非小细胞肺癌组织CXCL5、CXCR2表达变化及其意义

胡剑，刘迪，许川，梅宏，韩连奎，李震宇，刘波

(贵州省人民医院，贵阳550002)

研究发现，免疫系统紊乱在非小细胞肺癌(NSCLC)的发生、发展中起重要作用。趋化因子是细胞因子的一大类，是免疫系统的重要组成部分。趋化因子生长调节基因5(CXCL5)及其受体 CXC 类趋化因子受体 2(CXCR2)是趋化因子家族成员。CXCL5与CXCR2结合后发挥强烈的粒细胞趋化和促血管生成作用，参与肝癌、结肠癌等消化道肿瘤的发生、发展过程。目前NSCLC组织中CXCL5、CXCR2表达变化及其临床意义尚不明确，相关研究结果不统一。本研究观察了NSCLC组织中CXCL5、CXCR2表达变化，现分析其与肿瘤病理参数的关系，探讨CXCL5、CXCR2在NSCLC发生、发展中的作用。

1 资料与方法

1.1 临床资料 选择2012年1月～2016年12月收治的86例NSCLC患者。所有患者符合美国退伍军人肺癌研究组(VALG)中NSCLC诊断标准[1]。排除标准：①伴有原发性心、肝、肾及脑等器官疾病者；②存在除NSCLC外其他恶性肿瘤者：③存在自身免疫性疾病者；④自愿退出研究者。纳入患者中男58例、女28例，年龄28～75(58.36±10.02)岁，病程0.75～3(1.28±0.48)年。组织分化程度低分化20例、中分化38例、高分化28例，临床分期Ⅰ期+Ⅱ期40例、Ⅲ期+Ⅳ级46例，有血管浸润54例、无血管浸润32例。本研究已获医院医学伦理委员会批准，患者及其家属均签署知情同意书。

1.2 NSCLC组织及癌旁正常组织CXCL5、CXCR2表达检测 收集患者手术切除肿瘤组织标本及其癌旁正常组织标本(距肿瘤组织5 cm以上，病理检查证实为正常组织)， 采用免疫组化SP法检测CXCL5、CXCR2表达。组织标本经石蜡包埋，4 μm厚连续切片裱于载玻片上，56 ℃烤箱烘烤48 h后取出，37 ℃烤箱过夜，行免疫组化学染色。即用型SP试剂盒、DAB显色试剂盒均购自于北京中杉金桥生物技术有限公司。兔抗人CXCL5多克隆抗体工作浓度为1∶25，兔抗人CXCR2多克隆抗体工作浓度为1∶25，封闭时用正常羊血清，工作浓度为1∶20。染色标本用光学显微镜高倍镜(400倍)下观察，胞质或胞核内出现棕黄色颗粒为阳性细胞[2]。阳性细胞百分比小于5%计0分，5%～25%计1分，26%～50%计2分，>50%计3分。染色程度轻度无着色记0分，淡黄色为1分，棕黄色为2分，棕褐色记3分。两项得分相加，结果0～2分为阴性，3～5分为阳性，6分为强阳性；0～4分为低表达，5～6分为高表达。分析癌组织CXCL5、CXCR2表达与肿瘤分化程度、临床分期及血管浸润的关系。

1.3 统计学方法 采用SPSS18.0统计软件。计数资料组间比较采用χ2检验。P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 NSCLC组织及癌旁正常组织CXCL5、CXCR2表达比较 NSCLC组织CXCL5、CXCR2阳性、强阳性率均高于癌旁正常组织(P均<0.05)。见表1。

表1 NSCLC组织及癌旁正常组织CXCL5、CXCR2表达比较[例(%)]

注：与对照组比较，*P<0.05。

2.2 NSCLC组织CXCL5、CXCR2表达与肿瘤组织分化程度、临床分期、血管浸润的关系 NSCLC组织CXCL5、CXCR2表达与肿瘤组织分化程度、临床分期、血管浸润均有关(P均<0.05)。见表2。

表2 癌组织CXCL5、CXCR2表达与肿瘤组织分化程度、临床分期、血管浸润的关系[例(%)]

3 讨论

关于肺癌的发生与进展既往有学者提出了“解剖或机械”理论。该理论主要通过器官组织的血液、淋巴引流来解释肿瘤的转移[3～5]。后来随着研究的不断深入，有学者发现多数NSCLC组织中趋化因子表达水平较高[6～9]。趋化因子是一种小分子蛋白质，是细胞因子中一大类特异性趋化白细胞物质，通过与其相应的受体相结合参与多种病理生理过程[10,11]。趋化因子根据其结构可分为多种类型，最常见的分型方法是分为C、CC、CXC 及 CX3C共4个亚族。趋化因子一方面可促进免疫细胞杀伤肿瘤细胞，另一方面可通过对肿瘤血管产生的促进作用而加速肿瘤细胞增殖[12,13]。

CXCL5是谷氨酸亮氨酸精氨酸(ELR)阳性 CXC类趋化因子，具有较强的粒细胞趋化作用，其表达水平与血管生成也有一定的相关性[16]。肿瘤组织CXCL5表达水平越高，新血管生成越快，肿瘤增殖和进展越快。有研究证实，在多种恶性肿瘤组织中CXCL5均以高水平表达[17～19]。CXCR2为ELR阳性 CXC类趋化因子中的公共受体，可以结合多种ELR阳性 CXC类趋化因子，参与肿瘤的发生、发展。本研究结果显示，NSCLC患者肿瘤组织CXCL5、CXCR2表达均明显高于癌旁正常组织，与既往研究结果一致[14,15]。

本研究结果还显示，NSCLC组织CXCL5、CXCR2表达与肿瘤组织分化程度、临床分期、血管浸润均有关。组织分化程度较低、临床分期较高、有血管浸润的NSCLC组织CXCL5、CXCR2表达阳性和强阳性率较高。提示CXCL5、CXCR2出现这种相关性的原因，笔者认为可能与CXCL5、CXCR2结合后共同影响NSCLC患者肿瘤组织血管生成有关。CXCL5、CXCR2阳性表达越多，肿瘤组织新血管生成越多越快，NSCLC进展越快，恶性程度越高，表现为临床分期比较晚、分化程度较低、血管浸润程度较重。

综上所述，NSCLC组织CXCL5、CXCR2高表达，且与NSCLC患者分化程度、临床分期及血管浸润有关。提示CXCL5、CXCR2高表达可促进NSCLC的发生及发展。CXCL5、CXCR2表达有助于判断NSCLC患者的分化程度、临床分期和血管浸润。本研究的不足为样本量较小且研究时间短。

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