贵州省水城某肉牛场支原体肺炎诊治

张涛刘镜杨莉余波,徐景峨陈尧贵吴位珩*

（1，贵州宏宇畜牧技术发展有限公司 550005；2，贵州省畜牧兽医研究所 550005；3，贵州省六盘水市水城钟山区生态文明建设局 553000）

随着扶贫攻坚的开展，贵州畜牧业得到有效发展，贵州省肉牛引进量不断增大，但也带来了一系列流行病感染问题，极大的影响和威胁着我省牛养殖业的健康发展。牛支原体 （Mycoplasma bovis） 属软皮纲 （Mollicutes）， 支原体目（Mycoplasmatles），是一类没有细胞壁、介于细菌和病毒之间的最小原核微生物，主要引起牛的肺炎、关节炎、角膜结膜炎等疾病，同时也是引起牛运输综合症的主要病因之一[1]。牛支原体病的发生和流行在我国各地区均有报道，贵州省水城某肉牛场2017年就发生了一起牛支原体病，在项目组的指导下，该场牛支原体病得到了有效的防治，取得了较好的效果，现将具体情况汇报如下。

1 发病情况

2017年6月，贵州省水城的某肉牛场因从云南某地引进的能繁育母牛发生疾病，该场共有牛116头，其中发病24头，发病严重的牛表现食欲废绝，反刍迟缓，倒地不起，畜主根据临床症状和养殖经验，采用解磷定进行中毒的治疗，结果未见好转，死亡6头。故畜主报告当地前兽防站工作人员，并无菌采集的死亡牛组织样本 （肺、心、肝、脾、肾、淋巴结等）到贵州省畜牧兽医研究所求诊，根据到牛场进行实地病牛临床症状观察，结合实验室诊断，确诊为牛支原体病，并指导该场进行了牛支原体的治疗与预防，使该场的疾病发生和流行得到有效控制。

2 临床解剖症状

对发病肉牛进行临床症状观察，病牛体温在39～41℃，精神不振，食欲减退，呼吸急促，伴有气喘、咳嗽，夜间咳嗽加重，流涕；感染病严重肉牛食欲废绝，明显消瘦，毛被粗乱无光泽，最后倒地不起，引起死亡。死亡牛关节肿大，眼结膜明显发炎，并有脓液或分泌物，病死牛肺样进行病理解剖观察，肺间质增生，肺尖叶、心叶积脓，有干酪样坏死样。根据临床症状和病理解剖观察，初步诊断为牛支原体病。

3 实验室诊断

3.1 试剂

10%精氨酸溶液：将10g精氨酸粉剂荣乐80ml无菌水中，完全溶解后加水定容至100ml，0.22μm滤膜过滤后，4℃保存备用。

PPLO液体培养基：葡萄糖2.5g，PPLO肉汤粉10.5g，酵母粉2.5g，蒸馏水445ml，116℃灭菌20min，冷却后加马血清 50ml， 10%精氨酸 5ml， 10×MEM 5ml， 8万单位/ml青霉素溶液5ml，1%酚红溶液500μl，4℃保存备用。

PPLO固体培养基：葡萄糖2.5g，PPLO肉汤粉10.5g，酵母粉2.5g，蒸馏水440ml，116℃灭菌20min，冷却后加马血清 50ml， 10%精氨酸 5ml， 10×MEM 5ml， 8万单位/ml青霉素溶液5ml，铺置平板，4℃保存备用。

3.2 病原学分离培养与鉴定

将采集的感病肉牛肺样于无菌环境下接种于PPLO液体培养基，置于37℃，5%的CO2的细胞培养箱中，恒温培养3～4d，选取培养基由红色变为澄清、透亮的淡黄色培养菌株，用接种针在PPLO固体平板上划线培养。3～4d后于显微镜下观察可见菌落呈 “煎鸡蛋”特征，表面光滑，边缘整齐。通过实验室诊断，结合临床症状和病理解剖，可以确诊为牛支原体肺炎。

4 防治

4.1 预防措施

预防和控制牛支原体病有一些操作规则，每个牧场应严格遵循。

4.1.1 严格引进新牛

要挑选皮毛富有光泽，体温正常，精神状态良好，食欲旺盛，活动灵活的牛。引进的犊牛，除具有上述条件，最好挑选体重超过150kg，犊牛断奶至少超过60d，符合以上标准的犊牛才能够引进。起运前，要严格控制水和草料饲喂适量，或在饲喂30min后按每千克体重给每头犊牛注射1mg氟苯尼考注射液。在运输过程，避免牛畜过于拥挤，同时可饲喂适量清水。牛达到目的地后须进行充分休息，可先饲喂适量玉米粥 （即按1kg玉米面添加4kg温开水，再添加少量的盐分），接着饲喂足够的青绿饲草。对新进来的牛进行监控和隔离，并且检测其是否感染支原体。

4.1.2 加强饲养管理

保证良好的卫生环境非常重要，牛舍保持干燥、清洁、通风良好，注意防寒保暖。特别是垫料的卫生应该非常注意，定期对肉牛场的设施及设备进行清洁[2]。定期进行消毒，圈舍可定期喷洒10～20%的石灰乳或者20～25%的草木灰进行消毒，也可以撒布适量的干石灰粉或者草木灰。控制饲养密度适宜，防止过于拥挤。不同来源及不同年龄的肉牛要采取分栏饲养。饲喂品质优良的饲料，补充适量的精料、微量元素和维生素，确保日粮含有全面、均衡的营养，增强机体抵抗力。

4.2 治疗

由于支原体没有细胞壁，支原体对磺胺类和β-内酰胺类药物不敏感，贺晨飞等[3]通过牛支原体体外药物敏感性分析筛选到临床上对该病的治疗药物为达氟沙星、林可霉素和阿奇霉素。此外，可选择使用牛支原体呈高敏的抗菌药，如泰妙菌素、泰乐菌素、氟苯尼考等，同时可补充多种维生素，口服或肌肉注射或输液，补充10%葡萄糖。由于大多数的肉牛支原体病伴有多病原混合感染现象出现，治疗时可以采用四环素、庆大霉素、地塞米松合并用药，同时补充10%葡萄糖和VC，用药5～7d一个疗程。

5 讨论

据报道，牛支原体已在多个国家引起牛呼吸道疾病并造成了一系列的经济损失。我国于2008年首次从患肺炎的犊牛肺脏中分离并鉴定得到牛支原体[4]。通常检测牛支原体主要结合形态观察、分子生物学方法 （PCR、荧光定量PCR技术等）、血清学方法 （ELISA、IHA等）[5]。近年来，随着畜牧业的发展，地方养殖场对优质品种肉牛的引进，牛支原体报道也逐渐增多，由该病带来的经济损失也是巨大的[7]。牛支原体是牛呼吸疾病综合征 （Bovine respiratory disease complex,BRD）的主要病因之一，部分病牛伴有关节炎、结膜炎、生殖道炎等多种疾病[7]。任何年龄阶段的牛均可感染牛支原体病，2～6月龄的犊牛最易感染。牛支原体主要通过直接接触或经呼吸道、生殖道、泌乳等途径进行传播。运输应激是牛支原体肺炎的重要诱导因素，可引发一系列非特异性病理反应，造成较大的发病率和死亡率，给养殖户造成严重的经济损失[8]。

贵州省具有发展养牛业的丰富资源及养殖环境，牛支原体病势必威胁养牛业健康快速发展，对该病的控制遵循 “早诊断，早治疗”原则；在条件允许下，减少牛种引进，坚持“自繁自养原则”，避免应激反应或引入病原；加强饲养管理，保证圈舍具有干燥、清洁和良好的通风条件，并定期对圈舍进行消毒和杀菌。同时，研制并开发有效的诊断试剂盒和兽用中药来防控牛支原体病，使养牛业健康和稳定的发展。

参考文献：

[1]石磊,牛支原体肺炎病原的鉴定、诊断和疫苗的初步研究[D].华中农业大学,2010.

[2]郭雨丝,陈颖钰,赵刚,郭爱珍.牛支原体病研究进展[J].中国奶牛,2015(14):36-40.

[3]贺晨飞,Riaz Mustafa,陈颖钰,等.牛支原体体外药物敏感性分析[J].中国奶牛,2015(16):32-35.

[4]幸九庆,李月媛,郭丹,等.国内首次从患肺炎的犊牛肺脏中分离到牛支原体[J].中国预防兽医学报,2008,30(9):661-664.

[5]庄金秋,梅建国,刘吉山,姚春阳.牛支原体实验室检测方法研究进展[J].中国草食动物科学,2016,36(5):58-61.

[6]石磊,龚瑞,尹争艳,等.肉牛传染性牛支原体肺炎流行的诊断[J].华中农业大学学报,2008,27(5):629-633.

[7]Tony J,Vanden Bush,Ricardo F,et al.Characterization of the immune response to Mycoplasma bovies lung infection[J].Veterinary Innunology and Immunopathology,2003,94:23-33.

[8]韩瑾瑾,贺从,吕国栋,等.肉牛运输应激综合征的诊治[J].畜牧与饲料科学,2010,31(5):179-180.