西归的化学成分、质量控制及药理学研究概况
2018-01-21
保山中医药高等专科学校,云南 保山 678000
西归为伞形科凹乳芹属植物西藏凹乳芹(Vicatia thibetica de Boiss)的根,主要分布于四川、云南、西藏等地,在云南大理有人工栽培,当地通常以其作为中药当归的代用品,又名独脚当归。其性温,味辛、甘、微苦,具有祛风除湿、散寒止痛,民间用于健脾补胃、血虚所致的月经不调、痛经、贫血等症[1-2]。近年来研究表明[2,14],西归主要含有伞形花内酯、佛手柑内酯、阿魏酸、芹菜素、β-谷甾醇、胡萝卜甙、d-甘露醇、蔗糖8种化学成分,具有抗疲劳、抗痛经、抗氧化、促智等药理作用。文章对近年来西归的化学成分、质量控制及药理作用进行综述,以期为西归进一步研究提供参考。
1 化学成分
张维明等[2]以95%乙醇回流提取西归,采用硅胶柱色谱分离,然后用石油醚-乙酸乙酯、氯仿-甲醇分别梯度洗脱乙酸乙酯、正丁醇的萃取物,从中分离得到8种化学成分,分别为伞形花内酯、佛手柑内酯、阿魏酸、芹菜素、β-谷甾醇、胡萝卜甙、d-甘露醇、蔗糖。
2 质量控制
2.1 多糖的提取及含量测定 周萍等[3]分别采用苯酚-硫酸法和蒽酮-硫酸法测定西归中多糖的含量,结果显示,苯酚-硫酸法测得多糖含量为0.274 g/g,加样回收率为101.0%,RSD=2.50%;而蒽酮-硫酸法测得多糖含量为0.292 g/g,加样回收率为86.6%,RSD=2.63%,说明苯酚-硫酸法优于蒽酮-硫酸法。许嘉强等[4]以料液比为1∶30,100℃水提取3次,每次1 h,采用苯酚-硫酸法于492 nm波长测得西归含量为0.200 g/g,加样回平均收率为101.0%,RSD=2.63%(n=6),说明该方法准确度高。周萍等[5]以90 ℃水回流提取3次,每次1 h,固液比1∶10,采用苯酚-硫酸法于478 nm波长测定西归多糖含量为0.327 g/g,加样平均回收率99.79%,RSD=2.23%。
2.2 阿魏酸、佛手内酯的提取及含量测定 肖培云等[6]以10倍量的甲醇回流提取2h,采用高效液相色谱外标法,测定西归中阿魏酸含量为124.58 ug/g,其平均回收率为99.66%,RSD=1.06%(n=5)。孙邦燕等[7]以固液比1∶5,55 ℃甲醇提取3次,每次50 min,采用高效液相色谱法测得西归中阿魏酸、佛手内酯的平均含量分别为0.1586、0.0894 mg/g,RSD分别为1.04%、1.08%(n=3)。
2.3 总黄酮的提取及含量测定 周萍等[8]以固液比1∶20,70%乙醇提取2次,每次60 min,采用NaNO2-Al(NO)-NaOH比色法测得西归中总黄酮含量为4.45 mg/g,其加样平均回收率99.8%,RSD=2.09%(n=3)。
2.4 总氨基酸的提取及含量测定 梁英丽等[9]以物料比1∶15,70%乙醇回流提取2次,每次2 h,采用茚三酮显色-分光光度法测得西归中总氨基酸的平均含量为20.38 mg/g,其加样回收率为99.44%,RSD=2.34%(n=9)。
2.5 微量元素的含量测定 周萍等[10]采用原子荧光光谱法测得西归中As、Hg、Cd、Pb含量分别为0.4204、0.0035、0.0264、0.3326/(mg/kg),其加标回收率为101.0%~104.0%,RSD<3.1%(n=4)。
3 药理作用
3.1 抗疲劳作用 黄斌等[11]通过小鼠负重游泳、常压下耐缺氧、耐高温实验研究西归的抗疲劳作用,以13.4 g/(kg·d),6.6 g/(kg·d)、3.3 g/(kg·d)的西归分别给予不同组小鼠,连续给药7 d,于末次给药2 h后测定各项指标,结果显示西归能明显延长小鼠负重游泳、常压下耐缺氧存活、耐高温的时间。雷婷等[12]通过以1.25、2.50、5.00 g/(kg·d)西归给予不同组小鼠,连续给药20 d,于末次给药0.5 h,小鼠游泳10 min后,测定小鼠体内血乳酸含量、乳酸脱氢酶活力、肝糖原含量,实验结果表明,西归能显著提高乳酸脱氢酶活力、肝糖原含量,并能显著降低血乳酸的含量。董寿堂等[13]以80.88 g生药/(kg·d)、40.44 g生药/(kg·d)、20.22 g生药/(kg·d)分别给予小鼠,连续给药9 d,于末次给药1 h,测定负重游泳实验、急性脑缺血缺氧实验、亚硝酸钠中毒存活实验、耐低温实验及自主活动实验。结果表明,西归能明显延长小鼠负重游泳、NaNO2中毒、急性断头张口喘气的时间,并能提高小鼠低温存活率,降低小鼠自主活动。董寿堂等[14]采用负重游泳实验筛选西归的抗疲劳活性组分,并初步研究其抗疲劳作用机制,实验结果显示,西归抗疲劳的活性组分为水溶性组分,具有明显增加小鼠体内红细胞数、血红蛋白含量,能明显增加小鼠肌肉中肌糖原含量,减少乳酸、丙二醛含量,降低乳酸脱氢酶活性,提高超氧化物歧化酶活性。
3.2 增强免疫作用 李桥云等[15]以80.88 g生药/(kg·d)、40.44 g生药/(kg·d)、20.22 g生药/(kg·d)西归分别给予小鼠,连续9 d。第10 d开始采用单平台水环境法剥夺小鼠睡眠,连续3 d,同时继续给予西归。于末次给药后1 h,进行炭粒廓清试验及肝脏、脾脏指数的测定。实验结果显示西归能明显增加睡眠剥夺小鼠廓清指数、吞噬指数及肝脏指数,说明西归具有增强睡眠剥夺小鼠非特异性免疫功能的作用。张冰清等[16]通过腹腔注射80mg/kg环磷酰胺制备免疫低下的小鼠模型,然后以5.00、2.50、1.25 g/(kg·d)西归分别给予各组小鼠,连续15 d,于末次给药后24 h,测定外周血象、脏器重量及周期指数、骨髓有核细胞数、T和B淋巴细胞转化功能。结果表明,西归能明显提高免疫低下小鼠的外周血象、脏器的重量和脏器指数、骨髓有核细胞数量、脾淋巴细胞的增殖功能,提示西归具有增强免疫低下小鼠免疫功能的作用。李禄鹏等[17]、吕鸿等[18]通过腹腔注射20 mg/kg·2d环磷酰胺所致小鼠免疫功能低下模型,并同时分别给予13.4 g/(kg·d),6.6 g/(kg·d),3.3 g/(kg·d)的西归,连续给药14 d。治疗后,分别测定各组小鼠脏器质量、脏器指数,血清中免疫球蛋白G、免疫球蛋白M的含量及丙二醛含量、超氧化物歧化酶活性,以及外周血象。结果表明西归能明显提高免疫力低下小鼠脏器质量、脏器指数及血清中免疫球蛋白G、免疫球蛋白M、溶血素含量,能提高血清及肝脏中超氧化物歧化酶活性,能明显降低血清、肝脏中MDA含量,能提高小鼠外周血血细胞及血红蛋白含量,提示西归具有增强免疫及造血功能。
3.3 抑制消化道运动作用 张龙等[19]采用固体排空法、碳末法、离体肠平滑肌法研究西归对消化道运动的影响。以0.6 g/kg、1.2 g/kg、2.4 g/kg西归分别给予小鼠,每日2次,连续3 d,于末次给药后24 h,分别给予营养性半固体糊、碳末混悬液,30 min后处死动物,取胃、小肠,并称取胃全重和胃净重及测量小肠全长和碳末推进的长度,然后分别计算胃内残留率及小肠推进率。实验结果显示西归能延缓胃排空及抑制小肠推进的作用。以取豚鼠的回肠制备离体肠平滑肌标本,利用BL-420生物机能系统记录西归对正常离体肠平滑肌及乙酰胆碱、组胺、氯化钡所致兴奋的离体肠平滑肌的作用。实验结果显示,西归能明显抑制正常离体肠平滑肌及兴奋离体肠平滑肌的作用[19]。
3.4 抗痛经作用 董寿堂等[20]利用BL 420生物机能系统观察西归对大鼠子宫自主平滑肌条及缩宫素所致兴奋的作用,并采用小鼠扭体实验法研究西归对缩宫素所致痛经模型及醋酸所致疼痛模型的影响。实验结果显示西归能明显降低大鼠子宫平滑肌条及缩宫素所致兴奋的频率、振幅、面积及持续时间,并能明显降低醋酸、缩官素所致小鼠扭体的反应次数,说明西归具有抗痛经的作用。
3.5 改善学习记忆作用 董寿堂等[21]采用跳台法、避暗法观察西归对东莨菪碱、亚硝酸钠、乙醇所致小鼠学习记忆功能障碍的影响。以80.88 g/(kg·d)、40.44 g/(kg·d)、20.22 g/(kg·d)西归分别灌胃给药小鼠,连续给药6 d,分别给予0.1 mL/10 g 40%乙醇、2 mg/kg东莨菪碱、120 mg/kg亚硝酸钠所致小鼠记忆障碍模型,通过跳台法、避暗法记录小鼠的潜伏期及错误次数。结果表明,西归能明显延长东莨菪碱、亚硝酸钠、乙醇所致学习记忆障碍小鼠的潜伏期,并能降低错误次数,提示西归具有改善学习记忆的作用。
3.6 其他 周萍等[22]采用邻苯三酚自氧化法、水杨酸比色法和DPPH法研究西归西归黄酮体外抗氧化的作用。实验结果表明西归黄酮具有较强的清除超氧阴离子自由基、羟自由基及DPPH自由基的作用,且存在剂量的相关性,说明西归黄酮具有较好的体外抗氧化作用。
3 小结
西归在云南大理、西藏等地有百余年的使用历史,当地常常将其作为滋补蔬菜食用,用于炖鸡、炖排骨等,有着广阔的开发应用前景,但由于西归的现代药学研究比较少,限制了它的使用价值。近年来,为了提高西归的应用价值,学者们对西归的化学成分、质量控制及药理学方面进行了探究,从中发现了8种化学成分,并对其中多糖、总氨基酸、黄酮等进行提取分离及含量的分析,为西归及其产品的质量标准制定奠定基础。此外,现代药理学研究显示西归具有抗疲劳、抗痛经、抗氧化、促智等药理作用,可为西归药食品的开发提供理论依据。尽管对西归进行了多方面的药学研究,并在某些方面取得了一定的成果,但对于西归的药效学物质基础尚不清楚,其化学成分、质量控制及药理作用机制尚不十分明确。因此,应进一步探究西归的化学成分及质量控制标准,深入研究其药效学物质基础及药理学作用机制,从而开发出具有一定社会意义和经济效益的系列产品,为西归的产业发展奠定坚实的基础。