甲硝唑凝胶的皮肤安全性实验研究

王璐茜，张昦昉，王钧，卢海霞，姚春涛

（吉林省药品检验所，吉林 长春 130033）

引言

甲硝唑是常用的抗厌氧菌药物，通常用于治疗炎症性丘疹、脓疱疮、酒渣鼻红斑的局部皮肤用药，为了评价甲硝唑凝胶局部用药的安全性，对甲硝唑凝胶局部应用对皮肤有无刺激性、皮肤过敏性进行了初步考察，为临床用药提供依据[1]。

1 资料与方法

1.1 一般资料

动物：健康白色家兔：雌雄兼用，体重2.0-2.5 kg。来源：长春生物制品研究所。健康白色豚鼠：雌雄兼用，体重250-350 g。来源：山东泰邦生物制品有限公司。试验前动物均在实验动物房环境中适应7 日。常规饲料，不限制饮水。

药物：甲硝唑凝胶（吉林一正药业集团有限公司），甲硝唑凝胶阴性样品（吉林一正药业集团有限公司），2,4-二硝基氯苯（天津光复精细化工研究所），95%乙醇（北京化工厂）

1.2 方法

皮肤刺激性试验：甲硝唑凝胶说明书中未说明本品不得用于皮肤溃破处，所以我们考察了甲硝唑凝胶对正常皮肤及破损皮肤的刺激性。

取12 只长耳白家兔，随机分为正常皮肤组及破损皮肤组，每组6 只。正常皮肤组及破损皮肤组每只家兔左侧给药区涂布甲硝唑凝胶阴性样品0.5 g、右侧给药区涂布甲硝唑凝胶0.5 g。

于实验开始前24 小时，将家兔家兔脊柱两侧用电推去毛，每侧去毛范围为（3 cm×3 cm）。破损皮肤组家兔在用药部位用12 号针尖划“井”以渗血为度。采用同体左右侧自身对照法，每只家兔左侧给药区涂布甲硝唑凝胶阴性样品0.5 g、右侧给药区涂布相同体积的甲硝唑凝胶供试品，然后用二层纱布（3 cm×3 cm）和一层玻璃纸覆盖，用无刺激胶布固定。敷贴4h 后用温水清洁给药部位。每日一次，连续14 d，每日观察敷贴前、敷贴后1 小时及末次敷贴后24、48、72 h 家兔背部给药区皮肤有无红斑、水肿、色素沉着、出血点、皮肤粗糙、皮肤菲薄等情况。

Buehler（BT）试验：经过预实验，甲硝唑凝胶选用0.2 g/只为诱导及激发剂量，称取0.1 g 2,4-二硝基氯苯，加95%热乙醇2 ml 溶解，再加纯化水稀释至10 ml 混匀，制成1%的2,4-二硝基氯苯溶液作为阳性药溶液选用0.2 ml/只为诱导及激发剂量。

取健康豚鼠40 只，体重250-350 g，随机分为3 组，阴性和阳性对照组各10 只、供试品组20 只。于实验开始前24 h，将豚鼠背部面积为（2 cm×2 cm）的给药区进行脱毛并标号称重。第0、7 和14 d，供试品组每只涂布供试品0.2 g；阳性对照组同法涂布1%的2,4-二硝基氯苯溶液；阴性对照组同法涂布甲硝唑凝胶阴性样品；并用封闭片局部固定6 小时，然后用温水清洁给药部位并观察1-24 h 后动物有无过敏反应症状。第27 d 称重后，供试品组每只在未给药的肋腹部（于实验前1 日进行面积为（2 cm×2 cm）的脱毛处理）涂布供试品0.2 g；阳性对照组同法涂布1%的2,4-二硝基氯苯溶液；阴性对照组同法涂布甲硝唑凝胶阴性样品；采用封闭片局部固定6 h，然后用温水清洁给药部位并观察24-48 h 后动物有无过敏反应症状。

2 结果与分析

2.1 皮肤刺激性试验 按照《药物研究技术指导原则》[2]皮肤刺激性试验规定进行评价，按下列公式计算每天每只动物平均积分，观察结果见表1，甲硝唑凝胶对家兔正常皮肤及破损皮肤均无刺激性。

表1 甲硝唑凝胶皮肤多次皮肤刺激性试验结果

2.2 Buehler（BT）试验 按照《药物研究技术指导原则》[2]皮肤变态反应试验规定进行评分及皮肤过敏性强度评价，给予豚鼠甲硝唑凝胶未见皮肤过敏反应，给予豚鼠阳性对照药表现为极强致敏反应。

3 结论与讨论

甲硝唑凝胶连续多次给药试验中家兔正常皮肤对凝胶未见红斑与水肿，而破损皮肤仅在最初几天出现轻微红斑，并且随着试验天数增加逐渐恢复，在第3 天家兔皮肤均已正常无红斑，总体评分甲硝唑凝胶对正常皮肤及破损皮肤均无刺激性；皮肤过敏试验（BT 法）中，甲硝唑凝胶与阴性样品的豚鼠皮肤均未见红斑与水肿，而阳性对照组均有不同程度的红斑水肿情况，总体评分甲硝唑凝胶未引起豚鼠的皮肤过敏反应。综上所述，甲硝唑凝胶在正常皮肤和破损皮肤上均可使用，用于局部给药是一种较为安全的治疗药物。