酒精依赖患者外周血肿瘤坏死因子水平与认知功能的相关性研究

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(临沂市精神卫生中心，山东 临沂 276005)

酒精依赖(Alcohol dependence，AD)是指个体对饮酒有强烈和迫切的渴求，在完全或部分停止饮酒后出现生理以及心理戒断症状，常常导致多种躯体疾病、精神障碍及神经心理认知功能损害[1-2]，其中认知功能的损害对患者工作、独立生活、维持社会关系等方面均有不利影响。对于AD患者，生理症状容易戒除，但心理症状一般很难戒除。既往研究认为AD患者认知功能的损害可以影响患者对自身症状的认识以及治疗的依从性。因此，在临床工作中及时发现酒依赖患者的认知功能损害，了解其发生发展规律及相关影响因素，对治疗以及预防AD具有重要意义。既往研究表明[3-5]：过量饮酒会损伤躯体和重要脑区，导致外周和中枢性神经系统炎症的发生，出现血液中炎症细胞因子的改变。近年来，越来越多的研究发现炎症细胞因子与认知功能相关[6-7]，而目前对AD患者血液中炎症细胞因子改变及其与认知功能的关系研究相对较少。TNF-α是神经、内分泌、免疫调节系统中的关键介质，具有双重、多样及网络性生物效应。本研究选取TNF-α作为检测对象，比较AD患者与正常人群外周血中TNF-α水平的差异，并在AD患者中探讨外周血TNF-α水平与认知功能、AD的相关性，从而提高对AD患者血液中炎症细胞因子改变及其与认知功能关系的认识。

1 资料与方法

1.1一般资料 选取2018年1月-9月本院收治的32例AD患者为研究对象。由两名精神科医师对入选患者进行AD的一致性诊断，要求病例资料完整。入选标准：(1)符合《国际疾病分类第十版》(ICD-10)AD诊断标准；(2)治疗时间>1周、戒断症状控制稳定，可以配合试验；(3)年龄≥18周岁；(4)知情同意合作者。排除标准：可能影响认知功能的疾病(如严重的帕金森病)；自身免疫疾病；近期有感染史；严重的心、肺、肝、肾疾病及肿瘤。所有AD患者均具备颅脑CT或MRI影像学资料，记录患者的高血压病、糖尿病、高低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)血症、冠心病、自身免疫性疾病等病史信息。AD组：32例，均为男性，年龄28～46岁，平均(38.2±6.1)岁。采用频数匹配的方法从同一时期本院体检中心选择性别、年龄与AD患者匹配且认知功能正常的31例健康体检人员作为对照组，均为男性，年龄28～46岁，平均(38.3±6.4)岁。两组间年龄差异无统计学意义(P>0.05)。该研究由本院伦理委员会批准。

1.2方法

1.2.1认知功能和AD评定 采用广州康泽医疗科技有限公司开发的计算机化成套认知功能测评，系统用于对患者5个认知功能维度进行测评，主要包括：(1)加工速度：连线测验、符号检索和编码测验；(2)注意：持续操作测验；(3)言语工作记忆：数字广度和数字序列；(4)视觉空间工作记忆：空间广度顺序和空间广度倒背；(5)执行抑制：Stroop词语、Stroop色词和Stroop词色。同时采用酒精使用障碍筛查问卷对患者AD状况进行评估。

1.2.2血清TNF-α测定 采集受试者静脉血5 ml，4℃下800 g离心10 min，取血清，分装于600μl EP管中(200μl/管)，置于-80℃超低温冰箱保存备用。采用酶联免疫吸附(ELISA)法测定TNF-α，按照说明书进行操作。采用酶标仪于450 nm波长下读取吸光度值，依据标准曲线获取相应炎症细胞因子浓度(pg/ml)。

1.3统计学处理 采用SPSS22.0软件进行数据处理。计量资料以(x±s)表示，组间比较采用独立样本t检验；TNF-α与认知功能、AD相关性采用Pearson相关分析法。采用非条件logistic回归进行AD影响因素的分析。

2 结果

2.1两组血清TNF-α和认知功能的比较 AD组血清中TNF-α水平高于对照，连线测验、编码测验、Stroop词语、Stroop色词和Stroop词色量表分低于对照组，见表1。

2.2单因素分析 结果表明：TNF-α水平与饮酒年限、日饮酒量呈中度正相关；连线测验、编码测验、持续操作测验、数字广度、数字序列、空间广度顺序、空间广度倒背、Stroop色词、Stroop词色与年龄均呈负相关；连线测验、符号检索、编码测验、持续操作测验、数字序列、空间广度顺序、Stroop词语、Stroop色词、Stroop词色与饮酒年限均呈负相关；符号检索、编码测验与日饮酒量呈负相关；依赖总分与连线测验、编码测验、持续操作测验、数字广度、数字序列、空间广度倒背均呈负相关，见表2。

2.3TNF-α与认知功能的相关性分析 TNF-α与连线测验(r=-0.434，P<0.05)、符号检索(r=-0.372，P<0.05)、Stroop色词(r=-0.426，P<0.05)、持续操作测验(r=-0.466，P<0.01)均呈负相关。

2.4影响AD的多元逐步回归分析 以AD总分为因变量，以年龄、饮酒年限、日饮酒量、认知功能、TNF-α为自变量进行多元逐步回归，结果显示：饮酒年限、Stroop词色、数字广度、日饮酒量、空间广度顺序和数字序列进入回归方程，见表3。

表1 两组肿瘤坏死因子和认知功能的比较

注：*P<0.01

表2 AD患者血清TNF-α及认知功能的单因素分析(r)

注：*P<0.05，**P<0.01

表3 影响AD的多元逐步回归分析

3 讨论

近年来，越来越多的研究发现炎症与精神疾病的发病有一定的相关性[8]。本研究结果显示：与对照组相比较，AD组血清TNF-α水平显著升高，与饮酒年限、日饮酒量存在相关性，TNF-α水平的升高提示AD患者体内存在免疫激活的现象。既往研究显示[3-5]：乙醇在中枢和部分外周器官均有局部促炎作用。中枢和外周的炎性因子可以相互影响，中枢的炎症可以促进外周血细胞炎性因子的释放；外周的炎症因子也可以改变血-脑脊液屏障的通透性，促进炎性因子进入中枢[9-10]，可以解释本研究中TNF-α的升高，相应的饮酒年限越长，日饮酒量越大对机体损伤越大，TNF-α的升高越明显。

AD组连线测验、编码测验、Stroop词语、Stroop色词和Stroop词色量表分低于对照组，提示AD患者存在加工速度和执行抑制方面的认知功能损害。一般认为酒精可以通过以下几种方式影响认知：(1)酒精直接作用于神经细胞本身；(2)酒精作用于神经递质、受体及第二信使系统；(3)酒精长期作用使细胞膜、神经递质或受体发生改变；(4)酒精依赖患者饮食习惯及消化功能改变，导致维生素缺乏；(5)与酗酒相关的代谢性改变；(6)长期饮酒引起脑血流降低；(7)AD对外周器官的损害(肝病)间接影响中枢神经系统。通过上述方式酒精导致患者认知功能的影响，因作用机制复杂和个体差异，酒精所致饮酒者认知功能的改变并不一致。

相关分析还显示：TNF-α与连线测验、符号检索、Stroop色词、持续操作测验均呈负相关，说明升高的TNF-α与AD患者的加工速度、注意和执行抑制相关。Kanba提出假说认为：细胞因子可以对外周和大脑同时产生影响，在大脑主要激活小胶质细胞引起一些细胞因子水平及氧自由基水平升高，进而使神经元及突触损伤、变性，引起认知功能损伤，说明AD患者体内TNF-α的改变可能引起认知功能的改变。

相关和回归分析结果表明，饮酒年限、Stroop词色、数字广度、日饮酒量、空间广度顺序和数字序列是酒依赖的影响因素，说明饮酒年限越长、日饮酒量越大以及执行抑制、言语工作记忆、视觉空间工作记忆功能的损伤越明显，AD程度越重。慢性和长期的饮酒会引起脑内奖赏通路结构重塑以及功能下调，导致机体脱离酒精后出现心慌、多汗等不适感[11]，出现负性强化作用，脑内奖赏通路功能在酒精的作用下达成新的适应状态，负性强化作用强迫个体进行饮酒行为，形成对酒精的依赖[12]。因此，饮酒年限越长，饮酒量越多，可能导致酒精依赖的程度也就越严重。执行功能一般定义：为了以灵活的方式完成某一特殊目标所进行的各种加工的联合运作，主要与前额叶皮层相关。Naim-Feil等[13]认为酒依赖患者存在执行功能损害，并且损害的执行功能与长期饮酒和酒精渴求有关。因此，损害的执行功能可能导致酒精依赖的发生。工作记忆是记忆的核心成分，负责获取当前的信息，与长时记忆中的信息相联系。Lechner研究显示[14]工作记忆的损伤影响AD患者对酒精节制能力，相应的节制能力的降低将导致酒依赖的发生。

综上所述：AD患者存在TNF-α水平的升高和认知功能损害，且血清TNF-α水平与认知功能相关，但与患者的AD严重度无明显相关性；饮酒年限、日饮酒量和认知功能可能是AD的影响因素。但本实验样本偏少，且对酒依赖者未作长期随访，对于其更长时间的TNF-α水平升高和认知损害情况尚无法得知。同时本研究为横断面研究，无法说明TNF-α水平的升高和认知功能损害的先后性；另外，患者TNF-α水平的升高和认知功能损害的影响因素较多，需要进一步的研究。