福建规模化猪场O/A型猪口蹄疫病毒免疫抗体的检测与分析

黄思琼 ，肖志豪 ，上官林梅 ，林日丹 ,，戴爱玲 ,★

（1.福建省生猪疫病防控工程技术研究中心 364012；2.龙岩学院 生命科学学院 364012）

猪口蹄疫是一种急性、热性和高度接触性的传染病，发病率很高，流行面大，传播速度快，对仔猪可引起大批死亡。近年来猪口蹄疫病的频发给养猪业造成严重的经济损失，我国实行强制免疫的防控手段，免疫效果的好坏直接影响猪口蹄疫的防控效果，因此对口蹄疫免疫效果的监测，是口蹄疫有效防控和风险预警的重要手段。本研究采用ELISA方法，对2014年～2017年福建省规模化猪场5493份血清样品进行FMDV-O/A型免疫抗体的检测与分析，了解该地区猪群口蹄疫的免疫状况，评估免疫效果，为规模化猪场猪口蹄疫疫病的有效防控提供参考。

1 材料与方法

1.1 血清来源

血清样品采集于2014年～2017年福建省部分规模化猪场，共计采集血清5493份，其中母猪2249份、后备猪1408份、公猪255 份、保育猪（40～80 日龄）653 份、育肥猪（80 日龄以后）841份。送检猪场均有免疫含O型/A型口蹄疫病毒的灭活疫苗。

1.2 猪口蹄病毒疫抗体检测试剂盒

O型/A型猪口蹄疫病毒抗体检测试剂盒（韩国金诺），购自于北京金诺百特科技有限公司。

1.3 主要器材

Thermo多功能酶标仪、Thermo洗板机、多通道移液枪（20～200μL）等。

1.4 方法

判定标准：

S/N值=血清样品值/阴性对照平均值

S/N值≤0.60判为阳性；S/N值＞0.60判为阴性。

在免疫状态下，抗体阳性率＞95%，S/N平均值≤0.2，表示整体免疫效果好；抗体阳性率80%～90%，表示整体免疫效果一般；抗体阳性率＜70%，表示免疫效果差，应立即补免疫苗。

2 结果

2.1 O型口蹄疫病毒抗体检测结果

2014年～2017年福建省部分规模化猪场血清样品5493份，采用ELISA法检测O型猪口蹄疫病毒的免疫抗体水平。从表1可知，群体抗体阳性率为81.7%，其中母、公猪的抗体阳性率较高，分别为93.6%、92.9%，后备猪的阳性率为87.6%，保育猪、育肥猪的阳性率较低，为48.1%和66.1%。整体上母、公猪抗体阳性率高于保育、育肥猪。

表1 2014年～2017年规模化猪场O型口蹄疫病毒抗体检测结果

不同季度O型猪口蹄疫抗体统计结果见表2，从表2可知，在一年四个季度中，母猪的抗体阳性率均在90%以上，公猪的阳性率在86%以上，保育猪和育肥猪冬春季节的阳性率高于夏和秋，后备猪在秋冬的阳性率90.4%、83.3%高于春夏的阳性率78.2%、69.3%。

表2 不同季度O型猪口蹄病毒疫抗体阳性率（%）

2.2 A型口蹄疫病毒抗体检测结果

从表3可知，2014年～2017年22个免疫猪场966份血清样品A型口蹄疫病毒抗体总阳性率62.4%，其中母、公猪的抗体阳性率77.5%，商品猪抗体阳性率44.3%，2014年～2017年A型口蹄疫病毒抗体阳性率逐年上升，特别是2017年母猪和商品猪抗体阳性率高于其他年度。

表3 2014年～2017规模化猪场A型口蹄疫病毒抗体检测结果

3 结果与分析

3.1 O型口蹄疫病毒抗体结果分析

2014年～2017年检测福建省部分规模化猪场119个5493份血清O型口蹄疫病毒抗体，结果表明规模场群体抗体阳性率81.7%，其中母、公猪的O型口蹄疫病毒抗体阳性率较高，分别为93.6%、92.9%，后备猪的阳性率为87.6%，保育猪、育肥猪的阳性率较低，为48.1%和66.1%，抗体阳性率母猪＞公猪＞后备猪＞育肥猪＞保育猪，其中母猪、公猪、后备猪抗体阳性率高于国家强制免疫标准阳性率70%以上，保育、育肥猪未达到国家强制免疫标准，有一定感染风险。母猪、公猪一年四季处于较高的抗体水平，保育、育肥猪冬春季节抗体阳性率略高于夏秋两季，育肥猪冬季抗体阳性率75.7%，达到国家强制免疫标准阳性率70%以上，与口蹄疫在冬春季节流行，养殖场在秋末及冬季比较重视口蹄疫疫苗免疫有一定关系。近年全国各个地区采用ELISA法监测规模化猪场O型口蹄疫病毒抗体，如，2017年，孙哲等[1]对四川、湖南、河南等送检猪群样品检测O型口蹄疫病毒抗体，总阳性率82.2%，种猪86.3%，免疫前商品猪66.1%，免疫后商品猪84.4%；2016年，辽宁北票市抗体阳性率78.9%[2]，安徽望江县规模场抗体阳性率88.15%[3]；2015年，黄飞[4]等人检测广东省的6家规模猪场，经产母猪、公猪、后备母猪、育肥猪、保育猪的抗体阳性率分别为93.9%、100%、90.9%、86.3%、74.28%，河南省的规模猪场O型口蹄疫免疫抗体合格率85.53%[5]；2014年，鄂西北地区部分猪场抗体阳性率为77.5%[6]，无锡市商品猪的O型口蹄疫免疫抗体阳性率在70%以上[7]，天津地区O型口蹄疫免疫抗体阳性84.97%[8]。虽然近年全国各个地区检测结果基本大于国家强制免疫标准，但各地区抗体阳性率有一定差异，不同猪群的抗体消长趋势基本相似，母、公猪抗体阳性率较高，保育猪、育肥猪的抗体阳性率普遍偏低，这些地区报道与我们的检测结果一致，抗体变化规律与灭活疫苗的免疫特点有关，灭活疫苗必须经过多次免疫才能产生较高的抗体水平。

3.2 A型口蹄疫病毒抗体结果分析

2014年～2017年福建省部分规模化猪场966份血清A型口蹄疫病毒抗体检测结果表明，2017年母、公猪和商品肉猪的抗体阳性率高于2014年和2015年，特别是商品猪2016年和2017年明显高于2014年和2015年，这与规模养殖场更重视免疫含A型口蹄疫病毒的灭活疫苗有一定关系。2017年以前，国家农业部尚未批准生产A型口蹄疫疫苗，也未规定牛羊的口蹄疫疫苗可以用于猪群免疫，但2013年报道猪群出现A型口蹄疫疫情后，A型口蹄疫通报案例逐渐增多，中国农业科学院兰州兽医研究所国家口蹄疫参考实验室研究员郑海学从我国口蹄疫临床样品统计分析，也认为口蹄疫病毒具有逐渐从牛羊传到猪体上的趋势。因此，越来越多养殖场用含A型的牛羊口蹄疫价苗免疫猪群，2016年和2017年的A型口蹄疫血清学调查证实了这种普遍性，结果也表明了使用含A型牛羊三价口蹄疫疫苗的免疫效果一般。2015年，陈曦等[9]报道了安徽省12个生猪监测点种猪、商品猪A型口蹄疫分别为61.9%、19.8%，部分使用了含A型三价口蹄疫灭活疫苗的猪场抗体阳性率为53.08%，未免疫猪场抗体阳性率18.08%，也证实使用含A牛羊三价口蹄疫疫苗的免疫效果不明显。2010年～2017年国家农业部通报4例猪口蹄疫A疫情。因此，防控现状和疫情偶发应该引起养殖场和防疫部门的重视。

总之，选择质量较好的口蹄疫疫灭活疫苗、定期免疫监测、制定合理的免疫程序，加强疫苗管理与免疫方法的指导、控制好免疫抑制病，对猪口蹄疫的有效防控具有重要的意义。