纺织品中碱性紫3和碱性蓝26的高效液相色谱法测定

文/陈金泉 林登光

1 引言

碱性紫3和碱性蓝26均属于三苯甲烷系碱性染料[1]，主要用在纺织、皮革、羽毛、纸张等的染色[2-4]。但是碱性蓝26和碱性紫3均存在有吸入、皮肤接触和吞咽有害，刺激眼睛，并且具有致癌可能[5]。因此2016年版国际环保纺织协会的纺织品生态标准（OEKO-Tex 100）将这两种染料列为不得使用[6-7]，限量为50 mg/kg。目前的研究主要集中在化妆品、着色剂[8]中碱性蓝26相关检测分析和玩具中碱性紫3检测分析。已报道的检测方法有高效液相色谱法[9]、液相色谱质谱联用法等[10]，其中高效液相色谱法的设备价格相对较低，操作及维护简单易学，开发的检测方法容易推广。

因此，本文采用高效液相色谱-二极管阵列检测器（HPLC-DAD）对纺织品中的碱性紫3和碱性蓝26进行分析研究，方法快速可靠。

2 试验部分

2.1 材料和试剂

碱性紫3标准品（CAS号：548-62-9），纯度为87.4%，Dr.Ehrenstorfer公司制，碱蓝26标准品（CAS号：2580-56-5），纯度为93.5%，Dr.Ehrenstorfer公司制。标准储备液的配制：分别准确称取适量的碱性紫3和碱性蓝26标准品，用甲醇配制浓度为1000mg/L的标准储备液。使用时，用甲醇配制成碱性紫3和碱性蓝26标准品，用甲醇配制浓度为1000mg/L的标准储备液。使用时，用甲醇配制成碱性紫3浓度为0.1mg/L、0.2mg/L、0.5mg/L、1.0mg/L、2.0mg/L和碱性蓝26浓度为0.5mg/L、1.0mg/L、2.0mg/L、5.0mg/L、10.0mg/L的混合标准工作溶液。甲醇为色谱纯（CNW公司），水为超纯水，乙酸铵为色谱纯。

2.2 仪器设备

1200型高效液相色谱-二极管阵列检测器（美国Agilent公司）；ZORBAX Eclipse Plus C18型色谱柱（4.6mm×250mm，膜厚5μm，美国Agilent公司），HC-C18型色谱柱（4.6mm×250mm，膜厚5μm，美国Agilent公司），ZORBAX SB-C18（4.6mm×250mm，膜厚5μm，美国Agilent公司）；KQ-500E超声波清洗仪；0.22μm聚四氟乙烯过滤膜。

2.3 试验方法

试样提取：准确称取1.0g±10mg的试样，加入10mL的甲醇提取溶剂，70℃超声波萃取60min，迅速冷却至室温，用0.22μm聚四氟乙烯过滤膜过滤后供色谱分析。

仪器分析条件：流动相为甲醇/5mmol/L的乙酸铵水溶液（85/15，V/V），色谱柱：Eclipse PlusC18型色谱柱（4.6mm×250mm，膜厚5μm）；柱箱温度为30℃；流速为1.0mL/min；检测器波长为585nm和605nm。

3 结果与分析

3.1 检测波长的选择

在200nm～800nm波段分别对碱性紫3和碱性蓝26的标准溶液进行光谱扫描，光谱图详见图1。

图1 碱性紫3和碱性蓝26的光谱图

图1表明：碱性紫3在300nm、585nm处有较强的吸收，在585nm处的吸收强度远大于300nm处的吸收强度，因此选择585nm作为碱性紫3的吸收波长；碱性蓝26的吸收波长在605nm处有最强的吸收强度，因此选择605nm作为碱性蓝26的吸收波长。

3.2 色谱柱的选择

色谱柱是液相色谱仪中影响试验的关键因素。本试验在其他条件相同的情况下，考察了ZORBAX Eclipse Plus C18型色谱柱（4.6mm×250mm，5μm）和ZORBAX SBC18（4.6mm×250mm，5μm）对目标化合物的分离效果，结果见图2。

图2 不同色谱柱的分离效果图

3.3 流动相的选择

在其他条件相同的情况下，考虑到碱性紫3和碱性蓝26都是三苯甲烷系氯化物，考察了甲醇-水和甲醇-乙酸铵体系对目标化合物分离的影响。结果发现甲醇-乙酸铵体系的目标物的峰形尖锐对称，因此选择甲醇-乙酸铵作为试验流动相。

3.4 流速的选择

对于液相色谱，过高的流速会产生高压进而容易损坏色谱柱，而且不容易分离目标物，而过低的流速又会延长分析时间，且增强纵向扩散效应，使色谱峰变宽。本试验考察了0.8mL/min、0.9mL/min、1.0mL/min、1.1mL/min和1.2mL/min这5种流速对目标化合物的分析效果的影响，结果发现碱性紫3和碱性蓝26随着流速的增加响应值逐渐减小，在流速为1.0mL/min时，碱性紫3和碱性蓝26的分离度和保留时间响应值已经达到最佳，故选择流速1.0mL/min作为液相色谱的流速。

3.5 线性关系与方法检出限

取1.1中的系列标准工作溶液进行分析，以质量浓度x（mg/L）对峰面积y进行线性回归分析，碱性紫3和碱性蓝26的线性回归方程及相关系数见表1。

结果表明，碱性紫3和碱性蓝26在各自浓度范围内质量浓度与峰面积呈良好的线性关系，以3倍的空白相对偏差与斜率的比值确定方法检出限：碱性紫3为0.5mg/kg，碱性蓝26为2.0mg/kg；以10倍的空白相对偏差与斜率的比值确定方法的定量限：碱性紫3为2.0mg/kg，碱性蓝26为5.0mg/kg。

3.6 回收率试验

为了考察样品处理方法的可靠性，选取4种阴性纺织面料相应加入3个水平的碱性紫3和碱性蓝26标准溶液按本试验方法条件进行试验，每个添加水平进行6次平行试验，计算回收率和精密度。结果见表2所示，回收率为89.4%～103.8%，相对标准偏差为1.4%～7.9%，满足日常检测要求。

表1 碱性紫3和碱性蓝26的回归方程及相关系数

表2 试验方法的回收率和精密度

4 结论

采用液相色谱法对碱性紫3和碱性蓝26进行分析研究的方法。选用甲醇为溶剂，超声波提取纺织品中碱性紫3和碱性蓝26，选择Eclipse Plus C18色谱柱进行分离，以甲醇/乙酸铵水溶液（85/15，V/V）作为流动相，流速为1.0mL/min，在585 nm和605 nm的波长下进行检测，该方法检出限低，准确度和精密度均较高，能够满足纺织品中碱性紫3和碱性蓝26的检测要求。

[1]王修林,周伯劲.结晶紫及其在分析化学中的应用[J].分析试验室,1984(6)：45-47;48.

[2]刘洪斌,杨淑慧,倪永浩.制浆造纸工业中的染料[J].染料与染色,2008(2)：10-12;62.

[3]A Lazarov,M Cordoba. Purpuric contact dermatitis in patients with allergic reaction to textile dyes and resins[J].Journal of the European Academy of Dermatology and Venereology. 2000,14(2)：101-105.

[4]孙朝晖.1996年国际市场新染料[J].染料工业,1997(3)：12-15.

[5]罗忻,修晓丽,牛增元.纺织品中致癌致敏染料检测的研究进展及存在问题[J].纺织学报,2013,34(7)：154-164.

[6]2016版OEKO-TEX～® Standard 100新标准发布 [J].纺织导报,2016(2)：13.

[7]郑凯,丁友超,周佳,等.2016版OEKO-TEX～® Standard 100修订内容及应对措施[J].纺织导报,2016(7)：94-97.

[8]毛希琴,李春玲,任国杰,等.高效液相色谱法同时检测化妆品中38种限用着色剂[J].色谱, 2015(3)：282-290.

[9]顾正健,黄雅佩,沈阳,等.高效液相色谱法同时测定冷饮中禁限用色素胭脂虫红酸、喹啉黄和碱性蓝26[J].化学试剂,2014,36(4)：325-328,342.

[10]马强,白桦,王超,等.超高效液相色谱串联质谱法同时测定玩具中的16种致癌和致敏染料[J].分析化学,2010,38(1)：51-56.