莱菔子化学成分的分离与鉴定

金洪光，李玉全，凌 云，张丽芳，任 锦，方 亮，江慎华*

（九江学院药学与生命科学学院，江西 九江 332000）

莱菔子（Raphanus sativus L.）为十字花科植物萝卜的干燥成熟种子，主产于我国的河北、河南、浙江、湖北、四川等省。莱菔子归肺、脾、胃经，性平，味辛、甘。具有消食除胀，降气化痰的功效，用于饮食停滞，脘腹胀痛，大便秘结，积滞泻痢，痰壅喘咳[1]。莱菔子属于药食两用中药，在我国已有1 400多年药用历史。中医认为莱菔子具有“生升熟降”的药性特点，即生品能升能散，长于涌吐风痰；炒熟后性转沉降，长于消食除胀、降气化痰[2-3]。现代药学研究表明，莱菔子含有多种化学成分，其中，天然硫苷是其主要的特征性化学成分，此外还含有挥发油类、脂肪酸类、生物碱类、黄酮类、多糖和蛋白类等[4-6]。近几年，有关莱菔子中芥子碱硫氰酸盐的降压作用和莱菔子素的抗癌作用成为研究热点，还有些学者提出莱菔子中的多糖类成分可开发成保健食品等[7-9]。莱菔子药理作用广泛，如抗病原微生物作用、降压作用、抗癌作用、祛痰镇咳作用、抗氧化活性等[10-11]。本实验以未经炮制的干燥生品莱菔子为研究对象，综合运用多种分离分析技术和方法，从莱菔子的甲醇提取物中分离鉴定了16 种化合物。其中，正己烷萃取部分得到4 个甾体类化合物，而在正丁醇萃取部分分离得到多个芥子酰蔗糖类化合物和黄酮类化合物。本研究为全面认识生品莱菔子的物质基础提供了理论依据。

1 材料与方法

1.1 材料与试剂

莱菔子购于安徽亳州药材市场，经九江学院方亮副教授鉴定为莱菔子（Raphanus sativus L.）的干燥成熟种子，现保存于九江学院药学与生命科学学院。

薄层色谱用硅胶GF254正相硅胶板、RP-18反相硅胶板、LiChroprep RP-18（240 mm×10 mm2）低压色谱柱德国Merck公司；柱色谱用硅胶（100～200 目和200～300 目） 青岛海洋化工厂；聚苯乙烯型大孔吸附树脂MCI gel CHP20P、大孔吸附树脂HP-20 日本三菱化学公司；所有分离用试剂均为国产分析纯。

1.2 仪器与设备

307N0043型熔点测定仪 美国Fisher Scientific公司；Unity Inova 500型及Unity Inova 600型核磁共振仪 美国Varian公司；JMS 700型质谱仪 日本JEOL公司；IMS 85型红外光谱仪 德国Bruker公司。

1.3 方法

1.3.1 提取和分离

取莱菔子8.1 kg，以甲醇回流提取3 h，重复3 次，合并提取液，减压浓缩，干燥得粗提取物400.5 g。取甲醇粗提取物溶于蒸馏水1 L，置于3 L分液漏斗中，加入正己烷1 L萃取，共3 次，合并萃取液，减压浓缩，干燥得正己烷萃取物82.2 g。采用相同方法，依次用二氯甲烷、乙酸乙酯、正丁醇萃取，分别得到提取物5.6、4.5 g和30.4 g，水层为180.3 g。

取正己烷萃取物28.2 g，过正相硅胶柱色谱，洗脱剂以100%正己烷开始，采用混合溶剂依次梯度增加极性洗脱，得到H-1～H-11共11 个组分。其中，H-2经硅胶柱色谱，以正己烷-乙酸乙酯溶液（30∶1～5∶1，V/V）洗脱，得到化合物1（2 850 mg）。H-4分别经硅胶柱色谱，以正己烷-乙酸乙酯溶液（20∶1～1∶1，V/V）分离及MCI gel柱色谱，以丙酮-水（5∶1，V/V）分离，得到化合物2（8.3 mg）、3（9.5 mg）和4（89.2 mg）。H-6经MCI gel柱色谱，以丙酮-水（1∶2～3∶1，V/V）分离，得到化合物5（11.0 mg）和6（42.3 mg）。H-7经硅胶柱色谱氯仿-甲醇溶液（12∶1，V/V）分离，得到化合物7（64.0 mg）。

取正丁醇萃取部分22.2 g，经大孔吸附树脂HP-20柱色谱，依次用蒸馏水及20%、40%、60%、80%和100%甲醇溶液梯度洗脱，得到B-1～B-6共6 个组分。B-3组分经MCI gel柱色谱，依次用25%、30%、35%和45%甲醇溶液梯度洗脱，得到B-3-1～B-3-5共5 个组分。其中，B-3-3经硅胶柱色谱，以氯仿-甲醇溶液（5∶1～2∶1，V/V）及LiChroprep RP-18柱色谱，以甲醇-水（1∶2～1∶4，V/V）分离得到化合物8（5.2 mg）、9（42.5 mg）、10（38.8 mg）和11（6.5 mg）；B-4经硅胶柱色谱，以氯仿-甲醇-水（7∶1∶0.2～3∶1∶0.1，V/V）及LiChroprep RP-18柱色谱，以甲醇-水（1∶4～1∶1，V/V）分离得到化合物12（376.4 mg）、13（11.4 mg）和14（33.5 mg）；B-5经硅胶柱色谱，以氯仿-甲醇溶液（10∶1～3∶1，V/V）分离得到化合物15（20.8 mg）和16（7.6 mg）。

2 结果与分析

2.1 化合物结构解析

化合物1：白色固体（甲醇）。熔点33.8 ℃，电喷雾离子源-质谱（electrospray ionization-mass spectrometry，ESI-MS）m/z 339 [M+H]+。1H-NMR（500 MHz，CDCl3）δ 5.35（2H，t，J=5.0 Hz，H-13，14），2.35（2H，t，J=7.5 Hz，H-2），2.02（4H，dd，J=5.0，7.5 Hz，H-12，15），1.63（2H，m，H-3），1.32（2H，m，H-21），1.29（2H，m，H-20），1.25～1.28（24H，m，H-4～11，16～19），0.88（3H，J=7.5 Hz，H-22）。13C-NMR（125 MHz，CDCl3）δ 180.1（C-1），129.9（C-13），129.9（C-14），34.0（C-2），31.9（C-20），29.1～29.8（C-4～11，16～19），27.2（C-12），27.2（C-15），24.6（C-3），22.7（C-21），14.1（C-22）。以上数据与文献[12]报道基本一致，由此确定化合物1为顺-13-二十二碳烯酸。

化合物2：白色粉末（氯仿）。熔点89～90 ℃；红外光谱（KBr）：1 660、1 620 cm-1；电子电离源-质谱（electron ionization-MS，EI-MS）m/z 412（M+，C29H48O：412）。1H-NMR（500 MHz，CDCl3）δ 5.72（1H，s，H-4），1.18（3H，s，19-CH3），0.92（3H，d，J=6.5 Hz，21-CH3），0.85（3H，t，J=7.0 Hz，29-CH3），0.83（3H，d，J=6.5 Hz，26-CH3），0.81（3H，d，J=6.5 Hz，27-CH3），0.71（3H，s，18-CH3）。13C-NMR（125 MHz，CDCl3）δ 199.7（C-3），171.8（C-5），123.7（C-4），56.0（C-17），55.8（C-14），53.8（C-9），45.8（C-24），42.4（C-13），39.6（C-12），38.6（C-10），36.1（C-20），35.7（C-1），35.6（C-8），34.0（C-2），33.8（C-22），32.9（C-16），32.0（C-6），29.0（C-7），28.2（C-25），26.0（C-23），24.2（C-15），23.0（C-28），21.0（C-11），19.8（C-26），19.0（C-27），18.7（C-21），17.4（C-19），11.9（C-29），11.8（C-18）。以上数据与文献[13]报道基本一致，由此确定化合物2为豆甾-4-烯-3-酮。

化合物3：白色粉末（甲醇）。熔点160～161 ℃；EIMS m/z 398（M+，C28H46O：398）。1H-NMR（500 MHz，CDCl3）δ 5.35（1H，d，J=5.0 Hz，H-6），5.21（1H，dd，J=5.0，15.0 Hz，H-23），5.16（1H，dd，J=7.0，15.0 Hz，H-22），3.53（1H，tt，J=5.0，12.0 Hz，H-3），2.23～2.30（2H，m，H-4），1.02（3H，d，J=6.0 Hz，21-CH3），1.01（3H，s，19-CH3），0.91（3H，d，J=7.0 Hz，28-CH3），0.83（3H，d，J=7.0 Hz，26-CH3），0.82（3H，d，J=7.0 Hz，27-CH3），0.69（3H，s，18-CH3）。13C-NMR（125 MHz，CDCl3）δ 140.8（C-5），135.8（C-22），131.7（C-23），121.7（C-6），71.7（C-3），56.8（C-14），56.0（C-17），50.1（C-9），42.8（C-24），42.3（C-13），42.2（C-4），40.2（C-20），39.7（C-12），37.2（C-1），36.4（C-10），33.1（C-25），31.9（C-8），31.9（C-7），31.6（C-2），28.5（C-16），24.3（C-15），21.1（C-11），21.0（C-21），19.9（C-26），19.6（C-27），19.4（C-19），17.8（C-28），12.1（C-18）。以上数据与文献[14]报道基本一致，由此确定化合物3为（22E,24R）-麦角甾-5,22-二烯-3β-醇。

化合物4：白色结晶（氯仿）。熔点138～140 ℃；EI-MS m/z 414 [M]+。1H-NMR（500 MHz，CDCl3）δ 5.35（1H，d，J=5.0 Hz，H-6），3.52（1H，m，H-3），1.01（3H，s，19-CH3），0.92（3H，d，J=6.5 Hz，21-CH3），0.85（3H，t，J=7.0 Hz，29-CH3），0.83（3H，d，J=6.5 Hz，26-CH3），0.81（3H，d，J=6.5 Hz，27-CH3），0.68（3H，s，18-CH3）。以上数据与文献[15]报道的一致，与β-谷甾醇标准品共薄层色谱，两者Rf值相同，且混合熔点不下降，由此确定化合物4为豆甾-5-烯-3β-醇。

化合物5：白色固体（甲醇）。熔点66～68 ℃；红外光谱（KBr）：3 399、2 947、1 718 cm-1。EIMS m/z 209 [M+H]+。1H-NMR（500 MHz，CD3OD）δ 7.62（1H，d，J=16.0 Hz，H-7），7.18（1H，d，J=2.0 Hz，H-2），7.07（1H，dd，J=2.0，8.0 Hz，H-6），6.80（1H，d，J=8.0 Hz，H-5），6.36（1H，d，J=16.0 Hz，H-8），3.89（3H，s，9-OCH3），3.76（3H，s，3-OCH3）。13C-NMR（125 MHz，CD3OD）δ 169.9（C-9），150.8（C-4），149.5（C-3），147.0（C-7），127.8（C-1），124.2（C-6），116.6（C-5），115.3（C-8），111.8（C-2），56.6（C-3-OCH3），52.2（C-9-OCH3）。以上数据与文献[16]报道基本一致，由此确定化合物5为反-阿魏酸甲酯。其中，下划线表示相应数据是相对应的原子信息。

化合物6：淡黄色晶体（甲醇）。熔点88 ℃；红外光谱（KBr）：3 340、2 920、1 665、1 298、968 cm-1。EI-MS m/z 239 [M+H]+。1H-NMR（500 MHz，CD3OD）δ 7.58（1H，d，J=16.0 Hz，H-7），6.88（2H，s，H-2，6），6.37（1H，d，J=16.0 Hz，H-8），3.86（6H，s，3，5-OCH3），3.76（3H，s，9-OCH3）。13C-NMR（125 MHz，CD3OD）δ 169.8（C-9），149.6（C-3，5），147.2（C-7），139.8（C-4），126.7（C-1），115.7（C-8），107.0（C-2，6），57.0（C-3，5-OCH3），52.2（C-9-OCH3）。以上数据与文献[17]报道的一致，由此确定化合物6为反-芥子酸甲酯。

化合物7：白色晶体（甲醇）。熔点290～292 ℃；红外光谱（KBr）：3 420、2 939、1 664、1 450 cm-1。EI-MS m/z 414（[M-C6H10O5]-，C35H60O6：576）。1H-NMR（600 MHz，DMSO-D6）δ 5.32（1H，d，J=4.8 Hz，H-6），4.21（1H，d，J=7.8 Hz，H-1’），3.64（1H，dd，J=6.0，9.6 Hz，Ha-6’），3.45（1H，dd，J=4.2，11.4 Hz，H-3’），3.40（1H，m，Hb-6’），3.05（1H，m，H-3），2.88～3.11（3H，m，H-2’，4’，5’），0.95（3H，s，19-CH3），0.90（3H，d，J=6.6 Hz，21-CH3），0.82（3H，t，J=7.2 Hz，29-CH3），0.81（3H，d，J=7.2 Hz，26-CH3），0.80（3H，d，J=7.2 Hz，27-CH3），0.64（3H，s，18-CH3）。13C-NMR（150 MHz，DMSO-D6）δ 140.4（C-5），121.3（C-6），100.8（C-1’），76.8（C-3），76.8（C-3’），76.8（C-5’），73.5（C-2’），70.1（C-4’），61.1（C-6’），56.2（C-14），55.4（C-17），49.6（C-9），45.1（C-24），41.9（C-13），40.0（C-4），38.3（C-12），36.9（C-1），36.3（C-10），35.5（C-20），33.4（C-22），31.4（C-7），31.4（C-8），29.3（C-2），28.7（C-25），27.9（C-16），25.4（C-23），23.9（C-15），22.6（C-28），20.6（C-11），19.8（C-27），19.2（C-19），19.0（C-26），18.6（C-21），11.8（C-29），11.7（C-18）。以上数据与文献[18]报道基本一致，由此确定化合物7为β-豆甾醇-3-O-β-D-葡萄糖苷。

化合物8：白色固体（甲醇）。熔点118～119 ℃；快惰性原子轰炸-质谱（fast atom bombardment-MS，FAB-MS）m/z 505 [M+H]+。1H-NMR（500 MHz，CD3OD）δ 5.40（1H，d，J=4.0 Hz，H-1’），4.88（1H，d，J=3.5 Hz，H-1’’），4.10（2H，dd，J=5.0，8.5 Hz，H-3，4），4.05（1H，m，H-5’），3.89（1H，d，J=5.0 Hz，H-4’’），3.85（1H，t，J=6.5 Hz，H-5’’），3.75～3.78（5H，m，H-5，6，2’’，3’’），3.70（3H，m，H-3’，6’’），3.61（2H，d，J=4.0 Hz，H-1），3.43（1H，dd，J=4.0，10.0 Hz，H-2’），3.30（1H，m，H-4’）。13C-NMR（125 MHz，CD3OD）δ 105.4（C-2），100.7（C-1’’），93.6（C-1’），83.6（C-5），79.3（C-3），75.4（C-4），74.6（C-3’），73.5（C-5’），73.2（C-2’），72.6（C-5’’），72.2（C-4’），71.6（C-3’’），71.2（C-4’’），70.6（C-2’’），68.4（C-6’），64.4（C-1），63.3（C-6），62.9（C-6’’）。以上数据与文献[19]报道基本一致，由此确定化合物8为α-D-吡喃半乳糖基-（1-6）-α-D-吡喃葡萄糖基-（1-2）-β-D-呋喃果糖苷。

化合物9：无定形粉末。红外光谱（KBr）：3 408、1 700、1 632、1 608 cm-1。FAB-MS m/z 571 [M+Na]+，547 [M-H]-。1H-NMR（500 MHz，CD3OD）δ 7.63（1H，d，J=16.0 Hz，H-7’’），6.95（2H，s，H-2’’，6’’），6.46（1H，d，J=16.0 Hz，H-8’’），5.42（1H，d，J=3.5 Hz，H-1’），4.51（1H，dd，J=1.5，12.0 Hz，Ha-6’），4.25（1H，dd，J=6.5，12.0 Hz，Hb-6’），4.14（1H，m，H-5’），4.08（1H，d，J=8.0 Hz，H-3），4.06（1H，dd，J=8.0，8.0 Hz，H-4），3.87（6H，s，3’’，5’’-OCH3），3.76-3.81（3H，m，H-5，6），3.74（1H，dd，J=9.5，10.0 Hz，H-3’），3.61（1H，d，J=12.5 Hz，Ha-1），3.62（1H，d，J=12.5 Hz，Hb-1），3.46（1H，dd，J=4.0，9.5 Hz，H-2’），3.33（1H，dd，J=9.0，9.5 Hz，H-4’）。13C-NMR（125 MHz，CD3OD）δ 169.2（C-9’’），149.6（C-3’’，5’’），147.4（C-7’’），139.9（C-4’’），126.6（C-1’’），115.8（C-8’’），107.1（C-2’’，6’’），105.3（C-2），93.3（C-1’），84.0（C-5），79.3（C-3），76.2（C-4），74.8（C-3’），73.3（C-2’），72.2（C-5’），72.0（C-4’），65.3（C-1），64.4（C-6’），64.4（C-6），57.0（C-3’’，5’’-OCH3）。以上数据与文献[20]报道基本一致，由此确定化合物9为β-D-呋喃果糖基-α-D-（6-芥子酰基）葡萄糖苷。

化合物10：无定形粉末。红外光谱（KBr）：3 408、1 700、1 632、1 608 cm-1。FAB-MS m/z 571[M+Na]+，548[M+]。1H-NMR（500 MHz，CD3OD）δ 7.71（1H，d，J=16.0 Hz，H-7’’），6.97（2H，s，H-2’’，6’’），6.46（1H，d，J=16.0 Hz，H-8’’），5.47（1H，d，J=7.5 Hz，H-3），5.44（1H，d，J=3.5 Hz，H-1’），4.38（1H，t，J=8.0 Hz，H-4），3.92～3.96（2H，m，H-5，5’），3.89（6H，s，3’’，5’’-OCH3），3.76-3.87（4H，m，H-6，6’），3.67（1H，dd，J=9.5，10.0 Hz，H-3’），3.66（1H，d，J=12.0 Hz，Ha-1），3.58（1H，d，J=12.0 Hz，Hb-1），3.44（1H，dd，J=4.0，9.5 Hz，H-2’），3.40（1H，dd，J=9.0，9.5 Hz，H-4’）。13C-NMR（125 MHz，CD3OD）δ 168.3（C-9’’），149.6（C-3’’，5’’），148.0（C-7’’），139.8（C-4’’），126.7（C-1’’），115.7（C-8’’），107.2（C-2’’，6’’），104.9（C-2），93.4（C-1’），84.3（C-5），79.8（C-3），76.1（C-3’），74.7（C-4），74.0（C-5’），73.3（C-2’），71.3（C-4’），65.5（C-1），63.1（C-6），62.5（C-6），57.1（C-3’’-OCH3），57.0（C-5’’-OCH3）。以上数据与文献[20]报道基本一致，由此确定化合物10为β-D-（3-芥子酰基）呋喃果糖基-α-D-葡萄糖苷。

化合物11：淡黄色无定形粉末。红外光谱（KBr）：3 396、1 704、1 632、1 606 cm-1；FAB-MS m/z：777[M+Na]+。1H-NMR（600 MHz，CD3OD）δ 7.67（1H，d，J=15.6 Hz，H-7’’），7.59（1H，d，J=15.6 Hz，H-7’’’），6.93（2H，s，H-2’’，6’’），6.88（2H，s，H-2’’’，6’’’），6.47（1H，d，J=15.6 Hz，H-8’’），6.46（1H，d，J=15.6 Hz，H-8’’’），5.53（1H，d，J=3.6 Hz，H-1’），5.51（1H，d，J=7.8 Hz，H-3），4.68（1H，dd，J=1.8，12.0 Hz，Ha-6’），4.51（1H，t，J=7.8 Hz，H-4），4.29（1H，ddd，J=1.8，7.2，9.6 Hz，H-5’），4.20（1H，dd，J=7.2，12.0 Hz，Hb-6’），3.97（1H，ddd，J=3.0，6.6，7.8 Hz，H-5），3.90（1H，dd，J=7.2，12.0 Hz，Hb-6），3.87（6H，s，3’’，5’’-OCH3），3.84（6H，s，3’’’，5’’’-OCH3），3.82（1H，dd，J=1.8，12.0 Hz，Ha-6），3.67（1H，dd，J=9.0，9.6 Hz，H-3’），3.61（1H，d，J=12.6 Hz，Ha-1），3.59（1H，d，J=12.6 Hz，Hb-1），3.48（1H，dd，J=3.6，9.6 Hz，H-2’）。13C-NMR（150 MHz，CD3OD）δ 169.2（C-9’’’），168.6（C-9’’），149.6（C-3’’，5’’），149.5（C-3’’’，5’’’），148.0（C-7’’），147.4（C-7’’’），139.8（C-4’’），139.6（C-4’’’），126.7（C-1’’），126.6（C-1’’’），115.9（C-8’’），115.6（C-8’’），107.2（C-2’’，6’’），107.0（C-2’’’，6’’’），104.9（C-2），92.8（C-1’），84.5（C-5），79.4（C-3），75.2（C-3’），74.3（C-4），73.3（C-2’），72.6（C-5’），72.1（C-4’），65.8（C-1），65.8（C-6’），64.0（C-6），57.0（C-3’’，5’’-OCH3），56.9 （C-3’’’，5’’’-OCH3）。以上数据与文献[21]报道基本一致，由此确定化合物11为β-D-（3-芥子酰基）呋喃果糖基-α-D-（6-芥子酰基）葡萄糖苷。

化合物12：黄色无定形粉末。红外光谱（KBr）：3 400、1 704、1 640、1 600 cm-1。FAB-MS m/z 983[M+Na]+。1H-NMR（500 MHz，CD3OD）δ 7.71（1H，d，J=15.5 Hz，H-7’’），7.56（1H，d，J=15.5 Hz，H-7’’’’），7.46（1H，d，J=15.5 Hz，H-7’’’），6.91（2H，s，H-2’’，6’’），6.81（2H，s，H-2’’’’，6’’’’），6.76（2H，s，H-2’’’，6’’’），6.48（1H，d，J=15.5 Hz，H-8’’’’），6.46（1H，d，J=15.5 Hz，H-8’’），6.26（1H，d，J=15.5 Hz，H-8’’’），5.85（1H，d，J=8.0 Hz，H-3），5.71（1H，t，J=8.0 Hz，H-4），5.57（1H，d，J=3.5 Hz，H-1’），4.75（1H，dd，J=1.5，12.0 Hz，Ha-6’），4.38（1H，ddd，J=1.5，6.0，9.5 Hz，H-5’），4.21（1H，dd，J=6.0，12.0 Hz，Hb-6’），4.20（1H，m，H-5），3.99（1H，dd，J=7.0，12.5 Hz，Hb-6），3.94（1H，dd，J=4.5，12.5 Hz，Ha-6），3.84（12H，s，3’’，5’’，3’’’’，5’’’’-OCH3），3.78（6H，s，3’’’，5’’’-OCH3），3.71（1H，m，H-3’），3.65 （2H，d，J=3.5 Hz，H-1），3.51（1H，dd，J=4.0，10.0 Hz，H-2’），3.30（1H，m，H-4’）。13C-NMR（125 MHz，CD3OD）δ 169.4（C-9’’’’），168.2（C-9’’’），167.9（C-9’’），149.5（C-3’’’，5’’’），149.5（C-3’’，5’’），149.4（C-3’’’’，5’’’’），148.5（C-7’’），148.4（C-7’’’），147.2（C-7’’’’），139.9（C-4’’），139.8 （C-4’’’），139.6 （C-4’’’’），126.7 （C-1’’’’），126.6（C-1’’），126.5 （C-1’’’），116.2 （C-8’’’’），115.3（C-8’’），114.8（C-8’’’），107.2（C-2’’’’，6’’’’），107.2（C-2’’，6’’），107.0（C-2’’’，6’’’），105.5（C-2），93.0（C-1’），83.0（C-5），77.1（C-3），76.6（C-4），75.1（C-3’），73.2（C-2’），73.0（C-5’），72.3（C-4’），66.1（C-6’），65.2（C-1），64.2（C-6），57.0（C-3’’，5’’，3’’’’，5’’’’-OCH3），56.9（C-3’’’，5’’’-OCH3）。以上数据与文献[22]报道基本一致，由此确定化合物12为β-D-（3,4-二芥子酰基）呋喃果糖基-α-D-（6-芥子酰基）葡萄糖苷。

化合物13：淡黄色无定形粉末。ESI-MS m/z 477[M-H]-。1H-NMR（500 MHz，DMSO-D6）δ 7.93（1H，d，J=2.0 Hz，H-2’），7.46（1H，dd，J=2.0，8.5 Hz，H-6’），6.89（1H，d，J=8.5 Hz，H-5’），6.29（1H，d，J=1.5 Hz，H-8），6.08（1H，d，J=1.5 Hz，H-6），5.54（1H，d，J=7.5 Hz，H-1’’），3.83（3H，s，3’-OCH3），3.58（1H，dd，J=2.5，12.0 Hz，H-6’’），3.38（1H，dd，J=5.0，12.0 Hz，H-6’’），3.21～3.23（2H，m，H-2’’，3’’），3.10～3.12（2H，m，H-4’’，5’’）。13C-NMR（125 MHz，DMSO-D6）δ 176.7（C-4），161.1（C-5，7），156.7（C-8a），155.6 （C-2），149.4（C-4’），146.8（C-3’），132.7（C-3），121.8（C-6’），121.1（C-1’），115.2（C-5’），113.4（C-2’），102.8（C-4a），100.9（C-1’’），99.5（C-6），94.0（C-8），77.4（C-5’’），76.4（C-3’’），74.3（C-2’’），69.8（C-4’’），60.5（C-6’’），55.6（C-3’-OCH3）。以上数据与文献[23]报道基本一致，由此确定化合物13为异鼠李素-3-O-β-D-葡萄糖苷。

化合物14：淡黄色无定形粉末。ESI-MS m/z 639[M-H]-。1H-NMR（500 MHz，DMSO-D6）δ 7.96（1H，d，J=2.0 Hz，H-2’），7.53（1H，dd，J=2.0，8.5 Hz，H-6’），7.23（1H，d，J=8.5 Hz，H-5’），6.44（1H，d，J=1.5 Hz，H-8），6.21（1H，d，J=1.5 Hz，H-6），5.58（1H，d，J=7.5 Hz，H-1’’），5.06（1H，d，J=7.5 Hz，H-1’’’），3.84（3H，s，3’-OCH3），3.68（1H，dd，J=1.5，12.0 Hz，H-6’’），3.58（1H，dd，J=2.0，12.0 Hz，H-6’’’），3.46（1H，dd，J=5.0，12.0 Hz，H-6’’），3.39（1H，dd，J=5.5，12.0 Hz，H-6’’’），3.36（1H，t，J=9.5 Hz，H-5’’’），3.29～3.30（2H，m，H-2’’’，3’’’），3.18～3.24（3H，m，H-2’’，3’’，4’’’），3.10～3.12（2H，m，H-4’’，5’’）。13C-NMR（125 MHz，DMSO-D6）δ 177.4（C-4），164.8（C-7），161.2（C-5），156.5（C-8a），155.6（C-2），148.4（C-4’），148.0（C-3’），133.4（C-3），123.7（C-1’），121.4（C-6’），114.5（C-5’），113.5（C-2’），103.9（C-4a），100.7（C-1’’），99.5（C-1’’’），98.9（C-6），93.8（C-8），77.5（C-5’’），77.1（C-5’’’），76.8（C-3’’’），76.4（C-3’’），74.3（C-2’’），73.1（C-2’’’），69.8（C-4’’），69.5（C-4’’’），60.6（C-6’’），60.5（C-6’’’），55.6（C-3’-OCH3）。以上数据与文献[24]报道基本一致，由此确定化合物14为异鼠李素-3,4’-O-β-D-二葡萄糖苷。

化合物15：淡黄色粉末。熔点209～212 ℃；ESIMS m/z 623[M-H]-。1H-NMR（500 MHz，CD3OD）δ 7.93（1H，d，J=2.0 Hz，H-2’），7.62（1H，dd，J=2.0，8.5 Hz，H-6’），6.88（1H，d，J=8.5 Hz，H-5’），6.75（1H，d，J=2.0 Hz，H-8），6.45（1H，d，J=2.0 Hz，H-6），5.57（1H，s，H-1’’’），5.45（1H，d，J=7.5 Hz，H-1’’），4.02（1H，m，H-2’’’），3.94（3H，s，3’-OCH3），3.83 （1H，dd，J=3.5，10.0 Hz，H-5’’’），3.74（1H，dd，J=2.5，12.0 Hz，H-6’’），3.57（1H，dd，J=5.0，12.0 Hz，H-6’’），3.56（1H，m，H-3’’’），3.43～3.49（4H，m，H-2’’，3’’，4’’，4’’’），3.25（1H，m，H-5’’），1.25（3H，d，J=6.0 Hz，H-6’’’）。13C-NMR（125 MHz，CD3OD）δ 179.6（C-4），163.6（C-7），163.0（C-5），159.5（C-2），158.1（C-8a），152.6（C-4’），148.9（C-3’），135.5（C-3），124.3（C-5’），122.2（C-1’），116.5（C-6’），114.4（C-2’），107.6（C-4a），103.5（C-1’’），100.7（C-6），99.9（C-1’’’），95.6（C-8），78.7（C-5’’），78.2（C-3’’），76.1（C-2’’），73.7（C-4’’’），72.2（C-5’’’），71.8（C-2’’’），71.6（C-4’’），71.4（C-3’’’），62.6（C-6’’），56.8（C-3’-OCH3），18.2（C-6’’’）。以上数据与文献[24-25]报道基本一致，由此确定化合物15为异鼠李素-3-O-β-D-葡萄糖-7-O-α-L-鼠李糖苷。

化合物16：白色粉末。红外光谱（KBr）：3 400、1 704、1 632、1 600 cm-1。ESI-MS m/z 465 [MH]-。1H-NMR（500 MHz，CD3OD）δ 7.14（1H，d，J=2.0 Hz，H-2’），6.90（1H，dd，J=2.0，8.0 Hz，H-6’），6.79（1H，d，J=8.0 Hz，H-5’），6.10（1H，d，J=2.0 Hz，H-8），6.02（1H，d，J=2.0 Hz，H-6），4.89（1H，s，H-2），4.82（1H，d，J=7.5 Hz，H-1’’），4.21（1H，m，H-3），3.87（3H，s，3’-OCH3），3.89（1H，dd，J=2.0，12.0 Hz，H-6’’），3.70（1H，dd，J=5.0，12.0 Hz，H-6’’），3.38～3.46（4H，m，H-2’’，3’’，4’’，5’’），2.91（1H，dd，J=4.5，17.0 Hz，H-4），2.78（1H，dd，J=2.5，17.0 Hz，H-4）。13C-NMR（125 MHz，CD3OD）δ 158.7（C-7），158.1（C-5），157.4（C-8a），148.8（C-3’），147.2（C-4’），132.3（C-1’），120.8（C-6’），115.8（C-5’），112.0（C-2’），103.0（C-4a），102.5（C-1’’），97.8（C-8），97.5（C-6），80.3（C-2），78.2（C-3’’），78.1（C-5’’），75.0（C-2’’），71.5（C-4’’），67.6（C-3），62.6（C-6’’），56.5（C-3’-OCH3），29.7（C-4）。以上数据与文献[26-27]报道基本一致，由此确定化合物16为3’-O-甲基-（-）-表儿茶素-7-O-β-D-葡萄糖苷。

3 讨 论

本实验对生品莱菔子进行了化学成分研究，共分离得到16 个单体化合物其中10 个为首次在该植物中得到。从分离化合物类型来看，莱菔子正己烷萃取物主要是以脂肪酸及甾体类化合物为主，而正丁醇萃取物部分以芥子酰蔗糖和黄酮类化合物为主。

莱菔子油中大量的不饱和脂肪酸具有防癌抗癌、抗心脑血管疾病、增强机体免疫力等广泛而显著的药理作用；正丁醇提取物具有降低自发高血压大鼠的血压等药理活性[28-29]。由于黄酮类化合物具有抗过敏、降血压、抗炎、抗肿瘤、抗病毒等多种生物活性[30]，提示黄酮类化合物和芥子酰蔗糖酯可能是生品莱菔子主要有效成分，进一步的药理活性测试有待于下一阶段继续研究。

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