桑枝多糖对糖尿病小鼠肾脏的保护作用※

李永智

（中国医科大学附属第四医院泌尿外科，辽宁 沈阳 110032）

肾脏疾病是世界公共卫生关注的问题，我国患病率约9.4%，糖尿病是诱发慢性肾病的主要因素，糖尿病合并肾病的患者占糖尿病的20%～40%[1]，是糖尿病最多见的并发症，糖尿病肾病晚期出现肾衰、氮质血症等是导致死亡的病因之一。糖尿病肾病的发病机制复杂，主要与炎症反应、氧化应激等因素有关。多项研究[2]表明，桑枝多糖是桑枝的主要成分，桑枝具有降糖降脂、调节免疫、抗氧化等功效。本研究造糖尿病小鼠模型后，观察桑枝多糖对小鼠血清炎性因子及肾脏氧化因子的影响，探讨桑枝多糖对糖尿病小鼠肾脏保护的作用机制。

1 资料与方法

1.1 试剂与仪器 链尿佐菌素（STZ） （美国Sigma公司生产），考马斯亮蓝蛋白试剂盒、锰超氧化物歧化酶（Mn-SOD） 试剂盒、丙二醛（MDA） 试剂盒、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）试剂盒（均由南京建成生物有限公司生产）。卓越金锐血糖仪、卓越金锐血糖试纸（均由德国罗氏诊断有限公司生产），全自动生化分析仪（日立公司生产），低温高速离心机（德国西门子公司生产）。

1.2 药物 配制桑枝多糖：将桑枝粗粉1 kg，溶入6000 mL乙醇浓度为80%，经过4次提取、过滤、减压后，再加入2000 mL双蒸水，经过3次提取、过滤，合并滤液后离心、浓缩为250 mL，去蛋白，加入三氯甲烷-正丁醇萃取。4℃冰箱过夜，低温高速离心10 min后过滤，加入95%乙醇，醇沉24 h，抽滤后收集滤渣，将滤渣洗涤3次分别经过乙醚、无水乙醇、丙酮，即为桑枝多糖，经测定含桑枝多糖纯度为85.6%。缬沙坦（由北京京丰药物公司生产）。

1.3 动物造模及分组 选取SPF级KM小鼠70只，体质量（18±2）g，购自中国医科大学动物实验中心，动物许可证号SCXK-LN2017-0002，适应性喂养1周。造模前禁食水12 h，除对照组15只外，所有小鼠经尾静脉注入120 mg/kgSTZ药物造模，72 h后经尾巴采血测空腹血糖（FBG），FBG＞11.1 mmol/L为糖尿病模型制造成功。将造模成功的小鼠随机分为模型组、缬沙坦组、桑枝多糖组，各15只，缬沙坦组给予灌胃20 mg/kg，桑枝多糖组给予灌胃120 mg/kg，对照组、模型组给予灌胃等量生理盐水，均每日1次，连续给药6周。

1.4 采集标本 所有小鼠禁食水12 h后，采集腹主动脉血，经全自动生化分析仪测定血清中FBG、IL-6、TNF-α含量。取所有小鼠的肾脏，参照试剂盒的操作方法，分别检测肾脏组织内Mn-SOD、MDA、GSH-Px含量。

1.5 统计学方法 采用SPSS 19.0统计分析，计量资料以（x±s）表示，多组间采用方差分析，方差不齐时采用非参数秩和检验，P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 4组小鼠血清中FBG、IL-6、TNF-α含量比较 与模型组比较，对照组、缬沙坦组、桑枝多糖组FBG、IL-6、TNF-α明显降低，差异有统计学意义P＜0.01。与缬沙坦组比较，桑枝多糖组IL-6、TNF-α明显降低，差异有统计学意义（P＜0.01）。见表1。

表1 4组小鼠血清中FBG、IL-6、TNF-α含量比较 （x±s）

2.2 4组小鼠肾脏组织中Mn-SOD、MDA、GSH-Px含量与模型组比较，对照组、缬沙坦组、桑枝多糖组Mn-SOD、GSH-Px明显增高，MDA明显降低，差异有统计学意义（P＜0.01）。与缬沙坦组比较，桑枝多糖组Mn-SOD、GSH-Px明显增高，MDA明显降低，差异有统计学意义 （P＜0.01）。见表2。

表2 4组小鼠肾脏组织中Mn-SOD、MDA、GSH-Px含量（x±s）

3 讨论

桑枝中含有较多活性成分如多糖、生物碱、黄酮类化合物等，其中多糖是最主要的活性成分，它具有增强免疫、抗氧化、抗病毒、降血糖等作用[3]，临床上常将多糖类药物用于治疗肿瘤、心脑血管病、糖尿病等疾病，桑枝多糖的降血糖机制可能是修复了胰岛的β细胞，改善了细胞功能，增强胰岛素的分泌，达到降糖的目的。研究[4]表明，多糖类药物能够清除氧自由基，增强抗氧化反应，减少脂质过氧化产物。高血糖时，细胞内发生氧化应激反应，NF-кB等细胞转录因子激活，NF-кB调节IL-6、TNF-α、单核细胞等炎性细胞因子释放，诱发炎症反应。Mn-SOD和GSH-Px具有清除氧自由基的作用，MDA是脂质过氧化产物，均能反映肾脏组织发生氧化应激的程度。

本研究结果显示，桑枝多糖明显降低糖尿病小鼠血清中血糖、IL-6、TNF-α含量，考虑桑枝多糖通过减少肾脏的毒性，减少肾脏的炎性反应，进一步保护肾组织。本研究显示桑枝多糖组肾组织Mn-SOD、GSH-Px明显增高，MDA明显降低。说明桑枝多糖清除氧自由基能力较强，抑制过氧化反应，减少氧自由基损伤肾组织，保护肾脏。

总之，桑枝多糖能够减少糖尿病小鼠血清中炎症因子，减少肾组织过氧化反应，进而对肾组织起到保护作用。

[1]汪会琴，胡如英，武海滨，等.2型糖尿病报告发病率研究进展[J].浙江预防医学，2016，3(1):37-39，57.

[2]Skarra D V，Thackay V G.FOXO1 is regulated by insulin and IGF1 in pituitary gonadotropes[J].Mol Cell Endocrinol，2015，405(15):14-24.

[3]倪伟建，丁海华，唐丽琴，等.小檗碱对糖尿病肾病大鼠肾组织VEGF表达的影响[J].中国药理学通报，2015，31（6）：795-800.

[4]宿世震，项东宇，刘杰，等.桑枝黄酮对糖尿病肾病大鼠的保护作用[J].中国老年学杂志，2017，15（37）：3697-3699.