动物尸体剖检寄生虫的操作规程
2018-03-19牛志乔张文波
牛志乔,张文波
(陕西省汉中市汉台区畜牧兽医技术推广中心,陕西 汉中 723000)
对动物生前诊断有时会疏漏一些严重或致死性的寄生虫病。例如,患急性钩虫病的幼犬在排出虫卵之前就可能失血致死。当羊群暴发疾病时,剖检几只病羊常可为诊断提供最为经济有效的手段。绵羊感染圆线虫时,各种原发和继发的病原往往会产生令人混淆的临床症状,此时,可以通过蠕虫鉴定和计数的方法来解决这一问题。
剖检结果必须与病史和临床症状相结合才能做出确诊,寄生虫病的诊断更是如此。例如,对于急性血矛线虫病的诊断,不仅要依据在皱胃中发现大量的捻转血矛线虫,而且要有临床贫血的症状。如果没有贫血,就不应该诊断为血矛线虫病。事实上,捻转血矛线虫有时会放弃一个濒死的宿主,因此,在剖检时发现组织苍白和水肿,但未发现虫体,正确的诊断仍然是血矛线虫病。
1 剖开尸体
将反刍动物尸体左侧向下平置,以方便取出瘤胃。其他动物的尸体同样可以从容易着手的任何一侧进行操作。但是,应该采取一个固定的位置,这样就会对各种器官的位置和正常形态产生一个印象,以便能快速注意到任何异常。沿颌下间隙到会阴的中线切开皮肤,从一侧剥离皮肤,包括与其相连的表面胸肌和上肢,从而暴露胸廓。切除中轴肌肉周围的肋骨和胸骨附近的肋软骨。在这个过程中,割断与膈膜相连的附件,去除肋架。沿着正中线切开腹壁,小心避免刺破内脏。将切口扩大到耻骨边缘并剥离翻开腹壁。劈开耻骨联合或切断髋关节的韧带,并剥离翻转下肢。
2 胸部内脏
切开下颌间肌、舌骨和其他附件,剖开舌、吸头、气管及食管。拉出气管和食管,这样有助于取出心脏和肺脏。找到附件(大动脉、腔静脉、奇静脉及各种韧带)的连接处并切断,取出胸腔中的内脏。切开气管、支气管及细支气管、心房和心室、大动脉、腔静脉、肺主动脉及小动脉,仔细检查内容物和内壁,肉眼检查是否有寄生虫。实际上,对于非常小的后圆线虫肉眼很难看到,如毛细缪勒线虫、深奥猫圆线虫和贺氏类丝虫等。但可以通过对虫体引起的浅灰色胸膜下结节的压片检查来发现虫体。贝尔曼法常用于检查肺线虫幼虫(如缪勒属和猫圆属),但由于贺氏类丝虫的幼虫极不活跃,采用贝尔曼法分离难以从组织中自行游出,因此该方法不适宜于检测贺氏类丝虫。
3 腹腔内脏
在腹膜上可检查囊尾蚴、四盘蚴、舌形虫包囊和棘头虫童虫。在马腹膜壁层下缘通常可发现无齿圆线虫幼虫。检查肝脏表面是否有蛔虫、带科绦虫和片形属吸虫幼虫移行的痕迹,检查肾脏是否有弓蛔属幼虫包囊。马的胰腺是马圆线虫幼虫的嗜好部位。在贲门、幽门、回盲连接处做双结扎以隔离胃、大肠和小肠。这些区域可为一些特殊寄生虫提供不同的寄生环境,将全部肠道内容物混合收集会失去有价值的诊断信息。每次剖开一个部位,仔细拨开食物并检查黏膜确保小型虫体不会漏检。肉眼足以看到犬、猫、马、猪的大部分寄生虫,但有少数重要虫种形态纤细(如类圆属和毛形属)。刮取小肠黏膜并检查刮取物中的小型线虫、球虫及其类似物等。
寄生于反刍动物的大部分线虫是比较小的,因此必须仔细检查以免漏检。足以致死小母牛的寄生虫种群也许被粗心的剖检人员完全疏忽。下面的技术可实现从大部分食物和黏膜碎片中浓集和分离蠕虫的目的,稍加努力,即可对寄生蠕虫的数量进行估计。①将某一器官的所有内容物(皱胃内容物易于取出,先从皱胃开始)转移至一个桶中,并擦洗或轻轻刮去黏膜以确保蠕虫完全转移。②加入几千毫升温水,与内容物混匀后静置5 min,使蠕虫和一些密度较大的内容物沉降至底部,然后小心地倒去上清液。重复操作几次,直至底部沉淀物主要为蠕虫和一些粗渣。③将少量沉淀物转移至培养皿中,用透射光检查,最好用放大镜和体视显微镜观察。如果是从刚死亡不久的动物尸体内获得的蠕虫,虫体在温水中非常活跃,很容易发现,将虫体用镊子轻轻地取出以便进一步检查。
小肠虽然很长,但只用较短时间就可完成。可用1 L水灌洗反刍动物小肠前6 m肠段,即可收集多数重要的寄生线虫。在6 m未剖开的小肠幽门端插入一个漏斗,灌一烧杯水进去,沿着肠管揉捏,从另一端收集内容物,然后按照上述步骤②和③进行操作。步骤②常用的替代方法是用筛子剧烈冲洗沉淀,筛孔要小到足以留住虫体,但大到足以滤下水和细小碎片。翻转筛子,从背面冲洗使虫体和粗渣转移到收集容器中。如果时间不够或检查沉淀的仪器缺乏,可将沉淀保存在10%福尔马林溶液中以备之后检查。在试图分离和检查寄生虫之前,要确保将保存的沉淀物再次筛洗以去除福尔马林溶液。
由于在绵羊、青年牛和马体内几乎总能找到寄生虫,因此在对随后剖检结果的评价时,必须依赖于寄生虫的丰度及其特征。