波兰猪场中首次检测到猪圆环病毒3型

何小莉，曾智勇，梁海英 （编译）

（贵州大学动物科学学院，贵州 贵阳 550025）

猪圆环病毒系圆环病毒科圆环病毒属成员，为二十面体对称结构，无囊膜，单股负链DNA，基因大小约2 000 bp，是现在已知最小的能自主复制的病毒之一。迄今为止，两种猪圆环病毒（PCV）已被人们广泛研究，PCV1对猪没有致病性，PCV2是PCV相关疾病的主要致病因子。2016年，Phan等从美国不同地区的哺乳仔猪、9～10周龄患有心肌炎或呼吸系统疾病的育肥猪中检测出一种新型的猪圆环病毒，并命名为PCV3。Palinski等（2016年）从患有猪皮炎肾炎综合征、繁殖障碍组织样品中，也先后检测到PCV3，并对2010年至2016年期间的48例猪皮炎肾病综合征、271例猪呼吸系统疾病、34例的口腔液或鼻拭子的病例样本进行检测，结果显示有45例为PCV3阳性。在中国，Shen等（2017年）从患有呼吸系统疾病并伴有高热(＞40 ℃)的仔猪中检测到PCV3，而PCV2、PRRSV（繁殖与呼吸综合征病毒）和PRV（猪伪狂犬病毒）检测结果均为阴性。Ku等（2017年）在中国的35个猪场中发现有24个猪场存在PCV3的感染，推测是引起繁殖障碍的重要原因。早在2009年，Li等曾从加利福尼亚州的商品猪样本中检测到类PCV3样序列。上述结果表明PCV3已广泛存在，但所有关于PCV3检测的报道都集中在未知病因的病例上。目前为止，欧洲尚无PCV3的相关报道。

试验随机选取了2014～2017年期间-20 ℃保存的源自波兰5个省，共14个常规猪场的3～20周龄猪血清样本共1 050份，按周龄分组后，每个组选取8～10个血清样品，每个组中取4～6个血样合为1份，所有组共184份。同时，从其中12个猪场中，再分别随机抽取10～20头母猪血液样品，每个猪场按每5个血样合为1份，共32份。分别提取每份样本核酸，对样本进行PCV3 ORF2的实时PCR检测，Ct值≤37判断为阳性，再将Ct值最小的样本进行靶向PCV3 ORF2的PCR检测，将获得的基因组序列应用Lasergene 14.0进行比对。

在上述调查猪场中PCV3的总体阳性率为85.7%（12/14），在单个猪场中，PCV3阳性率在5.9%～65%之间不等。在检测的184份猪血清中，共46份PCV3检测为阳性；母猪血液阳性率为29%（9/31），断奶仔猪和育肥猪的阳性率分别为26.1%（12/46）和28.0%（33/118）。除此之外，在所检测的12个猪场中有6个猪场母猪检测到了PCV3；从源于10个猪场的20份断奶仔猪样品中，仅1份样品实时PCR检测为阳性。

将来自SU猪场的育肥猪的血清进行PCV3 ORF2的PCR扩增及测序，大小为359 bp，对应PCV3基因组序列位置为1 629～1 987。将序列进行比对，与此前报道的PCV3 29160（登录号：KT869077）和PCV3-US/SD2016（登录号：KX966193）的同源性分别为97.5%和99.7%。

14个猪场血清中PCV3的检测结果表明，该病毒广泛流行于波兰各猪场中，可能在欧洲的其他地方也广泛存在。然而，尚无法判断猪只的健康状况与PCV3的流行有何直接联系。在所检测的猪场中，名为KS和PR的猪场PCV3的阳性率分别高达64.3%和65%，而名为RO猪场的PCV3阳性率仅为5.9%。导致这些差异的原因，可能与猪场的管理制度、生物安全体系和卫生管理水平有关，同时不排除人畜共患这一传播途径的可能。

根据本次研究结果表明，3～4周龄的仔猪较少感染PCV3，说明母源抗体可能发挥了一定的保护作用。PCV3感染大多发生于断奶后，所检测的14个猪场中，断奶仔猪抗原阳性率为26.1%，育肥猪抗原阳性率为28%。在KS猪场（刚发生繁殖障碍不久），PCV3在3～16周龄猪群中感染比例较大，但是，源自母猪血液样品的实时PCR检测结果却均为阴性。

本次研究结果表明波兰猪场存在PCV3感染，而且非常普遍，同时这是欧洲第1例关于PCV3感染猪的报道。目前还未发现因PCV3导致的急性病例，但并不能排除这些亚临床感染会对猪只健康造成影响。PCV3病原检测的发现和进一步研究是有挑战性的，所以更需要专注于具有不同临床体征患病动物监测，以检测其他已知或潜在的病原体，以期对新病毒的遗传多样性展开分析。