血清RF、抗CCP抗体和AFA抗体联合检测在早期诊断类风湿关节炎中的价值

陈晓宇

[摘要] 目的 探討血清类风湿因子（rheumatoid factor，RF）、抗环瓜氨酸肽（cyclic citrullinated peptide，CCP）抗体和抗聚角蛋白微丝蛋白抗体（antifilaggrin antibody，AFA）联合检测对早期诊断类风湿关节炎（rheumatoid arthritis，RA）的临床价值。 方法 选取2016年1月～2018年1月我院风湿免疫科收治的75例RA患者设为研究组，另选取非RA患者105例设为对照组。以免疫散射比浊法测定血清RF水平，ELISA法检测抗CCP抗体和间接免疫荧光法测AFA抗体水平，回顾性统计分析三项指标与RA发病的相关性，血清RF、抗CCP抗体、AFA抗体单独检测与不同组合下联合检测诊断RA的价值。 结果 研究组三种指标联合检测检出率最高，为81.33%；单独检测AFA抗体检出率最低，为46.67%；研究组和对照组各项指标检出率比较，差异有统计学意义（P<0.05）；回归分析各指标系数均为正值，OR值均大于1（P<0.05）；单独检测中，灵敏度以RF最高（73.33%），特异性最高的是AFA抗体（98.10%），阳性预测值、阳性似然比以AFA抗体最高（94.59%，24.50），阴性预测值以RF、抗CCP最高（二者相近，分别为79.80%、79.03%），阴性似然比以RF最低（0.35）；联合检测中，灵敏度、特异度、阳性预测值、阴性预测值以RF+抗CCP+AFA最高，阴性似然比以RF+抗CCP+AFA最低（0.19）。 结论 血清RF、抗CCP抗体、AFA抗体均是RA的正相关危险因素，血清RF+抗CCP+AFA抗体联合检测能显著提高单独指标阳性者RA诊断率，更好的估计RA患病率。

[关键词] 类风湿因子；抗CCP抗体；AFA抗体；类风湿关节炎

[中图分类号] R593.22 [文献标识码] A [文章编号] 1673-9701（2018）32-0001-04

The value of combined detection of serum RF， anti-CCP antibody and AFA antibody in the early diagnosis of rheumatoid Arthritis

CHEN Xiaoyu

Clinical Laboratory， Jiujiang First People's Hospital in Jiangxi Province， Jiujiang 332000， China

[Abstract] Objective To investigate the clinical value of combined detection of serum rheumatoid factor（RF）， anti-cyclic citrullinated peptide （CCP） antibody and anti-filaggrin antibody （AFA） in the early diagnosis rheumatoid arthritis （RA）. Methods A total of 75 RA patients who were admitted to the rheumatology and immunology department in our hospital from January 2016 to January 2018 were selected as the study group. Another 105 patients with non-RA were selected as the control group. The serum RF levels were determined by immunoturbidimetry. ELISA assay was used to detect anti-CCP antibodies and indirect immunofluorescence assay was used to detect AFA antibody levels. Retrospective statistical analysis was carried out for the correlation between the three indicators and the incidence of RA， as well as the value of serum RF， anti-CCP antibody， AFA antibody detection alone and different combined detections in the diagnosis of RA. Results The combined detection rate of the three indicators in the study group was the highest， which was 81.33%； the detection rate of AFA antibody alone was the lowest， which was 46.67%； there was statistically significant difference in the detection rate of all indicators between the study group and the control group（P<0.05）； regression analysis showed that all index coefficients were positive， and the OR values were all greater than 1（P<0.05）； in the single detection， the sensitivity was the highest in RF（73.33%）. The specificity was the highest in AFA antibody （98.10%）. The positive predictive value and positive likelihood ratio were the highest in AFA antibody （94.59%， 24.50）. The negative predictive value was the highest in RF and anti-CCP （the two were similar， 79.80%， 79.03%， respectively）. The negative likelihood ratio was the lowest in RF（0.35）； in the combined detection， sensitivity， specificity， positive predictive value， and negative predictive value were highest in RF+anti-CCP+AFA. The negative likelihood ratio was the lowest （0.19） in RF+anti-CCP+AFA. Conclusion Serum RF， anti-CCP and AFA antibodies are positive risk factors for RA. The combined detection of serum RF+anti-CCP+AFA antibody can significantly improve the diagnostic rate of RA in individuals with positive index alone， and better estimate the morbidity of RA.

[Key words] Rheumatoid factor （RF）； Anti-CCP antibody； AFA antibody； Rheumatoid arthritis （RA）

類风湿关节炎（rheumatoid arthritis，RA）是一种以手、腕等关节进行性功能障碍、肿痛、变形、受损，反复发作的、多系统性炎性自身免疫性疾病，发作缓慢，且比较隐匿，可引起不可逆的骨关节破坏，一旦发生需要长期服药控制病情。据报道统计，我国RA患者有300多万人[1]，已成为劳动力丧失的重要原因[2]，多见于25～50岁中年女性。由于RA患者的早期表现不明显，但是至今还没有公认的实验室诊断指标，目前临床上多参照美国风湿病学会提出的7项标准对RA进行诊断，并辅以临床表现、影像学检查如X射线以及实验室检查如RF，但当患者符合该诊断标准时，其骨关节通常已发生损坏。且RF特异性较差，早期诊断正确率低，常造成误诊、漏诊，给RA的早期诊断带来一定困难[3]。因此，我们需要找到更简便实用的、灵敏度和特异度较高的检测指标或联合方法，对RA行早期诊断。随着临床对RA血清学研究不断深入，发现多数自身抗体对在活化后的自身抗原的淋巴细胞或浆细胞产生，近年来国内外相继已在RA中发现RF、抗CCP抗体、抗聚角蛋白微丝蛋白抗体（AFA）、抗角蛋白抗体（antikeratin antibody，AKA）[4]、抗Sa、抗BiP抗体[5]、抗核周因子抗体（antiperinuclear factor autoantibody，APF）[6]等多种自身抗体，具有较高特异性，且许多指标于RA发病早期便可出现异常[7]。本研究旨在通过检测血清RF、抗CCP抗体和AFA抗体三项指标，探讨其在RA诊断中单一及联合检测的价值，为RA的早期诊断提供依据，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

随机选取选取2016年1月～2018年1月我院风湿免疫科门诊就诊及住院收治的75例RA患者设为研究组，均符合2010年美国风湿病协会的新RA诊断分类标准[8]。其中男32例，女43例，平均年龄（45.3±12.6）岁，病程均≤1年，正规治疗≤0.5年；另选取其他自身免疫性疾病非RA患者或健康体检者105例设为对照组，其中男44例，女61例，平均年龄（44.8±13.0）岁；其中系统性红斑狼疮（systemic lupus erythematosus，SLE）26例、血清阴性脊柱关节病12例、骨性关节炎13例、原发性干燥综合征8例、强直性脊柱炎11例，正常健康体检者35例，相关诊断皆符合国内相应标准[9-11]。所选病例及方案经伦理学委员会批准，患者皆已知情同意，并签署知情同意书。

1.2 检测方法

所有研究对象均空腹，在清晨抽取静脉血，采血后立即将血清离心分离，备用。RF定量检测采用胶乳增强散射比浊法进行检测，试剂为配套试剂，使用美国贝克曼库尔特公司IM-MAGE特定蛋白分析仪。RF>20 IU/L判为阳性，RF<20 IU/L判为阴性；抗CCP抗体和抗AFA抗体检测均采用酶联免疫吸附法测定[12]，EXL800酶标仪（美国BIOTEK公司），严格按照德国欧蒙试剂盒说明书进行操作，抗CCP抗体>25 RU/mL为阳性，抗CCP抗体<25 RU/mL为阴性；抗AFA抗体同上。

1.3 观察指标

分析其三者单独以及联合检测的灵敏度以及特异度等诊断指标。①灵敏度；②特异度；以及相应诊断实验指标阳性预测值、阴性预测值、阳性似然比、阴性似然比；③OR（odds ratio）值：当OR值>1，OR值越大，表明相应指标与疾病相关性越高，是一种危险因素[13]。

1.4 统计学方法

采用SPSS22.0软件对所得数据进行统计分析，危险因素相关性分析采用Logistic回归分析；计数资料采用χ2检验，以P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 两组RF、抗CCP抗体、AFA抗体单独检测与联合检测结果

研究组和对照组的单独检测和联合检测结果如表1所示，研究组三种指标联合检测检出率最高，为81.33%；单独检测AFA抗体检出率最低，为46.67%；研究组和对照组各项指标检出率比较，差异有统计学意义（P<0.05）。

2.2 RA发病相关危险因素分析

Logistic回归分析显示，血清RF、抗CCP抗体、AFA抗体OR值均>1，表明三项指标皆为RA发病的危险因素（P<0.01），且关联强度较强。

2.3 血清RF、抗CCP抗体、AFA抗体指标单独及不同组合联合检测在RA诊断中的各项结果分析

单独检测中，灵敏度以RF最高（73.33%），但RF特异性最低（75.23%），特异性最高的是AFA抗体（98.10%），阳性预测值、阳性似然比以AFA抗体最高（94.59%，24.50），RF最低（67.90%，2.96），阴性预测值以RF、抗CCP最高（二者相近，分别为79.80%、79.03%），阴性似然比以RF最低（0.35）；联合检测中，灵敏度、特异度、阳性预测值、阴性预测值以RF+抗CCP+AFA最高（81.33%、100.00%、100.00%、88.24%），阴性似然比以RF+抗CCP+AFA最低（0.19）。表明三者联合检测能显著提高诊断单独指标阳性者RA患病率，更好的估计RA患病率。

3 讨论

RA是一种自身免疫性结缔组织疾病，致残率较高，多见于中年女性，RA主要以关节滑膜炎症与增生为主要病理改变[14]，主要表现为关节慢性炎症，影响患者日常生活。若RA未得到及时诊断、治疗，则会对机体活动产生严重影响，引发不可逆性骨关节系统损害[15]，甚者丧失劳动能力，其治疗和康复护理对患者、家庭及社会来说，在精神和经济方面均造成很大压力。因此，现阶段临床学者对RA治疗的研究，逐渐转为以如何早期诊断、早期干预及阻断疾病进程为主。

以血清指标检测诊断RA，为近年临床上的重要方式，其中RF为重要血清学指标之一，该指标灵敏度较高，在RA发病初期便会异常增高，其滴度和RA病情具有密切负相关性，为疾病损伤及预后评估中的重要因子。但其特异度偏低，在系统性红斑狼疮、恶性肿瘤、原发性干燥综合征等疾病患者，甚至是健康老年个体中，均可出现血清RF水平上升，极易造成漏诊或误诊[16]，增加RA早期诊断难度，使患者错失最佳治疗时机。本研究结果显示，RF诊断特异度仅为75.23%，与上述观点具有一致性。因此RF作为RA早期诊断重要依据，需联合其他血清抗体检测进行联合检测以提高RA的诊断率。研究发现多种免疫细胞及抗体并联检测敏感度高达93.56%，阳性预测值、阴性预测值、约登指数等明显增大[17]，阴性似然比明显降低。

因此，在RF检测的基础上，寻找更为有效的RA血清学诊断指标进行联合检测就变得尤为重要。欧洲抗风湿病联盟及美国风湿病学会制定的RA临床诊断标准中，将抗CCP抗体定为RA诊断血清学标志性抗体[18]。回归分析及相关性分析证实，抗CCP抗体与RA发病及进展也具有密切相关性[19]，这与本研究结果相一致，在RA初期便会异常增高，其增高幅度和RA病情活动度和骨关节侵损关系颇为密切。因此可以将抗CCP抗体检测用于RA诊断和病情及预后评估的指标；AFA对RA的诊断有很高的特异度[20]，但目前用于AFA检测的丝聚蛋白抗原，來源多为人乳房皮肤或婴儿包皮，存在个体差异性大，或可影响结果稳定性。

本次研究结果表明，研究组血清RF、抗CCP抗体和AFA抗体水平三种指标联合检测检出率最高，为81.33%；单独检测AFA抗体检出率最低，为46.67%；研究组和对照组各项指标检出率比较，有显著统计学差异（P<0.05）；血清RF、抗CCP抗体、AFA抗体与RA的相关性分析显示，OR值均大于1，表明三项指标皆为RA发病的危险因素（P<0.05）；单独检测中，灵敏度以RF最高（73.33%），特异性最高的是AFA抗体（98.10%），阳性预测值、阳性似然比以AFA抗体最高（94.59%、24.50），阴性预测值以RF、抗CCP最高（二者相近，分别为79.80%、79.03%），阴性似然比以RF最低（0.35）；联合检测中，灵敏度、特异度、阳性预测值、阴性预测值以RF+抗CCP+AFA最高（81.33%、100.00%、100.00%、88.24%），阴性似然比以RF+抗CCP+AFA最低（0.19）。表明三者联合检测能显著提高诊断单独指标阳性者RA患病率，更好地估计RA患病率。通过比较本研究中，3种抗体单独及不同组合联合检测在RA诊断中的价值，发现RF单独检测具有客观局限性，RF+抗CCP+AFA联合检测诊断灵敏度及特异度等各项指标较各指标单独检测和两两组合均高，表明通过联合检测可更显著提高RA的早期诊断率，降低漏诊及误诊率，给患者的治疗以最佳时机，利于改善RA的预后，稳定性最佳，最具临床价值。

综上，本研究对于RA患者其他自身抗体，形成的抗体网络的交叉作用，是否存在于每种抗体之间，是否影响其在RA诊断中的敏感度和特异度等，尚未有足够的临床样本数量支撑和更深入的相关性研究，有待以后加强。

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（收稿日期：2018-08-02）