重组人内皮抑素结合化疗对晚期非小细胞肺癌患者血清LMTK-3、IGFBP-7的影响

韩敏，王坚，王久胜

（安徽省马鞍山市人民医院 肿瘤科放疗病区，安徽 马鞍山 243000）

肺癌是一种死亡率较高的恶性肿瘤疾病，其中主要为非小细胞肺癌（non-small cell lung cancer，NSCLC）[1]。NSCLC在被发现时，多数已经处于中晚期，治疗难度大大增加。目前，晚期NSCLC的治疗以放化疗为主[2]，但其疗效较差。恩度（重组人内皮抑素，Endostar）主要由人工合成，是一种内源性抗血管生成物质，可作用于内皮细胞，阻止组织内皮细胞的迁移，诱导其死亡，对NSCLC具有良好的抑制效果。为此，有必要探讨恩度联合化疗对晚期NSCLC患者的疗效。Lemur酪氨酸激酶3（Lemur trrosine kinase-3，LMTK-3）是一种酪氨酸激酶亚型，在肿瘤的发生、发展过程中，酪氨酸激酶酸化具有重要的作用[3]。LMTK-3可催化蛋白质磷酸化，将会参与细胞信号通路的转导，对于细胞的增殖、分化及凋亡等过程具有重要的作用。胰岛素样生长因子结合蛋白7（insulin-like growth factor binding protein-7，IGFBP-7）是一种肿瘤抑制基因，可抑制肿瘤细胞的增殖，对于肿瘤发生、发展具有重要的作用[4]。为此，本研究采用重组人内皮素联合化疗治疗NSCLC，观察临床治疗效果并探究其对患者血清LMTK3、IGFBO-7的影响，以期为NSCLC的临床治疗提供依据，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取2012年1月-2015年1月于本院收治的NSCLC患者86例为研究对象，按随机数字表法分为观察组和对照组，每组43例。其中，对照组：男性27例，女性16例；年龄52～76岁，平均（59.1±4.2）岁；腺癌29例，其他14例；临床分期Ⅲ B期22例，Ⅳ期21例。观察组男性29例，女性14例；年龄53～80岁，平均（60.2±5.0）岁；腺癌31例，其他12例；临床分期Ⅲ B期24例，Ⅳ期19例。对两组患者的性别、年龄、病理类型、临床分期等一般资料差异无统计学意义（P＞0.05），具有可比性。本研究经过我院伦理委员会批准。

1.2 纳入标准与排除标准

1.2.1 纳入标准①所有患者症状符合非小细胞癌诊断标准[5]，经病理切片活检确诊为NSCLC患者；②患者卡氏评分不低于70分，机体状况可耐受化疗；③TNM分期为Ⅲ B～Ⅳ期；④入院前未接受过其他手术、化疗或放疗等相关治疗；⑤患者的预计生存期≥3个月；⑥已获得患者知情同意书。

1.2.2 排除标准①排除发生远处转移的患者；②排除患有严重心脏疾病及脏器功能障碍患者；③排除对本方案药物过敏患者；④排除同时伴有其他恶性肿瘤患者。

1.3 方法

对照组患者采取化疗治疗：吉西他滨+顺铂。观察组在对照组基础上联合恩度治疗。对照组患者中，第1天和8天静脉滴注吉西他滨（ELI LILLY公司，注册证号：H20110535）1 000 mg/m2，静脉滴注。第1天静脉滴注顺铂（江苏豪森药业股份有限公司，国药准字H20110812）75 mg/m2。观察组患者第1～14天同时给予恩度（东先声麦得津生物制药有限公司，国药准字S20050088）7.5 mg/m2进行治疗。14 d为1个化疗周期。

1.4 观察指标

1.4.1 临床疗效两组患者均在3个化疗周期后评价疗效，参考WHO制定的相关疗效标准[6]，分为完全缓解（complete remission，CR）、部分缓解（partial remission，PR）、疾病稳定（disease stability，SD）和疾病进展（disease progression，PD）4 类。客观有效率 =（CR+PR）/总例数×100%；总有效率=（CR+PR+SD）/总例数×100%。

1.4.2 不良反应记录治疗期间患者出现不良反应，按照国际通用的NCICTC 3.0版的分级标准评价。

1.4.3 外周血血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor，VEGF）、胰岛素样生长因子1（type-1 insulin like growth factor，IGF-1）检测两组患者均在治疗前后的清晨空腹下采集5 ml外周静脉血，在3 000 r/min离心取上清，置入-20℃冰箱冷冻储存。采用ELISA法（上海江莱生物科技有限公司）检测血清VEGF，IGF-1含量。

1.4.4 外周血LMTK-3、IGFBP检测分别于治疗前和治疗后的清晨空腹采集两组患者外周静脉血5 ml，3 000 r/min离心取上清液，置入-20℃冰箱冷冻保存。采用ELISA法（南京金益柏生物科技有限公司）检测血清LMTK-3、IGFBP含量。

1.5 统计学方法

数据分析采用SPSS 19.0统计软件，计量资料以均数±标准差（±s）表示，两组间比较采用t检验，计数资料以（%）表示，两两比较用χ2检验，等级资料比较采用秩和u检验，P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 疗效评价

观察组治疗客观有效率、总有效率高于对照组（χ2=5.403和7.493，均P＜0.05），观察组的疗效优于对照组，差异有统计学意义（u=6.438，P＜0.05），见表1。

2.2 两组患者不良反应比较

两组患者的白细胞降低、血红蛋白降低、血小板降低、静脉炎、肝功能损害、心电图改变发生率差异无统计学意义（P＞0.05）。见表2。

2.3 两组患者血清VEGF、IGF-1比较

两组患者治疗后VEGF、IGF-1水平较治疗前更低，差异有统计学意义（t=5.679、3.108、6.700及 2.722，均P＜0.05），且观察组治疗后较对照组更低，差异有统计学意义（t=2.548和5.021，均P＜0.05），见表3。

2.4 两组患者血清LMTK-3、IGFBP-7比较

治疗前，两组患者的血清LMTK-3、IGFBP-7水平无有统计学差异（P＞0.05）；两组患者治疗后LMTK-3较治疗前更低，IGFBP水平较治疗后更高，差异有统计学意义（P＜0.05），且观察组治疗后LMTK-3较对照组更低，IGFBP-7更高，差异有统计学意义（P＜0.05），见表4。

表1 两组疗效比较 例（%）

表2 两组患者不良反应比较 例（%）

表3 两组患者治疗前后血清VEGF、IGF-1比较 （n =43，±s）

表3 两组患者治疗前后血清VEGF、IGF-1比较 （n =43，±s）

IGF-1/（ng/ml）治疗前 3周后 t值 P值 治疗前 3周后 t值 P值观察组 526.14±150.28 358.15±122.64 5.679 0.000 179.23±54.31 114.52±32.58 6.700 0.000对照组 508.96±139.30 423.42±114.79 3.108 0.003 185.64±62.89 154.52±40.83 2.722 0.008 t值 0.550 2.548 0.506 5.021 P值 0.584 0.013 0.614 0.000 VEGF/（pg/ml）组别

表4 两组患者血清LMTK-3、IGFBP-7比较 （n =43，±s）

表4 两组患者血清LMTK-3、IGFBP-7比较 （n =43，±s）

IGFBP-7/（ng/L）治疗前 3周后 t值 P值 治疗前 3周后 t值 P值观察组 17.54±4.28 8.95±2.16 11.749 0.000 30.52±10.93 39.47±8.31 4.274 0.000对照组 16.39±5.30 13.42±4.81 2.859 0.005 31.76±12.58 34.15±9.56 2.992 0.010 t值 1.107 6.114 0.488 2.754 P值 0.271 0.000 0.627 0.007 LMTK-3/（ng/ml）组别

3 讨论

肺癌是一种威胁人类健康的恶性肿瘤，80%以上的NSCLC患者在确诊时已经于Ⅲ、Ⅳ期，已经失去治疗时机[7]。晚期NSCLC患者主要治疗方案为吉西他滨、紫杉类等药物与铂类联合，虽有一定的疗效，但患者的生存收益有限[8]。近几年，抗血管生成已经成为治疗肿瘤侵袭转移的重要方式。肿瘤患者存在着血管增生异常，恩度是一种血管增生抑制剂，可提高NSCLC患者的治疗的安全性。恩度可通过内皮细胞的凋亡、周期、迁移等影响，控制血管内皮细胞的增殖，控制癌变组织中的新生血管不断形成。由于恩度的可作用于肿瘤血管内皮细胞，促进药物浓度作用于局部细胞，在原发灶、继发病灶中均具有良好的疗效。

本研究中，观察组的客观有效率和总有效率均高于对照组，有差异，且观察组治疗后的血清VEGF水平低于对照组。VEGF会有效促进肺癌组织不断新生幼稚血管，结构缺乏完整性，癌细胞易于对其进行侵蚀，增加肺癌细胞进入人体血液循环的机率，有助于肺癌的转移。恩度通过特异性作用于新生血管内皮细胞，抑制细胞的迁移，诱导其凋亡，保持良好的抗血管生成效果，降低VEGF水平。同时治疗期间两组患者的不良反应无差异。恩度可抑制NSCLC患者的新生血管生成，控制肿瘤生成，而肿瘤的生成需要血管的生成。与此同时，恩度还可作用于VEGF传导通路，降低蛋白水解酶的活性，进而降低VEGF的表达水平，诱导肺癌细胞凋亡。刘文静等[9]研究表明，恩度联合化疗治疗晚期非小细胞肺癌是一种安全有效的治疗方法，且不增加毒副反应。汪力慧等[10]研究表明，恩度联合化疗方案较单独化疗方案的疗效更高，不良反应发生率并未增加，本研究结果类似，表明重组人内皮抑素结合化疗并不会增加不良反应，安全性较高。

有研究表明，实体瘤的生长、转移主要依靠血管生成，而新生血管会提供营养及氧气，还提供大量的生长因子及存活因子[11]。肺癌的转移是多种因素互相影响的复杂过程。新生血管为肿瘤的转移提供通道，是肿瘤生长的不可或缺的因素。LMTK-3在ER信号通路中具有重要的作用，与肿瘤患者的的生存情况紧密相关。LMTK-3可催化蛋白质磷酸化，参与众多细胞信号通路的传导以及细胞的增殖、分化、转移等过程[12]。近几年，LMTK-3在肺癌肿瘤细胞中高表达，影响细胞的生物学特征，提示可能是一种新的致癌基因参与恶性肿瘤的发展过程。IGFB是IGF-1的受体，两者的异常表达对肿瘤的进展发挥着重要的作用。胰岛素样生长因子是一类多功能细胞增殖调控因子，可促进细胞的分化、增殖、个体的生长发育。IGFB0-7主要通过竞争抑制ICG-1与其受体互相结合，可保持IGF-1免受相关蛋白水解酶的降解。

本研究中，两组患者治疗后VEGF、IGF-1水平较治疗前更低，比较有差异，且观察组治疗后LMTK-3较对照组更低，IGFBP-7更高（P＜0.05）。雌激素一般通过ER通路提高基因的转录水平，促进细胞的增殖、死亡，而ER通路广泛存在于胃、肺等靶器官中。研究表明，NSCLC患者的生物学特征与ER水平异常紧密相关[13]。LMTK-3是一种酪氨酸激酶亚型，可促进ERa编码基因的活性通路，保护ER受体，调节ER通路[14]。LMTK-3在肺癌患者的血清和组织中高表达，是非小细胞肺癌不良预后的独立危险因素。本研究中，观察组较对照组的LMTK-3降低更加明显，表明恩度改善患者病情，提高患者的预后水平，进而改善患者的LMTK-3水平，其机制尚需进一步研究。ER通路还与IGF-1信号通路存在着互相干扰，两者共同促进NSCLC的发展。IGFBP-7是IGF的受体，是一种分泌蛋白，广泛存在于多种组织、器官中。IGFBP-7与肿瘤的联系较为复杂，其与肺癌的发生具有负相关性，可参与调节细胞增殖、肿瘤血管构建、肿瘤侵袭性。目前研究认为，IGFBP-7在恶性肿瘤中的基因表达会受到抑制[15]，进而导致VEGF介导的肿瘤血管生成相关，间接提高肿瘤的生长、转移等过程。本研究中，两组患者的IGFBP-7升高，且观察组升高更加明显，表明恩度联合化疗可提高患者的IGFBP-7，抑制了肿瘤的生长与转移过程。

综上所述，重组人内皮抑素联合化疗可有效降低NSCLC患者的血清LMTK3水平，升高血清IGFBO-7水平，患者的疗效良好，不良反应较低。

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