鸡蛋过敏患者外周血清中半乳糖凝集素—3的表达及与鸡蛋特异性IgE的相关性

张书辰+杨林+胡林涛

[摘要] 目的 探讨鸡蛋过敏患者血清半乳糖凝集素-3（Gal3）与鸡蛋特异性IgE含量的相关性，为临床鸡蛋过敏提供新途径。 方法 筛查2016年4月～2017年4月于华中科技大学同济医学院附属同济医院过敏反应科就诊的食物过敏患者，根据患者病史、皮肤点刺试验、鸡蛋特异性IgE数值和食物排除法筛选68例鸡蛋过敏且无其他疾病患者作为鸡蛋过敏组，其中症状包含严重过敏性休克、特异性皮炎、慢性荨麻疹、轻度皮炎伴搔痒、过敏性哮喘、变应性咳嗽和过敏性鼻炎。选取同期就诊的20名无过敏病史、皮肤点刺试验及鸡蛋血清特异性IgE为阴性者作为健康对照组。分析不同症状的鸡蛋过敏患者血清中Gal3的表达及与鸡蛋特异性IgE含量的相关性。 结果 血清Gal3在对照组中平均浓度为（4.23±0.53）ng/mL，鸡蛋过敏组中平均浓度为（9.95±6.31）ng/mL，两组间差异有统计学意义（P = 0.0032）；各组症状中Gal3的表达量分别为：过敏性休克组为（17.21±2.54）ng/mL，过敏性哮喘组为（10.95±1.97）ng/mL，与对照组比较差异均有显著统计学意义（P = 0.0007、0.0001）；慢性荨麻疹组为（6.71±2.13）ng/mL，过敏性鼻炎组为（7.24±1.75）ng/mL，与对照组比较差异均有统计学意义（P = 0.038、0.022），而特异性皮炎组（5.04±0.15）ng/mL，变异性咳嗽组（3.24±2.75）ng/mL，轻度皮炎伴搔痒组（4.24±1.33）ng/mL，与对照组比較差异均无统计学意义（P = 0.156、0.354、0.282）；鸡蛋过敏患者血清Gal3表达与血清中鸡蛋特异性IgE含量呈显著正相关（r = 0.5932），各组临床表现症状中过敏性哮喘、过敏性鼻炎和慢性荨麻疹与特异性IgE含量呈正相关（r = 0.7792，0.8658，0.8091均P < 0.01），其余症状中Gal3表达与特异性IgE含量无明显相关性（P > 0.05）。 结论 Gal3在以过敏性哮喘、过敏性鼻炎和慢性荨麻疹为表现的过敏患者中，外周血清中数值的升高表示能够提示患者存在鸡蛋过敏。

[关键词] 半乳糖凝集素-3；鸡蛋过敏；食物过敏；特异性IgE

[中图分类号] R44 [文献标识码] A [文章编号] 1673-7210（2018）01（a）-0064-04

[Abstract] Objective To detect the expression of galectin-3（Gal3） in serum of patients with egg allergy and the correlation with egg-specific IgE. Methods Screening 68 patients with egg allergy according to the history of allergy， prick test， egg-specific IgE and food exclusion from April 2016 to April 2017 in Department of Allergy of Tongji hospital Affiliated to Tongji Medical College of Huazhong University of Science & Technology. The patients with egg allergymanifested withanaphylactic shock， eczema， chronic urticaria， mild dermatitis， allergic asthma， cough variant asthma and allergic rhinitis were selected as egg allergy group. Twenty patients with no history of allergies， skin prick test and egg serum specific IgE were negative were selected as healthy controlsin the same period. The correlation between Gal3 expression and egg-specific IgE in patients with different symptoms was analyzed. Results The average concentration of Gal3 in serum of control group was （4.23±0.53） ng/mL， the average concentration of Gal3 in serum of egg allergy group was（9.95±6.31）ng/mL. The difference was statistically significant （P = 0.0032）. The expression of Gal3 in each group： the concentration of Gal3 in anaphylactic shock group was （17.11±2.54） ng/mL and allergic asthma was （10.95±1.97） ng/mL significant higher than those of control group， the difference was statistically significant （P= 0.0007， 0.0001）； the group of chronic urticaria was （6.71±2.13） ng/mL and allergic rhinitis was（7.24±1.75） ng/mL， compared with the control group， the differences were statistically significant （P = 0.038， 0.022）； the eczema group （5.04±0.15） ng/mL， mild dermatitis group was（4.24±1.33） ng/mL and cough variant asthma group was （3.24±2.75） ng/mL， the differences were not statistically significant（P = 0.156， 0.354， 0.282 respectively）. The expression of Gal3 was positively correlated with egg-specific IgE in serum （r = 0.5932）. There was a positive correlation among allergic asthma， allergic rhinitis and cough variant asthma in patients with egg-specific IgE （r = 0.7792， 0.8658， 0.8091， all P < 0.01）， but there was no significant difference between Gal3 expression and egg-specific IgE in the other symptoms （P > 0.05）. Conclusion The expression of Gal3 in serum of patients with allergic asthma， allergic rhinitis and chronic urticaria was significantly increased， which can prompt allergy patients provoked by egg.endprint

[Key words] Galectin-3； Egg allergy； Foodallergy； Specific IgE

半乳糖凝集素（Galectins）是凝集素超家族中的一个大家族[1]，广泛分布在各种生物体内，从线虫到哺乳动物等数种动物体，均可以测出半乳糖凝集素的表达。其具有启动固有免疫反应、合成和分泌炎性因子、介导细胞之间的信号识别及调节细胞分化等多种生物学功能[2]。半乳糖凝集素-3（Galectin-3，Gal3）是半乳糖凝集素特殊的一类，属于脊椎动物中惟一嵌合型半乳糖凝集素，其由一个C端的糖识别域与另一个N端胶原蛋白重复结构域融合而成[3]。研究表明Gal3可以表达于上皮细胞，树突细胞及各种白细胞中，主要定位于胞质，但在细胞核和细胞表面同样有表达。Gal3可以通过受体-配体结合的方式发挥生物学效应，其参与的主要生物学功能有调节细胞增殖、黏附、凋亡、参与炎性反应、参与血管生成和诱导肿瘤细胞溢出等[4]。其可以通过相应的受体结合，激活IgE/FcεRI信号通路，参与过敏反应[5]。目前有多项研究表明，Gal3在過敏性疾病中表达升高[6-8]。

鸡蛋作为食物过敏的首要过敏原，占所有食物过敏源的52%[9]，能引发的速发过敏反应可引起过敏性休克[10]，危害患者的生命，而迟发型过敏反应主要危害儿童的生长发育，其可引起消化道黏膜的损伤，导致肠道营养吸收障碍，从而使患儿生长发育迟缓[11]。目前临床上针对鸡蛋过敏的诊断仍以皮肤点刺试验（skin pick test，SPT）和血清特异性IgE结果为主[12]，此方法难以有效地诊断鸡蛋过敏[13]。而国际上所推荐的食物过敏诊断的“金标准”——双盲对照激发试验[14]，由于操作繁琐及存在临床安全隐患在国内尚未开展。本研究通过检测鸡蛋过敏患者血清中Gal3的表达，对比鸡蛋过敏组与健康对照组的差异，和鸡蛋过敏引发的不同症状患者血清Gal3表达差异，及Gal3的表达和外周血清中鸡蛋特异性IgE的数值，分析Gal3对鸡蛋过敏的临床诊断价值。

1 资料与方法

1.1一般资料

筛查2016年4月～2017年4月于华中科技大学同济医学院附属同济医院过敏反应科就诊的食物过敏患者，根据患者病史、皮肤点刺试验、鸡蛋特异性IgE数值和食物排除法筛选68例鸡蛋过敏且无其他疾病患者作为鸡蛋过敏组，其中症状包含严重过敏性休克、特异性皮炎、慢性荨麻疹、轻度皮炎伴搔痒、过敏性哮喘、变应性咳嗽和过敏性鼻炎。选取同期就诊的20名无过敏病史，皮肤点刺试验及鸡蛋血清特异性IgE为阴性者作为健康对照组。在患者知情条件下，收集患者血清冻存于-80℃冰箱备ELISA检测用。资料的收集包括患者性别、年龄、病史资料、食物日记、鸡蛋特异性IgE数值、过敏原皮肤点刺试验结果等。本研究获本院伦理委员会批准。

1.2检测鸡蛋过敏患者外周血清中Gal3的蛋白含量

使用BG medicine 公司的Gal3 ELISA试剂盒检测人外周血清中Gal3的含量。将待测血清加入到预包被的Gal3 ELISA板中，室温孵育90 min后加入生物素化抗体工作液孵育60 min，再加入酶结合物稀释液孵育30 min，以上每个步骤结束之后用TBST洗5次，孵育温度为37℃。最后加入显色液并适时终止，用酶标仪测量450 nm处的OD值。计算出各样本的Gal3蛋白含量后，比较对照组和鸡蛋过敏组血清Gal3的表达差异，及由鸡蛋过敏导致的不同临床症状患者的血清Gal3含量。

1.3 统计学方法

采用SPSS 19（SPSS Inc.，USA）统计学软件进行数据分析，计量资料用均数±标准差（x±s）表示，两组间比较采用t检验；计数资料用（%）表示，组间比较采用χ2检验，以P < 0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 两组一般资料比较

本研究共收集20例健康对照者及68例符合此条件的鸡蛋过敏患者病史及外周血清，男36例（52.9%），女32例（47.1%）。由鸡蛋过敏导致的临床症状出现严重过敏性休克者4例（5.8%），平均年龄（19.6±12.1）岁；出现特异性皮炎者8例（11.8%），平均年龄（24.3±16.1）岁；慢性荨麻疹者11例（16.2%），平均年龄（35.1±10.6）岁；轻度皮炎伴搔痒者13例（19.1%），平均年龄（35.6±15.8）岁；过敏性哮喘者15例（22.1%），平均年龄（37.6±16.6）岁；变应性咳嗽者8例（11.5%），平均年龄（25.8±13.8）岁；过敏性鼻炎者9例（13.2%），平均年龄（23.6±4.5）岁。20例健康对照者的平均年龄（28.1±4.3）岁。各组鸡蛋过敏患者的年龄与对照组比较差异无统计学意义（P > 0.05）。

2.2各组间血清Gal3含量的比较

血清Gal3在对照组中平均浓度为（4.23±0.53）ng/mL，鸡蛋过敏组中为（9.95±6.31）ng/mL，两组间差异有统计学意义（P = 0.0032）；各组症状中，在过敏性休克组为（17.21±2.54）ng/mL，过敏性哮喘组为（10.95±1.97）ng/mL，与对照组比较差异均有显著统计学意义（P = 0.0007、0.0001）；慢性荨麻疹组为（6.71±2.13）ng/mL、过敏性鼻炎组为（7.24±1.75）ng/mL，与对照组比较差异均有统计学意义（P = 0.038、0.022），而特异性皮炎组为（5.04±0.15）ng/mL、变异性咳嗽组为（3.24±2.75）ng/mL、轻度皮炎伴搔痒组为（4.24±1.33）ng/mL，与对照组比较差异均无统计学意义（P = 0.156、0.354、0.282）。

2.3各组间血清Gal3含量与血清鸡蛋特异性IgE含量的相关性分析endprint

雞蛋过敏患者血清Gal3表达量与血清鸡蛋特异性IgE含量呈正相关（r = 0.5932），各组临床表现症状中过敏性哮喘、过敏性鼻炎和慢性荨麻疹与特异性IgE含量呈正相关（r = 0.7792、0.8658、0.8091，均P < 0.01），其余症状中Gal3表达量与特异性IgE含量差异无明显相关性（P > 0.05）。见图1、2。

3 讨论

食物过敏为主要的过敏性疾病之一，是过敏性疾病进程（the allergic march）的开端[15]。据调查，在发达国家约1/3的儿童至少出现过1次食物过敏症状。在美国，每年会发生超30000起食物诱导的严重过敏反应，其中超过150例患者因食物过敏导致死亡[16]。

鸡蛋在众多食物过敏中有着特殊的地位和意义。鸡蛋作为一种常见的食物过敏原，其是各类蛋白制品的主要来源，同时也是各种副食的添加辅料，其中蛋清是绝大多数婴幼儿疫苗的培养基中的主要成分[17]。当患者对鸡蛋过敏并摄入以上制品时即可引起呼吸、消化、皮肤等各系统过敏症状，病情严重时可出现严重过敏反应（多系统症状）及过敏性休克。对于婴幼儿的特殊危害还在于影响患儿营养吸收和生长发育，有调查表明因进食顾虑造成患者及家属不得不改变饮食习惯和社交活动，严重导致了患者及家庭的社交焦虑[18]。目前针对鸡蛋过敏的诊断“金标准”为国际上推行的体内双盲对照激发试验，但因激发风险较高，在国内少有开展。常规血清学特异性IgE检测往往不能有效地诊断鸡蛋过敏，因此，寻求一种安全的体外检测方法，是临床上迫切的需要。

本研究通过对比68例鸡蛋过敏的患者外周血清中Gal3的表达发现，Gal3在鸡蛋过敏患者血清中表达明显高于健康对照组，且与鸡蛋特异性IgE含量呈正相关。在以过敏性哮喘、过敏性鼻炎和慢性荨麻疹为表现的鸡蛋过敏患者血清中Gal3的表达显著升高，且与鸡蛋特异性IgE含量呈明显正相关，与国外相关文献结果相符[19]。过敏性休克患者中Gal3的表达显著升高，但与鸡蛋特异性IgE含量无明显相关性。本研究组分析原因，考虑可能是由于未在患者急性发作期采取外周血清进行分析，而在就诊时血清学特异性IgE正处于缓慢回落期，引起Gal3的表达与鸡蛋特异性IgE含量无明显相关性。在特异性皮炎组，轻度皮炎伴搔痒组、变应性咳嗽组患者中，Gal3的表达和鸡蛋特异性IgE含量均无相关性。本研究组考虑这部分症状的发病机制存在非IgE介导的迟发型超敏反应。根据试验结果，本文认为血清中Gal3的表达对鸡蛋过敏的诊断有所帮助。同时，根据过敏性疾病的症状的表现分类，哮喘、荨麻疹的发作及休克的出现，均属于严重过敏反应的前驱表现或已造成严重过敏反应的发生，因此，本文也认为Gal3的表达能从一定程度上反映患者过敏性疾病的发病严重程度。

本试验的结论仍建立在临床现象学的分析上，Gal3参与过敏反应的具体免疫机制仍未明确。因此，应在消化道黏膜上皮细胞进一步探讨细胞信号转导机制，为食物过敏安全的体外检测提供新方向。

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（收稿日期：2017-10-12 本文编辑：李雅南）endprint