输血检验中卡式微柱凝胶试验的应用探讨

刘飒爽 陈宇锋 王小伟

【摘要】 目的 探讨卡式微柱凝胶试验应用于输血检验中的临床效果。方法 244例输血患者， 随机分为对照组和观察组， 每组122例。对照组开展盐水试管法， 观察组进行卡式微柱凝胶试验， 以测定患者血型并开展正向、反向定型试验， 比较两组检测符合率。结果 两组正定型与反定型符合率比较差异无统计学意义（χ2=3.037、2.734， P>0.05）， 共9例不符合者， 再用生理盐水清洗后鉴定， 发现红细胞数量异常者2例， 血清蛋白中有纤维蛋白者3例， 血液样本保存时间过久无法使用者1例;进一步检查剩余

3例血液标本后发现1例存在自身凝集， 1例自行凝集障碍， 1例存在肿瘤因子。结论 卡式微柱凝胶试验在输血检验中使用可确保输血安全， 且其能快速的完成血液配对， 已达到检验的目的， 值得推广。

【关键词】 输血检验;卡式微柱凝胶试验;应用

DOI：10.14163/j.cnki.11-5547/r.2018.07.117

输血为临床抢救与治疗患者的重要措施， 因此一定要确保用血及时且安全， 正确配血才能确保用血安全。血型鉴定为输血必要过程， 其正确性直接影响患者生命安全输血。以往临床主要采用手工盐水试管法开展血型鉴定， 且一般情况下仅开展正向或反向定型法， 难以标准化， 有较多干扰因素， 时常发生血型错检现象[1]。因此， 传统的血液配对方法已不能满足目前的医学治疗要求。众多医学学者在临床输血的检验中不断展开实验探索， 最终发现了卡式微柱凝胶试验在临床输血的检验中完全满足了现代医学的临床输血检验的需求。近年来， 临床广泛应用卡式微柱凝胶试验开展血型鉴定也证明了其基于抗人球蛋白， 可对不规则抗体予以有效筛查， 与临床输血要求完全相符。同时， 卡式微柱凝胶还是一种免疫的血型血清检测方法， 其可快速、精确地完成血液配对， 且其产生的医药污染率小， 检测所需的样品剂量也小。如此一来， 临床输血检验中的检验环节里， 卡式微柱胶试验就逐渐取代了传统的血型血清检测方法。现选取患者244例， 探讨卡式微柱凝胶试验的应用效果。现报告如下。

1 资料与方法

1. 1 一般资料 选取本院2016年8月～2017年8月收治的输血患者244例， 随机分为对照组和观察组， 每组122例。

对照组中男59例， 女63例;年龄1～89岁， 平均年龄（46.2± 11.8）岁。观察组中男54例， 女68例;年龄2～87岁， 平均年龄（47.5±12.4）岁。两组性别、年龄等一般资料比较， 差异无统计学意义（P>0.05）， 具有均衡性。

1. 2 方法 对照组使用盐水试管法：根据规范的要求， 使用传统的盐水检测方法在试管内对正向定型与反向定型进行检验。观察组开展卡式微柱凝胶试验：取出卡式凝胶管做好标记， 将微柱凝胶试剂卡的六支凝胶微管标号， 将待检者0.5%～0.8%红细胞悬液分别加入第1～4支微管中， 每管50 μl， 将待检查血清分別加入第5支和第6支微管中， 每管50 μl。将已知A型和B型红细胞0.5%～0.8%浓度悬液分别加入第5支和第6支微管中， 每管50 μl， 即可使用专用离心机离心5 min， 900 r/min 2 min， 1500 r/min 3 min， 取出肉眼判定结果。观察两组检验符合情况。

1. 3 检验标准 阳性标准：红细胞抗原与相应抗体在微柱凝胶中形成的特异性抗原抗体复合物浮在凝胶表面或胶中， 为阳性反应。反应强度：特异性红细胞抗原抗体复合物位于胶表面为强阳性反应：复合物在胶中为弱阳性反应：愈靠近胶底部颗粒愈小， 反应愈弱。阴性标准：被检红细胞抗原无相应的抗体结合， 不出现特异性抗原抗体复合物， 红细胞沉于微柱凝胶的底部。

1. 4 统计学方法 采用SPSS20.0统计学软件对数据进行处理。计量资料以均数±标准差（ x-±s）表示， 采用t检验;计数资料以率（%）表示， 采用χ2检验。P<0.05表示差异有统计学意义。

2 结果

两组正定型与反定型符合率比较差异无统计学意义（χ2=3.037、2.734， P>0.05）。见表1。共9例不符合者， 再用生理盐水清洗后鉴定， 发现红细胞数量异常者2例， 血清蛋白中有纤维蛋白者3例， 血液样本保存时间过久无法使用者1例;进一步检查剩余3例血液标本后发现1例存在自身凝集， 1例自行凝集障碍， 1例存在肿瘤因子。

3 讨论

临床输血地位无法替代， 为确保其安全性。安全输血是医疗救治系统的一个基本组成部分， 能够起到拯救生命， 治疗生命的作用。安全输血牵涉到众多环节， 其中输血前血型和输血前相容性检测的环节， 作为医院输血科尤为重要。因此输血前一定要准确、快速开展血型鉴定。《全国临床检验操作规程》要求血型鉴定时通过正向与反向定型对ABO血型予以准确鉴定， 并对红细胞悬液浓度、实际用量、加样顺序及离心时间与速度均作出明确要求[2， 3]。然而当前国内诸多基层医院鉴定血型时仅开展正向定型， 反向定型被忽视， 且随意操作， 标准化难度高， 易导致血型错检事件， 因此临床近年来使用卡式微柱凝胶试验， 可快速配对血清血型。

法国学者首次于1986年研发出卡式微柱凝胶试验， 此为免疫学检测新技术， 为微柱凝胶技术结合于所有血型鉴定技术的产物， 美国食品药品监督管理局（FDA）于1994年认可该技术[4]， 经过持续改进与应用后多数发达国家已经该技术作为常规检测红细胞血型、血清的技术。卡式微柱凝胶试验主要通过对葡聚糖凝胶浓度予以调节后对分子筛孔径大小予以控制， 使分子筛只允许游离分子通过后将凝集与游离红细胞分离;在凝胶上部反应添加红细胞与血清并行离心处理后凝胶阻碍凝集红细胞而在凝胶内部或上部停留， 提示凝集反应发生， 可判定为阳性;反之所有红细胞在凝胶底部停留提示无凝集反应， 判定为阴性[5]。部分老年人、新生儿、部分恶性肿瘤、白血病患者红细胞（RBC）抗原较弱， 手工操作难以判别血型， 但卡式检测法只允许未凝集的RBC通过， 已凝集的则在分离柱外， 故而灵敏度较高， 特别是检测意义重大的抗-E等红细胞抗体时敏感度更高[6]。此外新生儿溶血性疾病或自身免疫性疾病患者RBC也会自发凝集， RBC膜获得性或遗传性异常也会导致凝集， 正定型检测时假凝集会导致错检， 而卡式法中添加抗人球蛋白， 有利于特异性凝集红细胞， 故而特异性更高。正反定型结合可对单纯正定型检测不足予以弥补。

本组结果表明， 观察组正定型与反定型符合率分别为100.0%、99.2%， 对照组分别为97.5%、96.9%， 说明卡式微柱凝胶试验具备推广价值。该试验中应用标准化定量操作， 可将人员操作随意性最大限度减少， 且有较好的重复性， 应用凝胶分子筛技术亦可提高結果的客观性， 且标本量需求较少， 特别适用于大面积烧伤或新生儿等难以抽取标本的患者[7]。同时操作期间无需洗涤， 抗单球蛋白抗体不会被中和导致假阴性。卡式检测法假阳性或假阴性的原因为红细胞浓度过高或过低致使离心不彻底， 纤维蛋白血清、细胞污染或细胞凝块等， 因此一定要确保细胞浓度准确， 资料称2%最佳[8-12]。在实验前还需离心处理有气泡新卡， 避免撕膜时微柱内容物发生交叉污染现象。但该检测法成本较高， 因此使用国产试剂以降低成本， 可进一步推广该方法。

参考文献

[1] 卢伟伟， 王晓宁， 王震， 等. 微柱凝胶免疫分析技术检测新生儿免疫性血小板减少症自身抗体的效果. 中国妇幼保健， 2017， 32（4）：852-855.

[2] 周雪莲. 微柱凝胶试验在冷凝集素检测中的应用. 中国医药导刊， 2012， 14（3）：470-471.

[3] 闫朝春， 蒋玲， 陈丽梅， 等. 导致微柱凝胶卡式交叉配血试验假阳性结果的原因分析. 国际检验医学杂志， 2011， 32（15）： 1737-1738.

[4] 王宇宏， 蔡忠鹤， 李凌波. 两种方法检测O型血孕妇IgG抗体效价结果分析. 中国妇幼保健， 2015， 30（18）：3079-3081.

[5] 周守容， 邓安彦， 吴春磊， 等. 低离子强度溶液在输血相关检验中的应用研究. 国际检验医学杂志， 2013， 34（22）：3063-3064.

[6] 秦立红， 蒋利星. 微柱凝胶法配血试验2316例结果分析. 国际检验医学杂志， 2012， 33（4）：500-502.

[7] 余海燕， 丁后明， 李凌波. 不同标本对卡式法交叉配血试验结果的影响分析. 检验医学与临床， 2017， 14（3）：386-388.

[8] 高远. 微柱凝胶免疫检测技术应用于临床血型鉴定与输血中的意义分析. 中国医疗器械信息， 2017， 23（12）：27-28.

[9] 王宇宏， 李凌波. 两种微柱凝胶抗人球蛋白试验检测孕妇IgG血型抗体效价的比较研究. 中国妇幼保健， 2014， 29（20）： 3241-3245.

[10] 张勇萍， 苏小花， 杨世明， 等. 微柱凝胶法检测Rh血型免疫性抗体的分析// 中国医师协会输血分会2010年输血学术年会， 2010：449-450.

[11] 朱艳玲， 田燕. 临床血型鉴定和输血中微柱凝胶免疫检测技术的应用. 医学信息， 2017， 30（4）：281-282.

[12] 郭惠莲， 黄东平， 郑燕霞. 微柱凝胶免疫检测技术在临床血型鉴定与输血中的应用价值. 临床医学工程， 2016， 23（9）：1225- 1226.

[收稿日期：2017-09-28]