鱼类免疫增强剂的种类及研究进展（三）

文/王玉堂

（上接2017年，第12期）

四、动物植物提取物

（十九）中草药与中草药添加剂

据研究表明，投喂抗惊镇静中药添加剂，如钩藤、延胡索、枣仁等，能使鱼虾镇静，减少激烈骚动，减少鱼虾在捕捞、运输、投放过程中的应激反应；投喂清泻火、清热凉血的中药添加剂，如石膏、柴胡、生地等，可缓解鱼虾高温热应激反应；添加甘草、沸石、麦饭石、绿豆等，可减少有毒有害物质对鱼体的危害，降低鱼虾的应激反应。

钩藤

有不少人认为，中草药具有资源丰富、无副作用、无药物残留等优点，不仅可以作为人用药物，也可以制成各种兽药。目前，我国有一些中草药正在被用来作为渔药使用，其中一些中草药用来防治细菌性疾病，也有一些用来防治寄生虫子病。而实际情况是，人工养殖的水生动物大多疾病一旦发生，均具有发病急、病程短、死亡率高等特点，如果采用发挥治疗效果较缓慢的中药作为养殖水生动物疾病的治疗药物，往往难以显现出其治疗效果。另外，水生动物多为变温动物，体温随环境温度的变化而变化，这种特性也影响的药物作用的发挥。但将中草药作为预防疾病用的药物却有很好的效果。因为，任何一种中草药虽然含有多种功能性成分，但大多数中药均因含有多糖类物质而显示其良好的药用价值。如人参中含人参多糖、木耳中含有木耳多糖、香菇中含香菇多糖、黄芪中含有黄芪多糖，以及枸杞多糖、灵芝多糖、海藻多糖等，这些多糖类物质能非特异性地提高动物机体免疫防御能力，即增强动物机体免疫力。所以，若从提高水产养殖动物特异性和非特异性免疫力的角度考虑，以制备鱼用免疫增强剂为目的，筛选和制备渔药中药，可能是渔用中药草有效利用和产业研发方向。

因为：

1.中草药能调节免疫的物质基础

中药的有效成份与其药理作用密切相关。有效成份及其特有的药理功能是防治动物疾病的物质基础。现代中药化学研究结果表明，中药的免疫增强作用与其含有的多糖类、苷类和生物碱类等活性物质有关。

多糖是许多中药的主要免疫活性物质。从中药中提取的多糖类很多，除上述的黄芪多糖、人参多糖等以外，还有刺五加多糖、盾膝多糖等，几乎每种药用植物中都多多少少地含量有一些多糖类物质。在苷类化合物中，黄芪苷、白芍苷、淫羊藿苷、雷公藤苷、大豆皂苷等，研究结果均已证实，这些苷类物质均有很强的免疫增强作用。生物碱类，如苦参碱、奎宁、棘豆生物总碱等也有很好的免疫增强作用。除上述三类化学成份外，中药中还有一些其它有效成份，如挥发油类、黄酮类、醌类化合物以及萜类等，这些物质也有很强的免疫增强作用。这些物质以有机化合物的形式存在，除单一成份起作用外，还有各种成份间的复合作用。

2.中药免疫增强作用的机理

（1）对抗体原的作用

近年来，许多学者根据中药的生理活性将其开发为新型免疫佐剂，有研究成果表明，新型免疫佐剂能够提高抗原的免疫原性，提高疫苗的保护力。其作用如下。

一是增加抗原的表面积。某些中药免疫力增强剂颗粒表面可以吸附抗原，使抗原表面积明显增加，特别是可溶性抗原或半抗原，经胶体颗粒吸附后抗原性增强，所以产生的抗体滴度明显提高。

二是延长抗原在体内存留时间。抗原与免疫增强剂混合后，形成凝胶状，延长抗原在体内的作用时间，增加抗原与机体免疫系统的接触程度，减缓降解速度，使其缓慢释放，提高疫苗的免疫原性。

（2）对机体免疫系统的作用

一是对免疫器官的作用。鱼类的免疫器官主要由肾脏及粘膜淋巴组织等组成。免疫器官控制着鱼体的免疫应答，可赋予无标志淋巴细胞以免疫功能，使其成为T、B淋巴细胞。鱼类免疫器官也是免疫活性细胞定居、增生及其与肮脏原发生应答的场所。因此，免疫器官的发育状态直接影响到鱼体的免疫力。有研究结果表明，由黄芪、枸杞、当归等组成的中药复方制剂能使鲤鱼胸腺、脾脏的质量明显增加。另有报道，中药免疫增强剂添加组雏鸡的胸腺、法氏囊和脾脏等免疫器官的重量明显高于空白对照组。可见中药及其复方制剂能够促进正常机体的免疫器官或免疫功能低下的动物的免疫器官发育，增强机体的免疫力。二是对细胞免疫的促进作用。细胞免疫主要T细胞介导的，而T淋巴细胞又可以分为若干亚群，它们在免疫应答过程中相互协作、相互制约，共同完成对抗原的识别、应答和清除，从而维持机体内环境的稳定。中药免疫增强剂可作用于胸腺淋巴系统，诱导T细胞分化与增殖，形成效应细胞，产生淋巴因子；有些中药免疫增强剂还可直接作用于T细胞，促进T细胞蛋白质、核酸等物质的合成，进而提高T细胞母细胞化水平及转化率，增强动物的免疫功能。有报道称，玉米须能提高免疫力低下小鼠的胸腺指数及胸腺DNA含量。还有报道称，黄芪、蒲公英等组成的中药复方制剂对罗非鱼的免疫细胞有激活作用，可促进T淋巴细胞转化率。三是对体液免疫的促进作用。体液免疫是B细胞介导的免疫应答，是B细胞通过对抗原的识别、活化、增殖，最后分化成浆状细胞并分泌抗体来实现的，抗原是介导体液免疫的重要分子，在机体内可发挥出多种免疫功能。某些中药免疫增强剂可以直接作用于B细胞，使其克隆增殖，并诱导B细胞对辅助性T细胞（Th细胞）活性，进而增强对抗原的免疫应答效力，提高抗体对抗原的免疫应答水平。有报道指出，当归多糖、黄芪多糖、板蓝根多糖等9种中药组成的复方制剂，能不同程度地提高受免疫白鼠血液中的抗体效价水平，且与给药时间、剂量和免疫接种次数有一定关系。四是对单核巨噬细胞的影响。单核巨噬细胞是一类重要的免疫调节细胞，某些中药免疫增强剂可作用于巨噬细胞，使之激活，大量分化增殖，释放白细胞介素-1（IL-1）等细胞因子，进一步活化T细胞和B细胞。被激活的Th细胞进一步分泌各种细胞因子，促进B细胞和巨噬细胞功能，并增强其提取、处理和提呈抗原的功能，激活T、B淋巴细胞产生免疫应答，参与特异性免疫应答。五是对红细胞免疫功能的影响。1981年，美国的Siegel在前人研究的基础上，提出了红细胞免疫系统（RCIS）新概念，开辟了免疫系统的新领域。其后有大量报道指出，红细胞有许多与免疫有关的物质，如CRI即C3b受体、CR3、SOD酶等，红细胞不仅可以提升巨噬细胞或中性粒细胞的吞噬能力，还参与IFN-r、IL-1、IL-2和抗体的产生，以及NK细胞、LAK细胞和吞噬细胞免疫活性的调控，促进淋巴细胞、粒细胞免疫粘附肿瘤细胞和直接粘附肿瘤细胞，并与肿瘤细胞患者病情、疗效有关。有报道称，由西洋参、白术、穿山甲等组成的扶正抗癌方剂（FAP）能显著提高红细胞C3b受体活性（RBC-C3bRR），降低红细胞免疫复合物活性（RBCICRR），促进IL-2产生。认为FAP确有调节红细胞免疫功能紊乱及促进IL-2产生作用。六是对天然杀伤细胞和补体系统的促进作用。有些中药免疫增强剂可以增强自然杀伤细胞（NK细胞）和杀伤细胞（K细胞）的活性，增强机体的非特异性抗感染能力，这种作用是通过诱导干扰素生成而实现的。中药性免疫增强剂能够通过经典途径或非经典途径激活补体系统，提高机体血液中补体的含量及其活性。

（二十）绿原酸

绿原酸（Chlorogenic acid）即3-咖啡酰宁酸，是一种由忍冬科植物的干燥花蕾或带初开的花的提取物。绿原酸广泛存在于杜促、金银花、向日葵等植物中。绿原酸是植物体在有氧呼吸过程中经莽草酸途径产生的一种苯丙素类化合物，是许多中草药及中药复方制剂抗菌消炎、清热解毒的主要活性成分。据报道，在饲料中添加绿原酸能有效改善水产动物的生长性能，提高水产动物的免疫力。

1.绿原酸的提取

由于绿原酸的药用价值极大，对绿原酸的提取工艺也逐渐发展，先后开发出：有机溶剂提取法、物理场强化提取法、超临界提取法和酶法提取法。其中有机溶剂提取法由于操作简单、方便、成本低、无有害溶剂等特点而被广泛应用于产业化生产，提取率高，但其经济循环性有待于进一步研究，目前此法仅限于实验室研究阶段。

2.绿原酸的生物活性

绿原酸具有突出的生物活性，对透明质酸酶及葡萄糖-6-磷酸酶有抑制作用，对自由基及抗脂质过氧化有清除作用，还有抗诱变作用、抗菌抗病毒及解毒等作用。由于绿原酸有如此多的生物活性，把绿原酸作为水产饲料添加剂，将明显地改善水产动物品质，提高免疫力。

3.绿原酸在水产动物中的应用

（1）绿原酸对水产动物生长性能的影响

在水产养殖动物饲料中添加绿原酸，能促进水产动物的生长。动物体内的自由基会损伤细胞，破坏细胞膜而使其失去完整性，而绿原酸具有超强的清除自由基能力，提高动物对营养物质的吸收利用率；并且绿原酸与动物体内某些激素有关，可以通过对这些激素的作用，间接影响动物的生长。同时，绿原酸还具有护色和增香作用，起到诱食效果。上述各种因素的综合作用，对水产动物具有很好的促生长效果。

杜仲等植物中绿原酸含量非常高。关于杜仲及其提取物对水产动物促生长性能也多见于报端。阵晓林等的研究表明，在饲料中添加0.15%杜仲纯粉可提高草鱼增重率8.57%，并可饲料系数降0.13，并可增加鱼体的肥满度。

（2）绿原酸对水产动物免疫功能的影响

绿原酸

水产动物的免疫系统是体机体保护自身的防御性结构，免疫器官的发育状态和机能强弱决定了鱼类机体的免疫水平的高低，胸腺、肾脏和脾脏是最主要的免疫器官。据报道，在饲料中添加绿原酸可有效增加建鲤头肾重量与头肾指数，对免疫器官的生长有促进作用。

鱼类是同时具有非特异免疫和特异性免疫的脊椎动物地，但其特异性免疫机制还不够完善，在抵御病原微生物时主要依赖非特异性免疫发挥作用。而在饲料中添加适量的绿原酸，对鱼类各种非特异性免疫因子具有不同程度的正效应。有研究表明，在饲料中添加0.02%绿原酸，投喂异育银鲫10天，能够有效地提高其机体的非特异性免疫机能与抗病力。绿原酸对水产养殖动物中常见的病原菌的抑制效果与抗生素类药物相当，具有很强的预防作用。

绿原酸分子中的活性羟基可以形成具有抗氧化作用的氢自由基，从而清除羟基的活性，保护组织免受氧化作用而损伤。有研究表明，低剂量的绿原酸随投喂时间的延长，对SOD活性提高作用逐渐增强；添加适量的绿原酸，可显著提高建鲤血浆中CAT活力，建鲤血浆中的T-AOC显著提高，MDA含量降低。

因为绿原酸作为一种具有生物活性的物质，具有调节机体免疫力、抗病毒、抗肿瘤和抗氧化的作用，广泛用于药品、保健品行业，可作针剂、注射剂的原料。在水产养殖领域，由于抗生素的长期使用和滥用而导致的食品安全问题日益突出，日益受到人们的广泛关注。而绿原酸作为天然、绿色的饲料添加剂，应用于水产养殖动物的饲料中，可起到较好的预防病毒性、细菌性疾病的作用，从而降低抗生素的使用量，甚至替代抗生素，解决养殖水产品的药物残留问题，并能起到促生长作用，可谓前景广阔。

（未完待续）