尿多酸肽注射液中大孔树脂用量与上样量的研究

王 刚

（泰凌生物制药江苏有限公司，江苏泰州225300）

0 引言

尿多酸肽注射液常与化疗联合应用，可用于晚期乳腺癌、非小细胞肺癌的辅助治疗，近年还用于骨髓增生异常综合征的治疗。在尿多酸肽注射液合成过程中，使用了大孔树脂吸附工艺，树脂吸附后的药液中含有多种活性成分。

经研究，其主要成分为有机酸（马尿酸、苯乙酰谷氨酰胺）和多肽。通过查阅相关参考文献[1-2]，我们分别采用静态吸附和动态吸附两种方式对树脂吸附的上样量进行了考察，检测静态吸附后的药液及动态吸附后的流穿液中的多肽、马尿酸及苯乙酰谷氨酰胺的含量。根据检测结果来确定树脂吸附达到饱和的量，并得出可上柱药液量与树脂用量的比值。

1 静态吸附实验

分别取100 mL处理好的大孔树脂，放入烧杯中，分别加入0160403批次的超滤液900 mL、1 200 mL、1 500 mL、2 000 mL，搅拌25 min后，取适量吸附后溶液，分别测定其中多肽、马尿酸及苯乙酰谷氨酰胺的含量。

2 动态吸附实验

模拟尿多酸肽注射液生产工艺进行小试试验，取120 mL处理好的大孔树脂装柱（径高比为1:2），使液面高出树脂5 cm左右，取0160501-01、0160501-02、0160501-03批次的超滤液各约2.5 L，以60 mL/min的流速上样于已装好的大孔树脂柱中，控制流穿液的流速为60 mL/min，流穿液用接收器接收，每200 mL收集一次，分别测定其中多肽、马尿酸及苯乙酰谷氨酰胺的含量。

3 流穿液中多肽、马尿酸及苯乙酰谷氨酰胺含量的测定

按照已经批准的方法测定流穿液中多肽、马尿酸及苯乙酰谷氨酰胺含量。静态吸附后溶液中多肽、马尿酸及苯乙酰谷氨酰胺含量的测定结果如表1所示。动态吸附后各流穿液中多肽、马尿酸及苯乙酰谷氨酰胺含量的测定结果如表2～表6所示。

动态吸附实验中三批超滤液的各流穿液中多肽以及马尿酸的泄漏曲线分别如图1、图2所示。

表1 静态吸附结果

表2 不同比例上样量与树脂用量下流穿液中多肽的测定结果

表3 不同比例上样量与树脂用量下树脂吸附多肽的结果

表4 不同比例上样量与树脂用量下流穿液中马尿酸的测定结果

表5 不同比例上样量与树脂用量下树脂吸附马尿酸的结果

表6 不同比例上样量与树脂用量下流穿液中苯乙酰谷氨酰胺的测定结果

图1 三批超滤液的各流穿液中多肽的泄漏曲线

图2 三批超滤液的各流穿液中马尿酸的泄漏曲线

4 结语

静态吸附实验结果显示：随着上样量增加，树脂吸附量增加，当上样量与树脂用量体积比为15:1时马尿酸吸附饱和，体积比增至20:1时吸附量不再增加；多肽与苯乙酰谷氨酰胺在上样量与树脂用量体积比为20:1时均未达到饱和。

动态吸附实验结果显示：大孔树脂对各组分的吸附作用有强有弱。随着上样量的增加，多肽组分也逐步增加，即在大孔树脂柱中容易泄漏，上样过程中会流失。多肽的泄漏曲线显示，随着上样量的增加，多肽的泄漏趋势趋于平缓，即上样量与泄漏量处于相对平衡的状态。多肽组分的含量测定不适合作为树脂与上柱药液量的计算依据及树脂饱和终点的判定。

马尿酸及苯乙酰谷氨酰胺不容易泄漏，大孔树脂在一定程度上对马尿酸及苯乙酰谷氨酰胺起到富集的作用。苯乙酰谷氨酰胺含量较小，不适合作为树脂与上柱药液量的计算依据。考虑到马尿酸作为本品的主要活性成分，在质控上有一定的意义，因此选择马尿酸泄漏点作为树脂吸附终点的判定依据，可避免主要有效成分的流失，通过合理计算上样量，可有效控制工艺的稳定性。

因此，采用HPLC法检测马尿酸是否泄漏，可作为判定大孔树脂吸附饱和终点的依据。根据三批超滤液动态吸附结果显示，马尿酸在上样量与树脂用量的体积比值为11.7～13.3时开始泄漏，得到马尿酸的最佳上样量与树脂用量比为11:1。

[1]陈建真，季忆，陈彬.槐花散总黄酮大孔树脂分离纯化的工艺研究[J].中华中医药杂志，2015，30（7）：2607-2609.

[2]韩伟，刘曦.枇杷叶三萜酸的大孔树脂分离纯化工艺[J].南京工业大学学报（自然科学版），2014，36（6）：66-71.