脐血血细胞参数生物参考区间的建立与研究

陈小燕，杜 琪

（1.山东省临沂市妇女儿童医院，山东 临沂 276001；2.山东省临沂市兰山区疾病预防控制中心，山东 临沂 276001）

1 简 介

胎儿娩出后，及时进行脐带结扎并离断，将残留在脐带内以及胎盘近胎儿侧血管内的血液收集，可作为新生儿最早的血液标本，脐带血在新生儿诸多常见疾病中起到良好的预测作用，因而近年来被科研工作者广泛重视。对新生儿来说，顺利进行静脉穿刺并采集足够多的标本是一件非常困难的事，对健康状况较差的患儿或早产儿来说更是如此。采血对新生儿的健康产生影响，发生血栓栓塞、动脉痉挛甚至局部坏死等[1]。而脐血为刚出生的新生儿的血液检测提供了可替代的选择[2]。

脐血全血细胞计数是最为广泛应用于评估新生儿临床状况的实验室检查之一。可对全身状况进行初步的评估，有利于疾病的诊断和鉴别诊断。可以为新生儿疾病的早期诊断提供及时有效、创伤性小的检查方式。脐带血全血细胞分析的各个检测指标往往会因为孕妇和婴儿的生理状态不同而发生变化。因此建立一个全面而准确的生物参考区间是合理利用脐血全血细胞计数对新生儿状况进行评估的前提。因此建立本地区本实验室脐血全血细胞分类计数的生物参考区间具有重要的临床意义。

2 方法与材料

2.1 脐血采集

2.1.1 研究对象的选择

选择在2016年1月～2016年12月在临沂市妇妇儿童医院出生的健康新生儿共2280例，产妇年龄22～45岁。

2.1.2 脐血采集

采用脐静脉穿刺法，采集前先准备含EDTA-K2抗凝剂的BD公司生产的抗凝管一支，放在无菌台，待新生儿娩出后，在距离脐轮约5～8 cm处用止血钳夹住脐带的两端，于两钳之间剪断脐带，两分钟内在胎盘的一端选择脐静脉，消毒后用采血针向着胎盘最粗脐静脉的方向穿刺，约采集2 mL的脐带血，注入含有EDTA-K2抗凝剂的试管中，立即颠倒混匀5～8次，1小时内送至实验室。肉眼观察标本是否有凝块、溶血等标本不合格的现象，剔除不合格的标本。于2小时内完成血细胞计数与分类。

2.2 脐血血细胞检测

2.2.1 检测仪器与试剂

用Beckman公司生产的DXH800全血动血细胞分析仪进行血液常规检测，试剂为该公司配套产品。利用上述试剂与仪器对脐血进行血细胞自动计数，并自动进行白细胞分类，完全按照仪器与试剂生产厂家的操作说明进行。

2.2.2 检测项目

白细胞、淋巴细胞百分比、单核细胞百分比、中性粒细胞百分比、嗜酸粒细胞百分比、嗜碱粒细胞百分比、淋巴细胞绝对值、单核细胞绝对值、中性粒细胞绝对值、嗜酸粒细胞绝对值、嗜碱粒细胞绝对值、红细胞、血红蛋白、红细胞压积、红细胞平均体积、红细胞平均血红蛋白浓度、红细胞平均血红蛋白量、红细胞体积分布宽度、有核红细胞计数、网织红细胞计数、血小板、血小板分布宽度、血小板压积、大血小板比例共24个指标。

2.3 判断生物区间的建立是否需要分组

按新生儿性别将标本分为男性组和女性组；按分娩方式将标本分为剖宫产组和经阴分娩组；按出生时新生儿的胎龄，将标本分为早产、足月、过期产三组。按产妇年龄将标本分为≥35岁和＜35岁组。统计分析各组之间脐带血全血细胞分析24项指标是否有显著差异。有显著差异的项目分别建立生物参考区间，无显著差异的项目则不再进行分组，建立一个通用的生物参考区间。

2.4 统计学方法

检测数据中是否有离群值，对各项指标进行正态性检验，采用SPSS 18.0统计学软件分析。如果服从正态分布，则各项指标的参考值范围用均值与标准差来进行估计，双侧采用x±1.96s确定参考区间，单侧则采用x±1.64s。如果为偏态分布，则用百分位数法，双侧采用P2.5-P97.5。单侧则采用小于P5或大于P95。

3 结 果

3.1 男性新生儿与女性新生儿脐血血细胞参数的比较

根据新生儿性别，将所有标本分为男、女两组。对脐血全血细胞分析各项指标进行分析，其中红细胞（P=0.005）、血红蛋白（P=0.002）、白细胞（P=0.011）、血小板（P=0.021）、血小板压积（P=0.032）在男女新生儿之间具有显著性差异，其他项目之间没有显著性差异。

3.2 分娩方式对脐血全血细胞分析各项参数的影响

根据分娩方式的不同，脐血被分为经阴分娩组与剖宫产组，将脐血全血细胞分析各项指标进行分析，其中红细胞（P=0.009）、血红蛋白（P＜0.001）、红细胞压积（P＜0.001）、有核红细胞（P＜0.001）、血小板（P=0.009）在经阴分娩组与剖宫产组之间具有显著性差异，其他项目之间没有显著性差异。

3.3 不同胎龄新生儿脐血全血细胞分析比较表

根据分娩胎龄的不同，将脐血标本分为早产组与足月产组和过期产组，对脐血全血细胞分析各项指标进行分析，其中红细胞（P=0.020）、血红蛋白（P=0.030）、红细胞压积（P=0.041）、红细胞平均体积（P=0.001）、有核红细胞（P=0.032）、网织红细胞（P=0.011）、血小板（P=0.031）、血小板压积（P=0.035）在三组之间具有显著性差异，其他项目之间没有显著性差异。

4 讨 论

脐血对于刚出生的新生儿来说，是理想的实验室检查的标本来源。它不仅能反映胎儿造血系统的状况，也能反映新生儿在围生期的状况，如围生期窒息，胎粪污染、绒毛膜羊膜炎等[4]。脐血全血细胞分析与诸多因素有关，以往的研究表明，新生儿在宫内发生的情况，如宫内窒息、感染、新生儿溶血均会影响全血细胞分析的结果。有研究表明，胎儿的分娩方式、新生儿体重、胎盘娩出方式均可影响脐血采集质和量。宫内感染时，新生儿脐血与正常新生儿的白细胞等参数有显著差异[5]。脐血与成人或儿童期的血液标本有很大不同，白细胞、网织红细胞、白蛋白、免疫球蛋白、尿素氮等都存在显著差异[6]，因此不能用成人的血细胞检测的生物参考区间来评估新生儿的脐血标本。脐血与儿童期血液标本也存在很大差异[7]。因此，需要单独建立脐血的生物参考区间，才能在临床上进行更好的应用。

Yu Hsun Chang等研究发现，新生儿性别对脐带血有核红细胞计数、MCHC的影响有统计学意义[8]。Lee等[4]进行的研究中，性别对脐带血中嗜碱性粒细胞百分比和有核红细胞比例有明显影响。我们的研究发现除红细胞、白细胞、血小板、血小板压积与性别有关外，血红蛋白浓度也与性别有关，但MCV、MCH、MCHC与性别无关。

Lee等进行的研究中，分娩方式对单核细胞、嗜碱性粒细胞有一定的影响[4]。而Yu-Hsun Chang等进行的研究发现，剖腹产影响脐血中红细胞、血红蛋白、红细胞压积、和血小板计数、白细胞计数及部分白细胞分类结果，但对MCV、MCH、MCHC没有显著影响[8]。在我们的研究中，剖腹产的新生儿脐血中红细胞、血红蛋白、红细胞压积、有核红细胞计数、血小板计数都较经阴分娩的新生儿低。

毛维玉等研究了孕20-24周的脐静脉穿刺标本的白细胞、红细胞等血细胞参数，与成人相比，具有显著性差异[11]。我们的研究中，早产儿与足月儿及过期产的新生儿相比，红细胞计数、血红蛋白、红细胞压积增高，而MCV，有核红细胞、网织红细胞计数、血小板、血小板压积有所下降。

[1] Ramasethu J.Complications of vascular catheters in the neonatal intensive care unit[J].Clin Perinatol, 2008,35(1):199-222.

[2] Lee J C,Ahern T P,Chaves F P,et al.Utility of hematologic and volume,conductivity,and scatter parameters from umbilical cord blood in predicting chorioamnionitis[J].Int J Lab Hematol,2010,32(3):351-359.

[3] Walka M M,Sonntag J,Kage A,et al.Complete blood counts from umbilical cords of healthy term newborns by two automated cytometers[J].Acta Haematol,1998,100(4):167-173.

[4] Lee H R,Shin S,Yoon J H,et al.[Complete blood count reference values of donated cord blood from Korean neonates][J]. Korean J Lab Med,2009,29(3):179-184.

[5] 毛维玉.581例脐带血细胞各参数结果分析[J].中国优生与遗传杂志, 2005(07):75-76.