RP—HPLC测定注射用前列地尔有关物质的含量

安娜

摘要：目的：建立注射用前列地尔有关物质含量的RP-HPLC检测方法。方法：采用高效液相色谱仪，C18柱（150×4.6mm，5μ m，AgilentZORBAX SB），流动相为pH6.0磷酸缓冲液：乙腈（65：35），流速为1ml/min，检测波长为210nm，柱温为30℃进行测定。结果：前列腺素E1对照品浓度的线性范围为0.12～0.38mg/ml（r=0.9999），15-酮基-前列腺素对照品浓度的线性范围为0.03～0.25mg/ml（r=0.9998），前列腺素A1对照品浓度的线性范围为0.05～0.33mg/ml（r=0.9999）。结论：用该方法检测注射用前列地尔有关物质含量结果准确，操作简单易行。

关键词：RP-HPLC；注射用前列地尔：有关物质：含量

前列地尔，别名又叫做列腺素El，化学名为（1R，2R 3R）-3-羟基-2（E）-（3S）-3-羟基-1-辛烯基-5-氧代环戊烷庚酸。前列地尔注射液主要用于重度肝炎、脑血管疾病和勃起功能障碍等疾病的治疗，但前列地尔注射液中除了有列腺素E1外，在制备时还会引入前列腺素A1和15一酮基一前列腺素等有关物质，因此对于注射用前列地尔有关物质含量的测定是保证药品安全的关键。反相高效液相色谱法（rerse phase high-performance liquid chromatography＼RP-HPLC）具有高灵敏度、分析速度快等优点。本研究采用RP-HPLC法对注射用前列地尔有关物质的含量进行测定。

1.仪器与试剂

1.1仪器

高效液相色谱仪（1200 Agilent）：電子天平（BS0231C赛多利斯）；C18柱（ZORBAX SB 150×4.6 mm，5μm Agilent）；pH计（IP67 METTLER）；紫外分光光度计（UV5 METTLER）。

1.2试剂

前列地尔对照品（中国药品生物制品检定所批号：140659-201404，纯度：99.6%），前列腺素A1对照品（中国药品生物制品检定所批号：140790-201001，纯度：99.2%），15-酮基-前列腺素对照品（中国药品生物制品检定所批号：140826-201307，纯度：99.5%），前列地尔注射液（凯时北京泰德制药股份有限公司国药准字H10980024），磷酸（分析纯）；乙腈（色谱纯）；水（注射水）。

2.方法与结果

2.1色谱条件

C18柱（Agilent ZORBAX SB 150×4.6mm 5μm）；以pH6.0磷酸缓冲液：乙腈（65：35）为流动相；检测波长为210nm；柱温：30℃；流速：1ml/min：进样量：10μl。

2.2样品配制

对照品溶液的配制：分别精确称取适量前列腺素E1、15-酮基-前列腺素和前列腺素A1对照品，分别用流动相配制成浓度为10.0、6.0和4.0mg/L的对照品溶液。

供试品溶液的配制：精密量取前列地尔注射液，加流动相稀释制成前列地尔浓度为100p g/ml的溶液，作为供试品溶液。

2.3线性关系测定

精密量取适量的三种对照品溶液，用流动相稀释成浓度为0.5mg/ml，作为对照品溶液；然后精密量取0.25，0.5，1，2，4，6 ml加入10ml容量瓶中，加流动相至刻度线，混匀。再各取上述溶液10μl上样，最后按照药物峰面积Y对浓度X（mg/ml）进行线性回归，详细结果见表1。

2.4精密度测定

精密量取三种对照品溶液10μl，按照设定色谱程序重复进样6次，计算主峰面积。结果为：前列腺素EIRSD%=0.41%，15-酮基-前列腺素RSD%=0.74%，前列腺素A RSD%=0.88%。

2.5回收率测定

精密称取注射用前列地尔样品（其中的15-酮基-前列腺素和前列腺素A1的含量已确定），分别加入相应物质的对照品比例为80%、100%、120%，用流动相稀释，10μl上样，重复进样6次，采用外标法对注射用前列地尔有关物质含量进行测定，计算结果为5-酮基一前列腺素的回收率为99.7%，前列腺素A1的回收率为105.2%。

3.讨论

前列地尔注射液是供临床使用的输液型药品，该药品的应用避免了输液使用时带来的如PH变化、微粒、热原等医疗安全隐患；静点更为安全、简单，并能够极大地降低二次交叉污染的概率。本研究为了确保前列地尔注射液临床用药的安全性，采用RP-HPLC测定注射用前列地尔有关物质含量。本研究参考了前列地尔注射液的进口药品注册标准和《欧洲药典》，对前列地尔注射液中已知的两种杂质（15-酮基-前列腺素和前列腺素A1）进行定量检测，同时考虑到在前列地尔注射液的制备过程中有引入其他未知杂质的可能，因此对这两种已知的杂质选取相应的对照品进行比对检测。

本文中通过对注射用前列地尔有关物质含量的测定，考察并建立该药品的RP-HPLC检测方法，检测结果表明该方法具有良好的线性关系、较高的精密度及回收率，适用性较强。