从一名三岁女童带菌者直肠拭子中分离出0139群霍乱弧菌

2018-01-16邹红敏张景怡

医药前沿 2018年27期

邹红敏张景怡

（资中县疾病预防控制中心检验科四川资中 641200）

2007年9月12日，我市东兴区发生一起农村举办丧葬宴而引发食源性O139群霍乱暴发流行[1]，受此疫情波及，我疾控中心从一名未预防服药三岁女童直肠拭子、2份病家厕所粪水中分离出O139群霍乱弧菌。由于报告及时，处理得当，使疫情迅速得以控制，未出现二代病例和人员死亡，现报告如下。

1.流行病学概况

2007年9月12日，我市东兴区发生一起食源性霍乱暴发流行，在进行流行病学调查时发现我县有4名同时进餐人员。我疾控中心在接到通知后，迅速赶赴现场，进行流行病学调查。采集4名同时进餐人员直肠拭子（其中3人已进行预防性服药；1人家长认为孩子才3岁，且一直没有腹泻、腹痛、呕吐、发热等任何不适症状，不会感染霍乱，没给孩子服药），5名密切接触者直肠拭子，缸水2份，病家厕所粪水2份，门前泥土2份，餐具2份，进行病原菌分离鉴定。4名同时进餐人员和5名密切接触者均无腹泻、腹痛、呕吐、发热等任何不适症状。

2.检验方法

2.1 材料

碱性蛋白胨水、碱性琼脂、四号琼脂、TCBS琼脂、霍乱弧菌生化鉴定管（11种×20支）、氧化酶试剂均由杭州天和微生物试剂有限公司生产；粘丝试验，试剂现配；O1群霍乱弧菌诊断血清、O139群霍乱弧菌诊断血清均由兰州生物制品研究所生产；O1群霍乱弧菌检测试剂盒（胶体金法）、O139群霍乱弧菌检测试剂盒（胶体金法）均由北京庄笛浩禾生物医学科技有限公司内蒙古生物试剂厂生产；药敏纸片由北京天坛药物生物技术开发公司生产。所有试剂均在有效期内。

2.2 霍乱弧菌检验

所有样本均按《霍乱诊断标准及处理原则GB 15984-1995》和《霍乱防治手册》（第五版）[2]进行霍乱弧菌检测。

2.2.1 第一次增菌将所有样本接种于碱性蛋白胨水，37℃，6～8h进行第一次增菌。

2.2.2 分离培养、第二次增菌和快诊试验取表层增菌液分别划线接种于碱性琼脂、四号琼脂、TCBS琼脂，37℃，20～24h分离培养；接种碱性蛋白胨水，37℃，6～8h进行第二次增菌；同时用O1群、O139群霍乱弧菌检测试剂盒（胶体金法）做快诊试验。

2.2.3 观察菌落特征、涂片染色、血清学试验、纯培养挑取四号琼脂平板上2～4mm、微凸、圆形、中心黑色、光滑、湿润菌落；TCBS上深黄色、微凸、1～2mm、圆形、光滑、湿润、粘稠菌落进行涂片染色，与霍乱弧菌O1群、O139群诊断血清进行玻片凝集。挑取革兰氏阴性、与霍乱诊断血清凝集的单个典型菌落接种于普通营养琼脂斜面进行纯培养。

2.2.4 氧化酶试验、血清学试验、粘丝试验、生化试验、药敏试验取纯培养物做氧化酶试验、血清学试验和粘丝试验，将氧化酶阳性，粘丝试验阳性，与霍乱诊断血清凝集的纯培养物接种霍乱弧菌生化鉴定管，同时用改良K-B氏琼脂扩散法做药物敏感试验。

2.2.5 第二次增菌后的培养物检验步骤同第一次增菌。

2.3 结果

2.3.1 所有样本的第一次增菌培养物O1群、O139群霍乱弧菌检测试剂盒（胶体金法）快诊试验均为阴性，碱性琼脂、四号琼脂、TCBS琼脂平板上无典型菌落，不与霍乱弧菌O1群、O139群诊断血清凝集，未检出霍乱弧菌。

2.3.2 一名同时进餐人员（三岁女童）的直肠拭子第二次增菌培养物、2份病家厕所粪水的第二次增菌培养物O1群、O139群霍乱弧菌检测试剂盒（胶体金法）快诊试验阳性，碱性琼脂、四号琼脂、TCBS琼脂平板上有典型霍乱弧菌菌落生长，不与O1群霍乱弧菌诊断血清凝集，与O139群霍乱弧菌诊断血清凝集，生理盐水对照不凝集。

2.3.3 生化结果氧化酶阳性，粘丝试验阳性，葡萄糖、VP、MR、蔗糖、甘露醇、赖氨酸阳性，靛基质、阿拉伯糖、肌醇、精氨酸阴性。

2.3.4 结合血清学试验和生化结果，判定为O139群霍乱弧菌。与内江市疾病预防控制中心复核确认结果一致。

2.3.5 药敏结果对链霉素、新霉素、四环素、氯霉素、氨苄西林、红霉素、强力霉素耐药，对痢特灵中度敏感，对环丙沙星、阿米卡星、妥布霉素、诺氟沙星、复方新诺明敏感。