育肥舍带猪消毒试验效果观察

张太升 （山东省青州市畜牧局 262500）

1 试验材料

1.1 试验猪场

2017年3月在山东汇丰畜牧养殖有现公司养猪场进行试验，该场共有5栋育肥猪舍，舍长120m、宽15m，舍内设备配套齐全，每栋猪舍养殖规模1000头左右育肥猪，随机选2栋作为试验用猪舍。

1.2 主要试验器材与试剂

SW-WJ-LCU超净工作台、高压灭菌锅、恒温培养箱、冰箱、普通光学显微镜、电子天平、生化培养箱，胰蛋白胨大豆琼脂 （TSA）培养基 （购自北京陆桥有限责任公司、批号：20170211），百毒清 （浓戊二醛溶液），百胜-30（碘酸混合溶液），试管，剪刀、镊子、酒精灯等。

2 试验方法

2.1 试验设计

随机选2栋育肥舍，按常规消毒日程进行帯猪喷雾消毒，每周两次 （周二、周五）。A栋用百毒清 （浓戊二醛溶液）1∶6000自上而下全面喷雾消毒，B栋用百胜-30（碘酸混合溶液）按照1∶1000浓度自上而下全面喷雾消毒。与带猪消毒前和带猪消毒后30min分别采样，进行细菌检测与统计比较。

2.2 空气中微生物检测

参照中华人民共和国国家标准 《GB/T18204.1-2000公共场所空气微生物检验方法 细菌总数测定》中的自然沉降法。

根据室内面积进行5点取样法，消毒前采样时将培养皿放置在地面上，采样点避开风机口，离墙壁距离大于0.5m，打开无菌平板的皿盖，暴露10min后，盖上皿盖[1]；然后A栋育肥舍用百毒清 （浓戊二醛溶液）1∶6000自上而下全面喷雾消毒，B栋用百胜-30（碘酸混合溶液）按照1∶1000浓度自上而下全面喷雾消毒，消毒30min后重复上述方法进行消毒后采样。采样期间尽量减少人员走动，每个取样点设置培养基平板3个重复。采样结束后，将营养琼脂培养皿加盖带回实验室，将培养皿倒置放入置于37℃恒温培养箱内培养24h，观察培养皿中细菌数的生长情况，并用菌落计数器进行菌落计数[2]。

2.3 物体表面微生物检测

采样方法：参照 《SN/T 3063.1-2011航空食品第1部分：冷加工车间环境微生物检验方法》中的涂抹法。

消毒前用1cm×1cm无菌规格板，放在被检物体 （护栏顶部）表面，连续采样4个，采样面积4cm2，用灭菌生理盐水浸润后的灭菌棉试子，在规格板内横竖往返均匀涂擦各5次，并随即转棉拭子，采样时间20s剪去手接触部位后，将棉试子头部放入含10ml灭菌生理盐水的无菌试管中[3]。然后A栋育肥舍用百毒清 （浓戊二醛溶液）1∶6000自上而下全面喷雾消毒，B栋用百胜-30（碘酸混合溶液）按照1∶1000浓度自上而下全面喷雾消毒，消毒后30min重复上述方法再进行采样，采样结束后回化验室倍比稀释后进行检测。

分别将采集样品充分震荡，取混合液进行倍比稀释，稀释度分别为 1∶102， 1∶103， 1∶104， 1∶105， 吹吸混匀， 做好标记，在无菌超净工作台上取稀释的上清液0.1ml接种至无菌培养基中，放入3个灭菌玻璃珠，轻轻晃动培养皿若干次，使上清液均匀涂布在培养基上，将培养皿倒置放入置于37℃恒温培养箱内培养24h，观察培养皿中细菌数的生长情况，并用菌落计数器进行菌落计数[4]。

物体表面采样点与空气中细菌检测采样点相同，采用5点取样法分别采样。

菌落计数：参照中华人民共和国国家标准进行菌落计数［5］。

结果计算：根据菌落数量最终计算出每平方厘米物体表面所含细菌菌落数。

2.4 杀菌率计算方法

杀菌率 (%)=(消毒前细菌数量–消毒后细菌数量)/消毒前细菌总数×100%[6]。

3 结果与分析

3.1 育肥猪舍内空气中微生物检测结果

猪舍舍内空气中微生物检测结果见表1。结果表明，百毒清 （浓戊二醛溶液）喷雾消毒育肥舍空气杀菌率为59.27%；百胜-30（碘酸混合溶液）喷雾消毒育肥舍空气杀菌率69.33%，差异显著 （P＜0.05），说明消毒剂百胜-30的杀菌效果优于百毒清；但二者杀菌率均不够理想，说明该场育肥舍人工喷雾消毒效果不够理想，可能人为因素较多，需要查找原因。

3.2 育肥猪舍内空气中微生物消毒后降低倍数

育肥猪舍内空气中微生物消毒后降低的倍数结果见表2。结果表明，两种消毒剂对育肥舍的带猪消毒都起了一定的作用，从试验数据中可以看出，两种消毒剂喷雾消毒前后微生物的降低倍数为2.0～3.9倍，说明本次消毒效果不太理想。

3.3 育肥舍物体表面细菌检测结果

猪舍内喷雾消毒后护栏表面微生物检测结果见表3。结果表明百毒清 （浓戊二醛溶液）消毒育肥舍护栏表面杀菌率为91.26%；百胜-30（碘酸混合溶液）消毒育肥舍护栏表面杀菌率91.68%，差异不显著 （P＞0.05），说明消毒剂百胜-30与百毒清的杀菌效率无差异，且二者的杀菌率均较为理想。说明两种消毒剂的消毒效果较好。

表1 育肥猪舍内空气中微生物检测结果 （103cfu/cm2）

表2 育肥猪舍内空气中微生物消毒后降低的倍数

3.4 育肥猪舍内物体表面微生物消毒后降低倍数

育肥猪舍内物体表面微生物消毒后降低的倍数结果见表4。结果表明，两种消毒方式对猪场消毒起到较好的杀菌作用，从试验结果可以看出，两种消毒方式消毒前后微生物的降低倍数在10.20～15.52倍。

4 讨论

（1）试验数据显示，育肥舍空气中微生物数量分布不均匀，靠近南侧有阳光的地方微生物量较北侧要少，并且消毒效果与微生物数量有关，消毒前微生物数量越多，消毒后微生物减少的数量也就越多。

表3 物体表面细菌检测结果 （103cfu/cm2）

表4 育肥猪舍内空气中微生物消毒后降低的倍数

（2）两种消毒剂对育肥舍空气中微生物的消毒效果有显著差异。结果表明，百毒清 （浓戊二醛溶液）消毒育肥舍空气杀菌率仅为59.27%，百胜-30（碘酸混合溶液）消毒育肥舍空气杀菌率仅为69.33%，虽然消毒剂百胜-30的杀菌效果优于百毒清，但两种消毒剂的消毒效果均不太理想，杀菌率均较低；再从二者在物体表面杀菌率来看，百毒清 （浓戊二醛溶液）消毒育肥舍护栏表面杀菌率91.26%；百胜-30（碘酸混合溶液）消毒育肥舍护栏表面杀菌率91.68%，表明二者杀菌率均较理想，且消毒剂百胜-30与百毒清的杀菌效率无差异。因此说明，该场育肥舍人工喷雾消毒操作不够规范，造成喷雾不均和喷雾量不足，致使舍内空气消毒效果不理想。因为舍内物体表面的消毒效果确实有效，说明对地面及物品喷雾有一定效果，主要问题出现在空中的喷雾不确实。从物体表面的消毒效果可以看出，两种消毒剂的质量与配制不存在问题，主要由于操作不规范造成。

（3）两种消毒剂对育肥舍物体表面消毒效果较好，主要是因为人工喷雾时雾滴直接喷到物体表面，使物体表面有足够消毒药物，因此杀菌率较高，消毒效果好较为理想。

（4）对消毒前后的培养物进行涂片染色镜检，发现消毒剂对革兰氏阴性菌杀灭效果较好，这与孙秋艳等报道结果一致。由于本次试验时间紧促，没能对分离菌进行细菌学分类鉴定感到遗憾，以后将做进一步的分离鉴定工作。

（5）临床选用消毒剂时，在考虑经济成本的同时，可以根据季节和疾病流行情况灵活选用刺激性小、广谱有效消毒剂，并注意交替使用，从而发挥较好的杀菌效果。

（6）进行人工喷雾消毒时，需要严格按消毒操作程序进行操作，使消毒剂雾滴均匀分布在猪舍空气中，从而达到均与有效的杀毒效果。有条件的养殖场建议安装自动消毒设备。

（7）要做好消毒前的准备工作，如充分打扫卫生，关闭门窗、关闭风机等。

参考文献:

[1]杨春梅,胡子信,张岐蜀,等.三种消毒剂消毒效果的比较试验[J].养禽与禽病防治,1995,12(5):18-19.

[2]孙秋艳,沈美艳,李舫.不同消毒模式对种鸡场空舍期舍内微生物种类和数量的影响[J].中国家禽,2014,36(20):59-62.

[3]孙秋艳,身美艳,袁东芳,等.不同消毒模式对网上平养肉鸡舍空舍期微生物种类和数量的影响[J].中国家禽,2015,37(22):54.

[4]林树培,谷子博,林沛晗,等.几种常用消毒剂消毒效果的比较[J].齐齐哈尔医学院学报,1995,16(4):306-307.

[5]中华人民共和国卫生部.GB 4789.2-2010,食品安全国家标准食品微生物学检验—菌落总数测定[S].2010.

[6]张学礼,柴君秀,史晓,等.猪场中消毒药物的筛选及现场消毒效果试验[J].四川畜牧兽医,2003,3(30):55.