纳豆+甘麦大枣加味汤对气虚血瘀证大鼠血液流变学和凝血功能的影响

2018-03-02李雅君程嘉艺

长春中医药大学学报 2018年1期

李雅君，程嘉艺

（辽宁中医药大学，沈阳 110032）

气虚血瘀证是血瘀证常见的一种临床症状，存在于诸多疾病的不同病理阶段和病程，病因复杂，常见于老年人心脑血管疾病，随着近年来，我国老龄化日益严重，防治老年人气虚血瘀证刻不容缓[1-2]。甘麦大枣汤出自医圣张仲景的《金匮要略》，该方由3味药食同源中药甘草、小麦和大枣组成，主要治疗妇人脏躁等疾病[3]，“朱氏妇科”[4-5]第三代传人朱南孙教授认为，甘麦大枣汤能养心安神，补益脾肾之气。本文在原方3味药中加入姜黄、当归、人参、山药、山楂等补气活血化瘀药食同源中药。使各味中药相互配伍，增强补血益气的作用。本实验通过观察纳豆+甘麦大枣加味汤对气虚血瘀证大鼠血黏、凝血4项等指标的影响，为甘麦大枣加味汤益气活血化瘀的研究提供一定的实验依据。

1 材料

1.1 动物 SPF级Wistar大鼠70只，雌雄各半，体质量（200±20） g，购于本溪长生生物有限公司，合格证号：SCXK（辽）2015-0001。

1.2 药品与试剂 PT测定试剂盒（批号R6007），APTT测定试剂盒（批号R4007），Fib测定试剂盒（批号R6011），TT测定试剂盒（批号546768）。戊巴比妥钠由辽宁中医药大学实验室提供（批号1021N038），柠檬酸钠抗凝管（许可证编号，湘食药监械生产许20150049）。肝素钠抗凝管（许可证号，冀食药监械生产许20100418）。

1.3 主要仪器半自动血液流变仪LBY-N6K，北京普利生仪器有限公司；Sysmex CA510型全自动血凝分析仪，日本Sysmex株式会社。

1.4 供试品溶液制备甘麦大枣加味汤（人参、当归、大枣、姜黄、甘草各10 g，淮小麦20 g，山药、炒山楂各15 g），各味药材加入10倍量水，浸泡30 min，加热回流煎煮2次，1 h/次，滤过，合并煎煮液，浓缩至100%浓度，放至冰箱4 ℃冷藏备用。补阳还五汤煎煮方法与甘麦大枣加味汤相同，以上药材购于辽宁众意愿大药房，药材经辽宁中医药大学中药鉴定室翟彦君教授鉴定符合2015年版《中国药典》1部相关项要求。纳豆粉购于辽宁天润生物技术有限公司，使用时用温水冲开。

2 方法

2.1 分组及给药将雌雄各半的70只Wistar大鼠按照体质量随机分成7组，即空白组，模型组，阳性药组14.0 g生药/kg，纳豆＋甘麦大枣加味汤高剂量组（1.875＋12.5 g）生药/kg、中剂量组（1.875＋6.25 g）生药/kg、低剂量组（1.875＋3.125 g）生药/kg，纳豆组1.875 g纳豆/kg，造模时，除空白组正常饮食饮水外，其余各组每天将大鼠放入水温14～16 ℃，水深（35±5）cm，直径为50 cm的水桶中进行游泳，以每组大鼠自然沉降没入水中5s-1不能自主上浮为其疲惫标准，当全组有50%出现自然沉降时，全组停止游泳捞出，使之暴露于空气中自然晾干[6]，除正常组外，其余各组大鼠按照40 g/（kg·d）[7]提供饲料，灌胃给药1次/d，连续60 d，取血前大鼠禁食24 h，不禁水，每10 d测定体质量1次。

2.2 血流变指标测定取血前用戊巴比妥钠30 mg/kg麻醉，腹主动脉取血，2 mL测定全血黏度，取3 mL以3 000 r/min，离心15 min，测定血浆黏度。

2.3 凝血4项测定腹主动脉取血2 mL以3 000 r/min，离心15 min，分离血浆，按照凝血4项试剂盒说明书进行。

2.4 统计学方法采用SPSS 17.0统计软件处理所得到的数据，选用one-wayANOVA进行统计处理，数据用均数±标准差表示，以P＜0.05为差异有统计学意义。

3 结果

3.1 大鼠造模前后表征及体质量变化比较见表1。

表1 大鼠造模前后表征及体质量变化比较（x± s，n = 10） g

3.2 对大鼠血液流变学指标的影响见表2。

3.3 对大鼠凝血功能的影响见表3。

表2 对大鼠血液流变学指标的影响（x± s，n = 10）

表3 对大鼠凝血功能的影响(x± s ，n = 10）

4 讨论

中医认为，气为血之帅，气行则血行，气虚则不能推动血液正常的运行，导致血瘀，气虚血瘀是血瘀证常见的一种类型。血液流变学、凝血功能是判别血瘀证的一项重要指标[8]，陈可冀[9]院士从临床治疗学角度，根据血液流变学的变化将血瘀证分为血瘀证Ⅰ型和血瘀证Ⅱ型，大多数血瘀证可以归为Ⅰ型，主要表现为高血黏、高纤维蛋白原血症、高血栓素水平，即血液“浓”“黏”“凝”“聚”，有血栓栓塞疾病的倾向。血瘀证Ⅱ型，部分疾病属于这一类型，主要表现为血液黏度低、血浆蛋白等有形成分不足，或者某一凝血功能不足等，常见贫血症、部分月经病、肝硬化等。本实验的造模结果为气虚血瘀组血液黏度低（P＜0.01）、纤维蛋白原等凝血因子显著不足（P＜0.01），与庞树玲[6]、王晚霞[10]等实验结果基本一致。本文采用饥饿和力竭游泳复合因素方法造模，《灵枢·五味篇》曰：“谷不入半日则气衰，一日则气少矣，”后天来源长时间不足，气血生化之源匮乏，低温刺激，寒邪入体内，血流不畅，劳则耗气，过度疲劳，正气损伤。符合中医气虚血瘀致病因素。

血液的高切黏度反映的是红细胞的变形能力对血液黏度的影响，低切反映的是红细胞的聚集力对血液黏度的影响，而中切处于二者之间[11]。血液中的红细胞含量减少会使血液黏度下降[12]。大部分血瘀呈“浓”“黏”“凝”“聚”，部分血瘀证会出现低凝、低黏或者更复杂的状态，血液低凝低黏状态不能代表血行通畅。现代研究发现，在疾病的某些阶段，机体的凝血与抗凝过程发生紊乱，凝血酶增多，凝血系统、血小板被激活，血液凝固性增高，血小板聚集，体内微循环中有广泛的微血栓生成，导致凝血因子大量的消耗，继发性纤溶亢进而出现低凝、低黏及出血症状[13-14]，本研究未见出血，但实验的气虚血瘀模型组全血黏度高切、中切、低切和纤维蛋白原等凝血因子均明显降低（P＜0.01）。本实验给药后，纳豆+高、中剂量组在高切和中切的切变率下血液黏度、Fib含量显著升高（P＜0.05），具体机制需进一步研究。

凝血酶原时间（PT）是检测机体外源性凝血系统，PT的延长反映凝血因子Ⅶ、Ⅹ、Ⅴ、Ⅱ 和Ⅰ的含量降低；APTT检测机体的内源性凝血系统，APTT降低反应凝血因子Ⅻ、Ⅺ、Ⅴ、Ⅱ和Ⅰ的含量升高[15]，在临床上，血瘀证是一个复杂的病证，由于患病的程度和时间不同，同一机体中，可能同时存在血瘀证Ⅰ型和血瘀证Ⅱ型，本研究中，气虚血瘀模型组大鼠PT延长，APTT降低，各个给药组给药后PT含量显著下降（P＜0.01），而对APTT无任何改善，纳豆+甘麦大枣加味汤对外源性凝血系统有显著效果，但对内源性凝血系统效果不佳。

甘麦大枣加味汤中，人参大补元气，当归补血，小麦养心安神，除烦，大枣补气安神，山药补脾肺气，姜黄活血化瘀，山楂祛瘀，甘草调和诸药，诸药配伍，具有补气活血化瘀，治标亦治本。现代药理学研究表明，人参[16]中的人参皂甙能促进造血干细胞增殖分化，改善低黏状态的血液黏度；当归[17]中的当归多糖能够升高全血黏度，增强红细胞聚集性；山楂[18]中的黄酮能够直接扩张外周血管，增加血流量。本实验结果证明，纳豆+甘麦大枣加味汤可以改善大鼠血液低黏、低凝状态，表明纳豆+甘麦大枣加味汤对气虚血瘀具有很好的补气化瘀的作用。

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