猪博卡病毒的流行特点与检测方法

宁雪松

（阜新县畜牧兽医局务欢池动物卫生监督所，辽宁 阜新 123107）

博卡病毒为细小病毒亚科的博卡病毒属，细小病毒分为浓病毒亚科和细小病毒科亚科，浓病毒亚科主要感染昆虫，细小病毒科亚科主要感染脊椎动物。细小病毒亚科又分为貂阿留申病毒属、细小病毒属、红病毒属、博卡病毒属和依赖病毒属等。博卡病毒是无囊膜单股线状DNA病毒，全基因5.2kb，病毒直径为25～30纳米。博卡病毒包括牛细小病毒、大猩猩博卡病毒、犬极细小病毒、猪博卡病毒和人博卡病毒1～4型等。目前，已成功分离的猪博卡病毒有5个基因型——猪博卡病毒1～5型，都含有2个主要的开放式阅读框，编码非结构蛋白和衣壳蛋白。博卡病毒最早在2009年在患断奶仔猪多系统衰竭综合征病猪的淋巴结中检出，同年猪博卡病毒在我国养殖场被检出。博卡病毒在猪的不同组织中检出率不同，即使在无临床症状的猪组织中也可检出，博卡病毒与圆环病毒常混合感染。猪博卡病毒的致病机理及致病性尚不清楚，病理变化也不明确，关于感染后的症状表现等临床报道较少，检出猪博卡病毒的病猪有明显的呼吸症状及肺损伤。

华中农业大学动物医学院收集2013～2015年间，来自河南、湖北、河北、广东和福建的屠宰场或养殖场的样本，用P C R检测博卡病毒的带毒情况且分析流行特点。结果表明，博卡病毒在我国养殖场和屠宰场广泛分布，总流行率37.92%；在不同样本类型中，粪便检出率最髙（59.62%）、血清36.59%、肠系膜淋巴结36%、淋巴结最低仅为2.94%。中国动物卫生与流行病学中心等单位从屠宰场采集猪扁桃体、淋巴结和脾脏等组织，采用套式PCR分别检测博卡病毒1型和2型，28份样品中有2份样品为阳性，且均为猪博卡病毒2型感染。上海市动物疫病预防控制中心利用实时荧光定量P C R检测，采集于上海规模养殖场的1800份猪血清、猪粪便、猪鼻棉拭及高热病死猪内脏，阳性率分别为24%、30%、0%和67%。6份博卡病毒阳性病料进行与猪繁殖呼吸综合征病毒、猪圆环病毒2型、猪伪狂犬病毒、猪细小病毒检测，阳性率分别为83%、100%、0%和0%，表明博卡病毒感染在上海普遍存在，猪内脏中检出率较高，春秋高发，并与猪繁殖呼吸综合征病毒、猪圆环病毒2型混合感染。

目前，猪博卡病毒的检测方法主要有病毒细胞培养、酶联免疫吸附试验、间接免疫荧光技术、聚合酶链反应和反转录－聚合酶链反应。四川农业大学动物生物技术中心根据GenBank发布的博卡病毒的不同基因型序列，分别设计猪博卡病毒1～5型的PCR引物，在分别建立单一PCR基础上，通过对两组引物的比例、退火温度等条件的优化，建立同时检测猪博卡病毒1型/2型和猪博卡病毒3型/4型/5型的双重PCR法。