p53、Fas和TNF-α表达水平与宫颈癌的浸润和转移的相关性研究

陈翠兰

宫颈癌是一种常见的妇科恶性肿瘤，多发于中老年女性，发病率较高，且近年来发病人群有年轻化的趋势，严重威胁着人们的生命健康[1]。宫颈癌的致死率较高，且非常容易发生浸润和转移，虽然近些年妇科普查的广泛开展、水平提高和宫颈细胞学筛查的普遍应用使得其发病率和致死率明显下降，但其仍然是目前威胁女性健康的主要疾病之一，而如何能在早期从分子生物学的角度寻找病变发生发展的分子标记物对宫颈癌的诊断和治疗具有重要的意义[2-3]。有研究表明[4]，肿瘤的发生发展与众多癌基因、抑癌基因有关，其中肿瘤抑制基因(p53)、细胞凋亡信号受体蛋白(Fas)、肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor，TNF-α)等细胞凋亡因子在这一过程中发挥着重要的作用。为了进一步探讨p53、Fas和TNF-α表达水平与宫颈癌浸润和转移的相关性，本研究对宫颈癌患者和健康成年女性的p53、Fas和TNF-α表达水平进行了分析比较，同时观察了不同临床病理特征患者以上指标之间的差异，以期为临床提供理论依据。

对象与方法

1.对象：选取2012年3月—2014年8月在本院接受治疗的宫颈癌患者为研究对象。纳入标准：(1)年龄≥18周岁；(2)经病理诊断确诊为宫颈癌者；(3)无其他系统严重疾病者。排除标准：(1)合并其他部位原发肿瘤者；(2)术前直肠功能和性功能障碍者；(3)不愿参与本项研究者。根据纳入排除标准共纳入宫颈癌患者80例，年龄37～68岁，平均(51.4±5.0)岁，鳞癌65例，非鳞癌15例，Ⅰ期35例，Ⅱ期32例，Ⅲ期13例；同期在本院进行体检的健康成年女性80例为对照组，年龄40～69岁，平均(51.5±6.4)岁。两组年龄比较，差异无统计学意义，具有可比性。本项研究经医院伦理委员会评审通过，且所有患者均知情同意。

2.检测方法：采用酶联免疫吸附法检测研究对象血清中p53、Fas和TNF-α的表达水平，具体方法如下：所有入试者抽取空腹静脉血约10 ml，加抗凝剂后以3 000 r/min离心10 min后取上层血清，以酶标仪(德国拜发仪器公司，型号为880)检测p53、Fas和TNF-α的表达水平，各检测试剂盒均购自北京中金杉生物公司，具体检测步骤严格按照试剂盒说明书进行。

3.评价指标：观察两组p53、Fas和TNF-α表达水平，观察不同临床病理特征的宫颈癌患者p53、Fas和TNF-α表达水平的差异，分析影响宫颈癌患者浸润和转移的因素。

结果

1.两组p53、Fas和TNF-α表达水平的比较

宫颈癌组血清p53、Fas和TNF-α表达水平均明显低于对照组，差异有统计学意义(P<0.05)，见表1。

表1 两组p53、Fas和TNF-α表达水平的比较±s)

注：与对照组比较，*P<0.05

2.不同临床病理特征的宫颈癌患者p53、Fas和TNF-α表达水平的比较

临床分期为Ⅲ期、组织学分级为中、低分化、有浸润、发生淋巴结转移和合并HPV感染的宫颈癌患者p53、Fas和TNF-α表达水平较低，而不同年龄的宫颈癌患者上述指标水平无差异，见表2。

项目例数p53(ng/L)Fas(ng/L)TNF⁃α(ng/L)年龄 ≥30岁5234±1041±1642±13 <30岁2835±0940±1541±11临床分期 Ⅰ、Ⅱ期6741±12∗42±13∗42±14∗ Ⅲ期1328±0731±0933±11组织学分级 高分化4538±11∗41±12∗43±12∗ 中、低分化3529±1031±1038±11浸润 有3228±08∗29±09∗36±10∗ 无4839±1140±1044±11淋巴结转移 有3527±08∗31±09∗35±10∗ 无4539±1242±1345±12HPV感染 有3826±09∗29±10∗33±09∗ 无4241±1139±1145±11

注：因素内比较，*P<0.05

3.影响宫颈癌患者p53、Fas和TNF-α表达水平的因素

临床分期、有无浸润、有无淋巴结转移和是否合并HPV感染是影响宫颈癌患者血清p53、Fas和TNF-α水平的因素，见表3。

表3宫颈癌患者p53、Fas和TNF-α表达水平的影响因素分析

变量OR值95%CIp53 临床分期465145⁃1496 有无浸润690243⁃1963 有无淋巴结转移415107⁃1227 是否合并HPV感染701143⁃2242Fas 临床分期512100⁃1526 有无浸润641205⁃2019 有无淋巴结转移492156⁃1524 是否合并HPV感染625253⁃1598TNF⁃α 临床分期475135⁃1468 有无浸润516142⁃1535 有无淋巴结转移425125⁃1352 是否合并HPV感染612212⁃1602

注：自变量赋值如下：临床分期(0=Ⅰ、Ⅱ期，1=Ⅲ期)、组织学分级(0=高分化，1=中低分化)、浸润(0=无，1=有)、淋巴结转移(0=无，1=有)、合并HPV感染(0=无，1=有)，各变量均以取值为“0”组为参照组。

讨论

宫颈癌也称子宫颈癌，主要是指发生在子宫阴道部及宫颈管的恶性肿瘤，是女性常见的恶性肿瘤之一。宫颈癌的发病率较高，在发展中国家是仅次于乳腺癌居第2位的常见恶性肿瘤，宫颈癌每年新发病例大约有50万例，80%的病例在发展中国家，而我国就达13.15万，约占世界宫颈癌新发病例的28.8%。且致死率高，根据WHO数据显示，每年有50万新增宫颈癌病例，25万人死于宫颈癌[6-7]，但其发病原因目前尚不清楚，多认为与早婚、早育、多产及性生活紊乱等有关，而高危型HPV感染、沙眼衣原体、单纯疱疹病毒Ⅱ型、滴虫等病原体的感染与宫颈癌的发生和发展也有着密切的关系[8]。宫颈癌患者的临床表现多为阴道流血、阴道排液，而晚期患者可出现尿频、尿急、便秘、下肢肿痛、输尿管梗阻、肾盂积水及尿毒症等症状，甚至出现恶病质等全身衰竭症状危及生命[9]。

早期宫颈癌患者常无明显症状和体征，宫颈可光滑或难于宫颈柱状上皮异位区别，临床上常常发生漏诊或误诊，而随着病情的发展，癌细胞可直接蔓延或经淋巴转移至邻近器官，进而导致各种症状的发生[10]。因此，从分子生物学角度对宫颈癌的发生、发展、浸润和转移机制进行研究，将对宫颈癌的正确诊断和治疗具有重要的意义。已有研究表明[11-12]，肿瘤的发生与细胞凋亡及其调控基因的异常有密切关系，p53、Fas、TNF-α等多种凋亡因子在肿瘤的发生和发展过程中发挥着重要的作用。Fas是一种膜蛋白，属于肿瘤坏死因子/神经生长因子受体家族，可通过与Fas配体或抗Fas抗体结合并诱导细胞凋亡[13]；而TNF-α是由巨噬细胞产生的一个多效性的细胞因子，在细胞的发热、休克、组织损伤及肿瘤坏死等反应过程中发挥着重要作用，并能导其他细胞因子、免疫调节因子参与细胞的增生、分化与凋亡过程[14]。p53基因作为一种肿瘤抑制基因，其可抑制细胞繁殖并诱导细胞凋亡，进而发挥抗癌的作用[15]。

为了探讨p53、Fas和TNF-α表达水平与宫颈癌浸润和转移的相关性，本研究对本院接受治疗的80例宫颈癌患者的临床资料进行了回顾性分析，并与健康成年女性的p53、Fas和TNF-α表达水平进行了分析比较，同时还观察了不同临床病理特征的宫颈癌患者p53、Fas和TNF-α表达水平的差异，并分析了影响宫颈癌患者浸润和转移的因素。

研究结果表明，宫颈癌组患者血清p53、Fas和TNF-α表达水平均明显低于对照组，提示p53、Fas和TNF-α与宫颈癌的发生和发展有着密切的联系，三种因子的下调可明显促进细胞的增殖并抑制细胞的凋亡，进一步促进肿瘤的发生和发展。同时发现，临床分期为Ⅲ期、组织学分级为中、低分化、有浸润、发生淋巴结转移和合并HPV感染的宫颈癌患者p53、Fas和TNF-α表达水平较低，提示p53、Fas和TNF-α表达水平与宫颈癌的严重程度密切相关，且与癌细胞的浸润和转移相关，而p53、Fas和TNF-α的下调可能参与了宫颈癌的浸润和转移过程。进一步分析发现，临床分期、有无浸润、有无淋巴结转移和是否合并HPV感染均影响宫颈癌患者血清p53、Fas和TNF-α水平的因素，进一步证实了p53、Fas和TNF-α与宫颈癌的发生发展、浸润和转移有着密切的关系，而通过监测三者的水平可成为宫颈癌判断预后和治疗用药的重要指标。但本研究限于研究样本的不足，对于p53、Fas和TNF-α水平影响宫颈癌发生、发展和转移的机制仍需作进一步的深入研究。

综上所述，p53、Fas和TNF-α在宫颈癌患者血清中水平较低，且与是否浸润、转移和合并HPV感染密切相关，而通过检测三者水平可为宫颈癌的诊断和治疗提供重要的指标。

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