小麦中真菌毒素的快速检测技术

□ 赵丽杰 西安市粮油质量检验中心

1 以往真菌毒素检测方法存在的问题及真菌毒素造成的影响

真菌毒素是指曲霉、镰刀菌、展青霉等真菌生长发育过程中产生的有毒次级代谢产物，目前已经为人们所知的就达到了400多种。真菌毒素通过对粮食、果蔬的污染，可通过饮食进入人和家畜体内，引起人和家畜的急性或慢性中毒，进而损害肝脏、肾脏及神经组织等[1]。真菌毒素对人类和家畜健康造成的严重危害，引起世界范围内各个国家对真菌毒素污染问题的重视。现阶段至少已经有超过100个国家对粮食中真菌毒素的限量作出了明确的规定，随着各个国家把食品中真菌毒素的限量作为强制性规定，真菌毒素检测技术的发展速度得到了大幅度提升。

高效液相色谱检测法具有分辨率高、准确性好、灵敏度高、检测限低等优点，是以往一段时间中小麦真菌毒素含量检测最为广泛应用的研究方法，搭配上合适的检测器，基本上可以对各种真菌毒素进行检测。但是此方法实际应用的过程当中，首先需要在样品当中进行提取，其次要经免疫亲和柱净化，操作相对来说比较复杂，检测周期也比较长，特别是液相色谱条件的选择以及标准系列工作溶液的配制，会对检测人员的专业技术水平及实际工作经验提出比较高的要求，也会对生态环境稳定性以及检测人员的人身安全造成一定影响[2]。

真菌毒素对农作物及食品的影响，首先展现出的是不均匀性，真菌毒素在农作物当中的分布并不是十分均匀。其次是低水平，农作物当中平均真菌毒素含量一般都比较低。再次是真菌毒素种类相对来说比较多，一种菌在生长发育的过程中有可能产生各种类型的毒素，比方：禾谷镰刀菌可以产生玉米赤霉烯酮以及T-2毒素等，同种毒素也有可能是不同种类菌产生的。最终一个问题是，受到污染的食品基质构成成分十分复杂，比方谷物当中包含难以溶解的纤维及脂肪，也包含大量的色素及蛋白质等物质，因此想要在正式开始检测之前完成提纯工作，是一件十分困难的事情。

2 小麦真菌毒素含量快速检测技术概述

2.1 真菌毒素替代物

真菌毒素的获取相对来说比较困难，价格也非常高，并且黄曲霉毒素等对人体的危害非常严重，因此研究人员希望可以找寻到模拟器反应原性，也可以当成真菌毒素检测领域中的真菌毒素标准物质替代品。现阶段已经研发出的替代品是

独特型抗体。抗体可变区除去展现出抗体活性之外，还有独特的抗原决定簇，展现出抗原的活性，是可以被其他细胞克隆并识别的，产生抗独特型抗体。Guan等人使用抗AFM抗体的某一片段得到高特异性抗AFM抗独特性抗体，和其他黄曲霉毒素之间不会发生任何交叉反应。以此为基础构建出AFM和独特性抗体之间的定量转换公式。替代物标准曲线的半数抑制浓度是2.4 μg/mL，能够满足现行检测标准当中提出的要求，因此可以在日后小麦真菌毒素含量快速检测工作进行的过程中得到应用[3]。

2.2 免疫层析法

免疫层析法是以往一段时间研发出的一种快速诊断技术措施，它的工作原理是将特异抗体率先固定在硝酸纤维素膜的某一个区域当中，将干燥的硝酸纤维素膜一端浸入样品当中之后，在毛细管的作用之下，样品就会沿着膜的方向移动，在移动到固定着抗体的区域之后，样品当中相应的抗原就会和此抗体之间发生特异性结合，通过免疫胶体金、荧光微球或者免疫霉染色能够让此区域展现出一定颜色，从而实现特异性免疫诊断这一个目标[4]。

现阶段胶体金检测技术在真菌毒素类物质检测中得到的应用较为广泛，具有成本低、操作难度低以及快速精准等特征，且得到了我国相关部门的认可。此技术措施实际应用的过程当中，从样品垫位置上滴上一定量的样品，等到开始反应之后，随着样品液体的流动，偶联抗体的金颗粒就会流向抗原位置上，在抗原抗体的结合让偶联的金颗粒聚集到一定数量之后，就可以构成肉眼可见的红色条带。在加样的液体也包含待测物质的情况下，固定在固相载体上的抗原和样品之间的抗原竞争性结合待测物抗体，从而使碳酸纤维素膜上聚焦的金颗粒数量减少，红色条带的颜色就会逐渐变浅，一直到无色，充分利用上文中所说的各种特性，就可以在非常短暂的时间之内将小麦当中真菌毒素的含量检测出来。

真菌毒素种类多、污染广、毒性强、危害重，不仅是我国食品安全监管的重点，也是世界性的公共安全问题。真菌毒素快速检测技术仍会继续发展。