t检验，用（%）表示计数资料，采用χ2检验，P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 健康者及乳腺癌外周血中的cd44+/cd24-，aldh1+作为人乳腺癌肿瘤干细胞标志物血浆细胞含量对比

研究示正常人与乳腺癌患者的aldh1+作为人乳腺癌肿瘤干细胞标志物血浆细胞含量差异无统计学意义（P>0.05），乳腺癌外周血中的cd44+/cd24-，作为人乳腺癌肿瘤干细胞标志物血浆细胞含量（5.3±2.1）%明显高于健康人组（0.0±0.0）%，两组对比差异有统计学意义（P<0.05），见表1。

2.2 乳腺癌组患者手术前后的各项血浆细胞含量变化情况对比

手术后，乳腺癌患者cd44+/cd24-，aldh1+作为人乳腺癌肿瘤干细胞标志物血浆细胞含量均有降低，手术后cd44+/cd24-，作为人乳腺癌肿瘤干细胞标志物血浆细胞含量（0.7±0.3）%明显小于手术前（5.3±2.1）%，手术后aldh1+作为人乳腺癌肿瘤干细胞标志物血浆细胞含量（0.8±0.3）%明显小于手术前（3.7±1.2）%，两组对比差异有统计学意义（P<0.05）。

3 讨论

该研究中，对健康应试者和乳腺癌患者分别采用流式细胞仪外周血中以ALDH1为标志物干细胞检测，检测结果显示，健康人员与乳腺癌患者的aldh1+作为人乳腺癌肿瘤干细胞标志物，两组人员的血浆细胞含量差异无统计学意义，采用乳腺癌外周血中的cd44+/cd24-作为人乳腺癌肿瘤干细胞标志物时，乳腺癌患者的血浆细胞含量（5.3±2.1）%明显高于健康人组（0.0±0.0）%，两组对比差异有统计学意义（P<0.05），且手术后，乳腺癌患者cd44+/cd24-，aldh1+作为人乳腺癌肿瘤干细胞标志物血浆细胞含量均有降低，手术后cd44+/cd24-作为人乳腺癌肿瘤干细胞标志物血浆细胞含量（0.7±0.3）%明显小于手术前（5.3±2.1）%，手术后aldh1+作为人乳腺癌肿瘤干细胞标志物血浆细胞含量（0.8±0.3）%明显小于手术前（3.7±1.2）%，说明了以cd44+/cd24-，aldh1+为表型的干细胞与乳腺癌疾病的发生和发展具有正相关关系，这与郭呈芳等人[8]研究的健康对照组的aldh1+细胞含量（3.12～4.95），cd44+/cd24-细胞含量（0.00～0.00）基本一致。

综上所述，为了改善乳腺癌患者的预后质量，需对肿瘤干细胞相关知识进行深入研究，并采用有效的治疗方式阻碍干细胞的增殖和分化。

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（收稿日期：2017-10-10）