海南西部地区手足口病流行病学及病原学特征分析

翟佳羽，林烈桔，麦朗君，符学兴，苏显都

手足口病（hand-foot-mouth disease, HFMD）是由多种人肠道病毒引起的一种儿童常见传染病，临床上以发热和手、足、口腔疱疹为主要特征。引起HFMD的主要病原体为柯萨奇病毒A组（Coxsackie viruses A, CA）16、4、5、7、9、10型，柯萨奇病毒B组2、5型，埃可病毒和肠道病毒，其中以CA16和肠道病毒71型（enterovirus 71, EV71）最常见[1-2]。由肠道病毒中CA16感染所引起的HFMD患者，症状较轻，病死率较低。而EV71引起的HFMD患者可出现心肌炎、脑膜炎、脑脊髓炎、肺水肿及循环障碍等并发症，并可大规模暴发流行，严重影响儿童的生命健康[3-4]。因此，及时确定HFMD的病原体并了解其流行趋势对于该病的防治显得非常重要。本研究对2012—2015年海南西部地区HFMD流行病学及病原学特征进行分析，为HFMD的防治提供理论依据，现报道如下。

1 对象与方法

1.1 对象 收集2012年1月—2015年12月海南西部地区（儋州、临高、白沙、昌江、东方）等县、市医院收治的HFMD患儿10 258例，年龄为2个月～12岁，诊断标准符合卫生部发布的《手足口病诊疗指南》（2010年版）。

1.2 方法

1.2.1 研究方法 应用流行病学分析方法，统计HFMD患儿的发病时间、地区、人群分布等基本资料和临床诊断情况。①标本采集。常规消毒后以灭菌棉棒采集急性期患儿的咽拭子，置入病毒保存液中，同时采集患儿粪便5 g，以上标本4 ℃冷藏保存。粪便标本用PBS稀释成10%的粪便悬液，充分震荡混匀，3000 r/min，离心半径为10 cm，离心30 min后，取上清液；咽拭子经旋涡震荡器充分震荡。②核酸提取及检测。取标本200 μl，采用德国Roche公司生产的全自动核酸提取仪和Roche高纯度病毒RNA试剂盒提取核酸，洗脱体积为50 μl。HFMD病原体实时荧光定量PCR（quantitative real-time PCR, qRT-PCR）检测试剂盒（包括检测EV71、CA16、其它肠道病毒）为广州中山大学达安基因股份有限公司产品。按照说明书在美国ABI公司生产的7500 qRT-PCR仪上进行检测，阴性标本再采用肠道病毒通用型qRTPCR试剂进行检测。③结果判断。按照说明书，Ct值＜35判为阳性。检测标本所有引物阴性为非肠道病毒感染；肠道病毒阳性、EV71阴性、CA16阴性为非EV71、CA16的其他肠道病毒感染；肠道病毒阳性、EV71阳性、CA16阴性为EV71感染；肠道病毒阳性、EV71阴性、CA16阳性为CA16感染。

1.2.2 统计学处理 应用SPSS 17.0统计软件进行分析。计数资料以百分率（%）表示，组间比较采用χ2检验。以P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结 果

2.1 2012 —2015年海南西部地区HFMD疫情概况 累计报告HFMD患儿10 258例，年发病率为121.34/10万，发病人数呈增长趋势。男性发病人数多于女性（性别比为1.57∶1），病例以散居儿童为主，占报告总病例数的65.06%。重症患儿62例，占报告总病例数的0.60%；死亡患儿19例，占报告总病例数的0.19%，重症及死亡病例构成比也呈上升趋势。见表1。

2.2 HFMD患儿年龄构成 HFMD患儿最小年龄为2个月，最大年龄为12岁。发病年龄主要集中在＜5岁儿童，共9138例，占报告总病例数的89.08%；其中1～3岁年龄组发病数最高，共7110例，占报告总病例数的69.31%。见表2。

2.3 HFMD患儿发病时间分布 HFMD患儿一年四季均有发病，但有明显的季节性，3月开始发病数上升，高峰出现在5—8月，呈单峰分布，9月后疫情开始下降，12月后降到最低。见表3。

表1 2012—2015年海南西部地区HFMD疫情概况Table 1 The epidemic situation of HFMD in western Hainan from 2012 to 2015

表2 HFMD患儿年龄构成[例（%）]Table 2 Age composition of children with HFMD[cases(%)]

表3 HFMD患儿发病时间分布[例（%）]Table 3 Time distribution of children with HFMD[cases(%)]

2.4 HFMD患儿病原学分析 10 258例HFMD患儿中实验室诊断6175例，诊断率为60.20%。其中EV71阳性3907例，占63.27%；CA16阳性875例，占14.17%；其他肠道病毒阳性1393例，占22.56%。2012—2015年均以EV71感染构成比最高。见表4。

2.5 不同年龄组HFMD患儿病原学分析 不同年龄HFMD患儿EV71、CA16和其他肠道病毒感染构成比也有所变化，以EV71阳性多见。0～4岁儿童为HFMD的高危人群，占实验室诊断病例的90.04%（5560/6175）；其中1～3岁患儿最多，占实验室诊断病例的70.46%（4351/6175）。见表5。

表4 HFMD患儿病原学分析[例（%）]Table 4 Etiological analysis of children with HFMD[cases(%)]

表5 不同年龄组HFMD患儿病原学分析[例（%）]Table 5 Etiological analysis of children with HFMD in different age groups [cases(%)]

2.6 不同月份HFMD患儿病原学分析 随季节变换，HFMD患儿EV71、CA16和其他肠道病毒感染构成比也有所变化。EV71构成比在2月和4—7月较高，其中5月高达74.28%（719/968），而1、10、12月较低。CA16构成比在6—8月较高，其中8月高达19.44%（146/751），而2、3、5月较低。其他肠道病毒构成比在1—4月和9—12月较高，其中12月高达33.33%（42/126），而5—8月较低。见表6。2.7 重症及死亡HFMD患儿病原学分析 2012—2015年海南西部地区累计报告重症患儿62例（男39例，女23例），实验室诊断25例，诊断率为40.32%，其中EV71感染构成比最高占80.00%（20/25），CA16感染占4.00%（1/25），其他肠道病毒感染占16.00%（4/25）。死亡患儿19例（男13例，女6例），实验室诊断11例，诊断率为57.89%，其中EV71感染占81.82%（9/11），其他肠道病毒感染占18.18%（2/11），无CA16感染死亡病例。

表6 不同月份HFMD患儿病原学分析[例（%）]Table 6 Etiological analysis of children with HFMD in different months [cases(%)]

3 讨 论

HFMD是由肠道病毒引起的一种儿童常见传染病，具有传染性强、传播快、极易造成暴发流行等特点，对婴幼儿的生命健康造成极大的威胁。近几年，亚太地区HFMD发病率呈逐年上升的趋势[5]，可能与病毒变异或重组、易感人群的积累和遗传的敏感性有关[6]。1981年上海市首次报告了HFMD，此后在北京、天津、浙江、重庆、山东、湖北、广东和湖南等地陆续有该病报道[7-9]。2008年5月2日我国将HFMD纳入法定报告管理的丙类传染病。因此，了解HFMD的流行特点及病原学感染情况，对指导HFMD的防治具有重要意义。

本研究结果显示，2012—2015年海南西部地区累计报告HFMD患儿10 258例，年发病率为121.34/10万，发病人数呈增长趋势，高于2008—2009年全国报告HFMD的发病水平[10]。男性发病人数多于女性（男女比为1.57∶1），本文病例以散居儿童为主，性别分布男性高于女性，可能与男童好动，户外活动多，暴露机会和感染机会高于女童有关[11]。HFMD发病年龄主要集中在＜5岁儿童，共9138例，占报告总病例数的89.08%；其中1～3岁年龄组发病最高，共7110例，占报告总病例数的69.31%，与杨浩等[12]研究结果相一致。5岁以下的散居儿童是HFMD的高发人群，主要与这部分儿童年龄较小，抗体水平较低，同时缺乏防病知识，健康和卫生意识尚未建立，个人卫生习惯不良，易造成疾病的传播有关。提示5岁以下的散居儿童是HFMD防控重点人群，同时应提高家庭看护人员的HFMD防病知识，培养儿童形成良好的卫生习惯。

HFMD具有明显的季节分布特征，夏季为流行高峰，传播途径复杂，传染性强。本研究显示，HFMD患儿一年四季均有发病，但有明显的季节性，3月发病数开始上升，高峰出现在5—8月，呈单峰分布，9月后疫情开始下降，12月后降到最低。这与HFMD病毒的特性和海南西部地区天气的温度和湿度有关。既往许多研究表明HFMD在全年流行中呈单峰或双峰模式，在日本、中国台湾HFMD发病率呈夏季单峰，而在芬兰其发病率呈秋季单峰，在中国香港等地区则呈现春末夏初的流行高峰和秋冬季的次高峰，可能与不同地域的气候条件有关，如环境温度、湿度及气压等影响病毒繁殖与传播[13]。因此，应加强HFMD的监测，及早采取防控措施，防止HFMD呈季节性暴发流行。

CA16是最早发现可引起HFMD的病原，在1969年首次分离到EV71，从此人们逐渐认识到EV71是HFMD的主要病原之一。研究表明，人可以同时感染CA16和EV71，并且这种共同感染可以提高这2种病原体基因之间重组的可能性，这种现象可造成HFMD的暴发[14]。Wang等[15]研究也表明，EV71和CA16是引起HFMD最主要的2种病原。本研究显示，10 258例HFMD患儿中实验室诊断6175例，其中EV71阳性占63.27%，CA16阳性占14.17%，其他肠道病毒阳性占22.56%。黄学勇等[16]对2008—2011年河南省HFMD的病原分布特征进行分析，发现EV71、CA16、其他肠道病毒阳性率分别为62.70%、12.03%、25.27%， 其 中EV71和CA16是HFMD的主要病原。0～4岁儿童为HFMD的高危人群，占实验室诊断病例的90.04%，其中1～3岁患儿最多，占实验室诊断病例的70.46%。EV71构成比在2月和4—7月较高，CA16构成比在6—8月较高。提示HFMD处在高发时期，存在季节、人群分布的差异，与黎祖秋等[17]报道结果相似。重症患儿62例，实验室诊断率为40.32%，其中EV71感染占80.00%，CA16感染占4.00%，其他肠道病毒感染占16.00%。死亡患儿19例，实验室诊断率为57.89%，其中EV71感染占81.82%，其他肠道病毒感染占18.18%，未见到CA16感染死亡病例。Lu等[18]研究认为体内缺乏EV71保护性抗体是低龄儿童高发病率及高病死率的主要原因。既往研究发现，EV71对脊髓前角细胞具有一定组织嗜性，较CA16更易引起中枢神经系统并发症甚至死亡[19]。

综上所述，海南西部地区HFMD疫情处于高流行态势，＜5岁儿童是主要发病人群，EV71和CA16为主要病原，目前尚无疫苗和特异的治疗手段。持续做好HFMD的病原学监测，及时了解和掌握其流行病学特点，为HFMD防控、疫苗的研制及效果评价等提供重要参考，仍是今日乃至以后很长时间的重要任务。

[1]李幸乐，李懿，张白帆，等. 河南省2014年手足口病重症病例病原学分析［J］. 中华流行病学杂志，2016，37(40):568-571.

[2]Guan H, Wang J, Wang C, et al. Etiology of multiple non-EV71 and non-CVA16 enteroviruses associated with hand, foot and mouth disease in Jinan, China, 2009-June 2013［J］. PLoS One,2015, 10(11):e0142733.

[3]刘岩，陈丽琴. EV71手足口病中枢神经系统损害相关受体及其机制研究进展［J］. 中华微生物学和免疫学杂志，2013，33(8):634-638.

[4]Xia Y, Shan J, Ji H, et al. Study of the epidemiology and etiological characteristics of hand, foot, and mouth disease in Suzhou City,East China, 2011-2014［J］. Arch Virol, 2016, 161(7):1933-1943.

[5]Yang T, Xu G, Dong H, et al. A case-control study of risk factors for severe hand-foot-mouth disease among children in Ningbo,China, 2010-2011［J］. Eur J Pediatr, 2012, 171(9):1359-1364.

[6]覃秋琴，金玉. 手足口病的相关研究进展［J］. 中华传染病杂志，2015，33(9):575-576.

[7]胡南方. 湖南省永兴县2008—2010年手足口病流行病学分析［J］. 传染病信息，2012，25(1):34-36.

[8]罗小华，孙颖颖，周焰华. 广州市黄埔区2009—2012年手足口病流行特征分析［J］. 中国热带医学，2013，13(11):1368-1371.

[9]Lai FF, Yan Q, Ge SX, et al. Epidemiologic and etiologic characteristics of hand, foot, and mouth disease in Chongqing,China between 2010 and 2013［J］. Med Virol, 2016, 88(3):408-416.

[10]常昭瑞，张静，孙军玲，等. 中国2008—2009年手足口病报告病例流行病学特征分析［J］. 中华流行病学杂志，2011，32(7):676-680.

[11]潘浩，郑雅旭，毛盛华，等. 上海市手足口病重症病例危险因素研究［J］. 中华流行病学杂志， 2012，33(8):763-767.

[12]杨浩，胡世雄，邓志红，等. 湖南省2009—2013年手足口病疫情分析［J］. 中国热带医学，2015，15(3):301-303.

[13]Feng H, Duan G, Zhang R, et al. Time series analysis of handfoot-mouth disease hospitalization in Zhengzhou: establishment of forecasting models using climate variables as predictors［J］.PLoS One, 2014, 9(1):e87916.

[14]Mao Q, Wang Y, Yao X, et al. Coxsackie virus A16: epidemiology,diagnosis, and vaccin［J］. Hum Vaccin Immunother, 2014,10(2):360-367.

[15]Wang JX, Zhu SL, Wang J, et al. Seroprevalence of enterovirus A71 and Coxsackievirus A16 in healthy people in Shandong Province,China［J］. PLoS One, 2016, 11(9):e0162373.

[16]黄学勇，康锴，许玉玲，等. 2008—2011年河南省手足口病患儿病原学监测结果［J］. 中华预防医学杂志，2012，46(10):883-887.

[17]黎祖秋，潘利花，李海燕，等. 南宁市2008—2014年手足口病流行病学及病原学特征［J］.中国热带医学，2015，15(12):1460-1463.

[18]Lu CY, Lee CY, Kao CL, et al. Incidence and case-fatality rates resulting from the 1998 enterovirus 71 outbreak in Taiwan［J］. J Med Virol, 2002, 67(2):217-223.

[19]Chen SP, Huang YC, Li WC, et al. Comparison of clinical features between Coxsackievirus A2 and enterovirus 71 during the enterovirus outbreak in Taiwan, 2008: a children's hospital experience［J］. J Microbiol Immunol Infect, 2010, 43(2):99-104.