应用高效液相色谱法检测食品中黄曲霉毒素

2018-01-16金铭特浙江省杭州市余杭区食品药品监测中心

食品安全导刊 2018年12期

□ 李莉金铭特浙江省杭州市余杭区食品药品监测中心

1 黄曲霉毒素的危害与影响

黄曲霉毒素（AFT）是一种化学结构类似的化合物，是二氢呋喃香豆素的衍生物。而黄曲霉毒素就是由黄曲霉、寄生曲霉产生的一种次生代谢产物，其主要出现在一些湿热地区的食品以及饲料中。黄曲霉毒素在土壤、各种坚果以及动植物中广泛存在，容易污染花生、玉米以及小麦等粮油产品，是一种对人体健康产生较大危害的霉菌毒素。2016年，欧盟对于黄曲霉毒素共发出原始通报2 993份，原始通报产生的后续跟踪信息7 288条，总体2016年通报比2015年增长11.1%。在欧盟报告中明确与中国有关信息主要包括中国坚果、坚果产品和籽类中黄曲霉毒素被通报数量排名第5，通报数量为50条；原产中国的花生被通报49条，其中48条采取边境拒绝措施；我国产品被通报总数254条，同比下降35.53%。现阶段如何解决黄曲霉毒素问题已经是食品安全领域的重点问题[1]。

2 高效液相色谱法（HPLC检测法）

通过HPLC检测法加强对黄曲霉毒素的检测是现阶段较为权威的方式。通过高效液相色谱以及荧光检测器进行检测在实践中效果显著。其中，HPLC检测法就是一种色谱法，以甲醇等液体作为其流动相，利用四元泵把一些缓冲液以及溶剂泵入色谱柱之中，这样就会分离在样品中的不同组分，其被分离的物质在进入检测系统中就会被发现。高效液相色谱法在检测黄曲霉毒素的过程中，首先要利用三氯甲烷、甲醇等溶液的提取溶剂对要监测物质进行处理，提取黄曲霉素样品，然后利用过滤膜过滤之后放置在反相色谱柱中，再通过荧光检测器对其进行系统的监测分析，通过对获得的峰高以及峰面积利用综合外标法进行分析，就可以了解在被检测物中黄曲霉毒素的具体含量[2]。

而在实践中为了提升样品的纯度，避免各种杂质的影响，可以将HPLC检测技术与免疫亲和层析技术相结合，进而检测黄曲霉毒素的特异性以及灵敏性。在黄曲霉毒素进入免疫亲和柱的时候，其产生的免疫亲核反应会吸附在柱内的固体支持物中，而在提取融合剂流于亲和柱的时候，存在的抗体就会与黄曲霉毒素进行融合。通过清水冲洗就可以有效消除在免疫亲和色谱柱中残留的各种杂质，再利用甲醇等洗脱剂就可以清除残留的黄曲霉毒素[3]。

而为了获得精准的黄曲霉素B1以及黄曲霉毒素M1的灵敏度，可以应用光化学衍生技术、

电化学衍生技术以及碘衍生技术、三氟乙酸柱前衍生化技术等。其中三氟乙酸柱前衍生化技术是现阶段AOAC应用中的重要技术，在实践中灵敏度较高。

FLD检测器方式应用在液相色谱检测中，具有分辨率高、灵敏度高且精准性较强的特征。在实践中可以对不同类型的黄曲霉素进行科学的分析。但是因为其应用步骤流程相对较为复杂，黄曲霉素的种类繁多，各种结构较为相似，在进行分离处理的时候就会浪费大量的人力、物力以及时间资源。同时，黄曲霉素的G1、B1检测灵敏度相对较低，在实践中必须要通过衍生化的方式对其进行处理，对于HPLC检测操作人员的要求较为严格，因此，主要在专业的实验中应用。

3 液相色谱一串联质谱法（LC-MS）

液相色谱-串联质谱法是通过色谱技术对样品进行分离，再通过联合质谱检测技术检测样品。在实践中质谱技术具有一定的检测优势，且其选择性良好，是今后检测黄曲霉素的重要技术。在实践中，通过溶液提取样品中的黄曲霉素，然后进行样品稀释以及纯化处理，对其进行免疫亲和柱的纯化吸附，通过霉菌毒素多功能净化站对其进行吸附纯化处理，其提取液通过液相色谱柱对其进行分离，通过电喷雾的方式对其进行离子化处理。在监测过程中主要采取反应离子监测方式开展工作，基于色谱技术保留时间以及质谱产生的碎片技术、离子风度的定性比，通过外标方式对其进行定量的分析处理。