规模化猪场仔猪腹泻病原的感染情况分析

（如皋市家畜改良站，江苏如皋 226500）

在规模化猪场的养殖过程当中，仔猪腹泻是一种常见的疾病和状况。仔猪腹泻会带来严重的后果，在很大程度上降低养殖场的经济效益，并且仔猪腹泻的病原类型非常多，具有传染性，所以必须防止疾病的蔓延，从而做出准确的判断。通过实验表明，仔猪腹泻的病原主要分为大肠杆菌、胃肠炎病毒、猪轮状病毒以及猪流行性腹泻病毒。这四种不同的病原，分别对仔猪腹泻产生不同的影响。

1 使用材料以及具体方法

想要确诊规模化猪场仔猪腹泻几种不同病原的具体感染情况，就应该进行一定的实验。在实验过程当中，应该选择合理的材料，并且使用恰当的方法。对于材料的选择，应该对照大肠杆菌进行选购，并且准备好在实验过程当中所使用的试剂盒以及相关的工具和材料。

首先，应该对大肠杆菌进行分离纯化处理。应该通过具体的调查，明确规模化猪场仔猪腹泻的具体情况，并且选择典型的猪场进行调查和研究。可以采用收集仔猪腹泻的粪便样本，对这些样本进行处理，涂抹于培养基之上。并且保证这些样本的所处的环境，应该在37℃，进行培养，具体的培养时间是24小时。与此同时，应该选取红色的典型菌落进行培养，并且使用甘油进行保存。

其次，进行致病性大肠杆菌的鉴定工作。应该准备好反应的模板，将大肠杆菌进行分离处理，并且对照相应的菌种进行接种，平行放置。在37℃的环境之下，培养24个小时，并且使用清水进行洗涤。PCR检测工作应该针对大肠杆菌进行，并且设计相应的菌毛引物，使用相应的扩增方法进行实验。其中应该明确反映的具体体积，并且进行模板点样。反应程序具有一定的预变性，所以必须不断地变化温度和时间进行保存。这样才能够在具体的琼脂糖凝胶上进行电泳。另外，PCR检测仔猪水肿病大肠杆菌也是一项重要的工作内容。这种仔猪的大肠杆菌与两个毒力因子息息相关。这两个毒力因子分别为菌毛以及水肿毒素。不断地进行循环处理，在处理过程当中应该延伸和保存。

最后，上文已经提到规模化猪场仔猪腹泻的几种病原，其中分别为传染性胃肠炎病毒、猪轮状病毒、流行性腹泻病毒等。对这几种病毒的感染情况进行调查和分析。就应该做好病料的处理工作。在采集样本之后，应该使用溶液进行稀释处理，并且将处理之后的溶液反复的动容，这样才能够做好离心处理工作。随后应该加入清液，再次离心，不断地收集清液，进行合理的保存。RNA的提取工作应该值得关注，使用相应的试剂盒进行提取，上文提到的样品应该加入试剂盒之内，在室温的条件之下，应该放置10min。随后将这种混合溶液进行转移，再次放置2min。在2min之后进行离心处理，离心处理的时间为1分钟。经过一系列的处理之后，应该丢弃流出的溶液，并且将残留RNA溶液进行收集。从而放入专业的离心管当中，放置2min之后进行反转录。

2 实验结果及分析

2.1 使用PCR鉴定致病性大肠杆菌

根据规模化猪场仔猪腹泻的几个不同的样本，进行实验和分析，并且分离出大肠杆菌，经过PCR的鉴定，扩增之后会形成凝胶电泳。结果显示，几个不同的规模化猪场仔猪腹泻病人感染当中，检测为阴性，与此同时，检测到的大肠杆菌以及只猪水肿病大肠杆菌，出现异常状况。所有的猪场当中，并没有发现并且明确大肠杆菌的条带以及水肿毒素条带。

2.2 使用RT-PCR鉴定猪轮状病毒

对猪轮状病毒进行RT-PCR鉴定工作，首先应该进行扩增产物的凝胶电泳处理，结果显示猪场当中检测到的特有条带，所以具有阳性性质。

2.3 使用RT-PCR鉴定传染性胃肠炎病毒以及流行性病毒

对猪传染性胃肠炎病毒以及猪流行性腹泻病毒进行RT—PCR的鉴定工作，结果显示，某个猪场当中检测到特有条带。另外其他的猪场当中经过检测可以发现有一种特有条带。这就说明这个猪场同时感染了两种不同的病原。而其他的猪场当中没有发现特有条带，因此具有一定的阳性率。

3 探讨

上文在实验检测过程当中，充分应用的PCR技术以及IRTPCR技术，这两种方法受到一定的认可。与传统的实验室方法相比较，这两种方法具有一定的特殊性，反应灵敏迅速，并且能够直接检测到相关的样品。因此在对规模化猪场仔猪腹泻几种病原感染情况的调查过程当中，必须充分应用这两种专业检测技术。规模化猪场仔猪腹泻是一种常见的疾病，并且在寒冷季节容易发病。这病的原因大多数是病毒的感染。而引起规模化猪场仔猪腹泻的几种病原，也根据不同的地区，以及不同的时间存在较大的差异性。随着现代科学技术的不断发展，在猪场管理工作进行过程当中，不断地提高养殖技术，并且改善养殖的环境和条件。因此能够较好地控制相应的病毒。这种情况之下，病原检测工作一般不会检测到阳性。

猪传染性胃肠炎病毒、猪流行性腹泻病毒以及猪轮状病毒是引起规模化猪场仔猪腹泻的几种常见的病原，因此必须对这几种病毒进行深入的研究和分析，这样才能够控制病毒的蔓延，有效解决规模化猪场仔猪腹泻问题。这几种病毒通常呈现出单独感染或者多重混合感染的状态。通过对黑龙江某地区规模化猪场养猪的样品进行病原检测分析，结果显示，在所选取的样品当中，有三分之一的样品存在猪传染性胃肠炎病毒，另外也有一部分检测的猪轮状病毒和胃肠炎病毒呈现出阳性特点。这就说明这个地区规模化猪场养猪存在比较严重的仔猪腹泻问题。必须加强对这些感染病的控制和处理，提高管理力度。在我国很大一部分的范围之内，这几种病毒呈现出点状散发的状态，因此具有一定的蔓延性，影响的后果也是非常严重的。所以必须投入经济成本以及相应的管理力度，进行疾病的控制工作。

通过实验检测我们发现，在南方的一些地区当中，规模化猪场仔猪养殖都会出现不同程度的腹泻问题，并且在检测病原的过程当中存在多种类型。所以必须做出正确的诊断，找到病原所在，才能对症下药。弄清致病因子，保证明确病原感染的种类和类型，有效地降低经济损失。

4 结语

综上所述，上文已经对我国一些地区规模化猪场仔猪腹泻的病原感染情况进行了实验研究和分析，总结出导致规模化猪场紫竹腹泻的几种不同的病源类型。其中包括致病性大肠杆菌病毒、不轮状病毒，以及传染性胃肠炎病毒等。这几种不同的病原是比较常见的，必须使用专业的技术手段进行鉴定。这样才能够保证猪场以及相关养殖业经济不会受到损失，有效解决病毒问题。

[1]蔡雨函，周远成，艾能，等.四川规模化猪场腹泻仔猪病毒性腹泻病原的分子检测[J].猪业科学，2016，33（2）：76-77.

[2]陈强，曾丽莉，俞伏松，等.规模化猪场仔猪腹泻4种病原的感染情况调查[J].福建农业学报，2010，（1）：8-13.

[3]孙广力，刘洪发，王春福，等.兽医卫生规模化养猪场猪腹泻性疾病病因调查和分析[J].畜牧兽医科技信息，2003，（11）：47-48.