免疫分析新方法在食品安全检测中的应用

2018-01-17姜子健齐衍超潍坊市食品药品检验检测中心

食品安全导刊 2018年30期

关键词：胶体金沙门氏菌霉菌

□ 刘欣姜子健齐衍超潍坊市食品药品检验检测中心

1 胶体金的概念

胶体金是氯金酸在还原剂的作用下聚合为特定大小的金颗粒，并在静电作用下生成的一种稳定胶体溶液。因胶体金颗粒具备电子密度较高的特点，并且在颗粒聚集达到107个/mm2的密度条件时，会出现粉红色斑点，故可用作实验指示物[1]。

2 免疫层析技术的概念

免疫层析技术是诞生于20世纪80年代初期的一种独特的免疫分析方法，这一方法的关键技术在于将条状纤维层析材料作为固相，使样品泳动，并使待测物与其受体发生免疫反应，通过酶反应或直接使用标记物进而得到如显色等直观现象。

3 食品安全快速检测中GICA技术的应用

GICA是以胶体金为标记物的一种免疫层板方法。在GICA技术的应用时，应实现膜上抗体或特异性抗原的固定，在毛细作用下使样品游动于层析条上，进而之与受体产生免疫反应。而在此阶段，因检测带上会截留相关物质，检测结果也一目了然[2]。

GICA在医学上的应用较早，已被普遍应用于寄生虫、早孕、乙肝等疾病的检测中，并被普遍应用于动物细菌性、病毒性疾病的动物疫病诊断方面。在食品检测领域，GICA的应用时间较晚，但近期以来，已在迅猛发展并被普遍应用于致病菌、霉菌毒素等食品安全快速检测领域。

3.1 霉菌毒素检测

霉菌毒素是霉菌生成的有毒的次级代谢物，对人类以及动物均有害，广泛存在于饲料以及粮油食品中。在全球范围内，所发现的结构不一的霉菌毒素在400种以上，其中被分离鉴定的霉菌毒素在20种以上，如T2/HT2毒素、呕吐毒素等均会带来较大危害。当前，全球范围内对粮食中主要霉菌毒素的限量做出规定的国家在100个以上，我国GB2761-2017中也对食品中霉菌毒素的限量做出了规定。

当前在霉菌毒素检测中，GICA的应用已极其广泛。例如在5 min内，Charm Rosa霉菌毒素定量检测系统便可对T2/HT2毒素、呕吐毒素等谷物饲料中的霉菌毒素进行快速定量测定。样品制备流程简单、快捷，检测流程也并不复杂，所得结果与采用国际方法所得结果极其相符。当前这一方法已被世界各国普遍应用[3]。

3.2 兽药残留检测

兽药残留不但会对人体健康构成威胁，并且也会给畜产品的质量带来不良影响。国际上往往会采用初筛加确证的方法来检测兽药残留，即在采用一种简单、灵敏、便捷的方法对将要检测的样品快速进行初步筛选之后，如结果呈阳性，应采用较为精准的方法对该样品进行确证分析。在对将要检测的样品快速进行初步筛选时，往往会采用胶体金试纸条进行检测。张改平等会基于特异性抗体的获取，并利用胶体金进行标记以制得试纸条。此外，如红霉素、磺胺等药物也已具备相应的试纸条产品。当前市面上已有试纸条产品可对兽药残留（抗生素类、磺胺类、呋喃类、抗寄生虫类和激素类药物）进行同步检测，使得检测时间与成本大幅节省。在各类检测方法中，除了无需使用大型仪器设备以外，GICA也具备快捷、简便的特点，因此被普遍应用于兽药检测中。

3.3 非法添加物检测

三鹿奶粉事件发生以后，三聚氰胺便走入大众视野，我国相关部门便对非法添加物进行了大力抽查并要求各大企业务必具备相应检测能力。除了会增加成本以外，仪器检测也具备速度较为缓慢的缺陷，无法与检测要求保持同步，在此情况下诞生了三聚氰胺胶体金检测技术。当前该技术已发展得极其成熟，检测限可达0.05 mg/kg。

3.4 致病菌检测

在各类食源性致病菌，沙门氏菌、大肠杆菌等病菌均是常见的病菌。邵晨东等以条带状将抗沙门氏菌O9抗原的特异性单克隆抗体4-7-7、羊抗鼠IgG，分别包被于硝酸纤维膜的检测带以及质控带上，采用胶体金对另一株单抗3-47-0进行标记，并将之吸附于结合垫上以制备成沙门氏菌O9抗原试纸条。对沙门氏菌O9抗原而言，这一试纸条的检测限为4×105CFU。目前，对于食品中存在的引发疾病的病菌，往往会在进行增菌的基础上，进行分离、培养、生化鉴定进而对病菌进行检测，这一方法不但会花费较长时间，操作复杂、流程繁琐，并且极易受到主观以及环境因素的影响而使检测结果的精准性大打折扣，而GICA技术则能有效解决操作流程繁琐、特异性以及灵敏度均较低的问题。