江苏省5种冷背药材的显微鉴别研究
2018-01-11王亚琼张华锋顾炳仁
王亚琼 张华锋 周 坚 顾炳仁
(苏州市药品检验检测研究中心,江苏苏州215104)
冷背药材,是指那些不常用或用量较小的药材品种。在我国,植物、动物、矿石等来源药材已达万余个品种,而常用的药材品种仅有数百个。冷背药材品种繁多,采购困难,大部分需要自己采集。近几年来,随着人们保健意识的增强以及信息化产业的高速发展,越来越多的冷背药材逐步得到开发利用,逐渐从冷背的后台走向市场。本研究所选择的药材是在修订《江苏省中药饮片炮制规范》的过程中发现并加以研究的一些冷僻品种,观察了它们的显微特征,现报道如下。
1 材料
1.1 仪器 DFY-300粉碎机(温岭市林大机械有限公司);标准药筛(辽宁省辽阳金属制品厂);电热恒温水浴锅(上海跃进医疗器械有限公司);冰冻切片机CM1860(Leica,Genmany);显微镜BX43(OLYMPUS,Japan)。
1.2 试剂 甘油、水合氯醛、乙醇均为分析纯,购自国药集团化学试剂有限公司。
1.3 药材 木槿皮、川桐皮、草大戟、香樟木、接骨木每个品种收集至少3批,主要为江苏省内饮片厂家提供,并自采原药材1~2批为辅助参考,由苏州市药品检验检测研究中心中药室主任张华锋鉴定。各检测药材样品来源与批号见表1。
2 方法
2.1 横切片样品制备及观察 将样品泡水软化后,切成小块,用冷冻胶固定,置冰冻切机切片。将切好的片纯水冲洗,滴加水合氯醛试液3~5滴,加热透化后置显微镜下,由低倍到高倍进行观察,并拍照记录。
2.2 粉末样品制备及观察 取样品粉末适量,滴加水合氯醛试液3~5滴,加热透化后置显微镜下,由低倍到高倍进行观察,并拍照记录。
表1 5种江苏省冷背药材检测样品来源
3 结果
3.1 木槿皮 为锦葵科植物木槿Hibiscus syriacus L.的干燥树皮。春、夏二季剥取,晒干。
3.1.1 性状 多呈槽状或单筒状,长短不一,厚约1mm。外表面青灰白色或灰褐色,有弯曲的纵皱纹及点状小突起(皮孔);内表面淡黄白色,光滑,有细纵纹。质韧,断面强纤维性。气微,味淡。
3.1.2 显微鉴别 横切面:木栓层由数十列不规则长方形细胞构成,栓内层窄。韧皮部占大部分,中柱鞘纤维呈束状,在韧皮部外层断续排列呈横带状。初生射线向外呈喇叭状,或瓶嘴状,射线中散有众多草酸钙簇晶。
粉末灰白色。纤维成束,纹孔细小,圆形或斜缝状,直径5~31μm。草酸钙簇晶众多,直径16~65μm,棱角钝尖。木栓细胞淡黄棕色或近无色,表面观呈类方形、类长方形或类多角形,壁稍厚,微弯曲。见图1。
图1 木槿皮显微特征
3.2 川桐皮(刺楸) 为五加科植物刺楸Kalopanax septemlobus(Thumb.)Koidz.的干燥树皮。初夏剥取有钉刺的树皮,晒干。
3.2.1 性状 呈丝或块状。外表面黑褐色或灰褐色,有的可见破碎的钉刺,内表面淡黄棕色至黄棕色。质脆,断面纤维性,略呈层片状。气微,味微辛,略有麻舌感。
3.2.2 显微鉴别 横切面:木栓层由数十列细胞组成,细胞类长方形,壁略增厚。较老的树皮外侧为落皮层,由木栓细胞环带组成。钉刺部位基部为径向延长的木化细胞,边缘及尖部有纤维束。皮层较窄,有石细胞、簇晶散在。韧皮部较宽,纤维束环带可达十数列,射线宽1~3列细胞,韧皮薄壁细胞也含有众多草酸钙结晶。
粉末灰棕色。草酸钙簇晶众多,直径14~163μm,以50μm以上的多见,有的棱角宽大或带方形,也有簇晶和方晶合生。草酸钙方晶大小不一,直径12~85μm。韧皮纤维较多,成束或单个散在,末端钝圆,壁厚,木化,孔沟明显,胞腔狭细。直径16~77μm。钉刺中纤维壁厚,木化,孔沟一般不明显,直径18~57μm。石细胞呈类长圆形、类长方形或纺锤形,直径35~55μm。分泌道多破碎,含细小油滴。木栓细胞无色或淡棕色,表面观类长方形或类多角形。见图2。
3.3 草大戟 为豆科植物美丽胡枝子Lespedeza formosa(Vog.)Koehne的干燥根皮。夏、秋两季挖取根部,剥取根皮,洗净,晒干。
3.3.1 性状 呈卷筒状或半卷筒段状,厚0.1~0.5cm。外表皮灰棕色至棕褐色,粗糙,栓皮较疏松,易脱落。内表皮红棕色至暗棕色,具细纵纹。质韧,不易折断,断面纤维性。气微,味淡、微涩。
3.3.2 显微鉴别 横切面:木栓层为数列细胞,含红棕色物,栓内层窄,皮层和韧皮部散在大量晶纤维群和红棕色分泌物,射线宽1~5列细胞。
粉末棕红色。纤维成束或离散,细长,直径10~20μm。纤维周围薄壁细胞含草酸钙方晶,形成晶纤维;草酸钙方晶多见,呈菱形、方形或多面体,存在于薄壁细胞中。木栓细胞类长方形,内含红棕色物。见图3。
图3 草大戟显微特征
3.4 香樟木 为樟科植物樟Cinnamomum camphora(L.)Presl.的干燥木材。锯下树干,砍、劈成小块晒干。市场上多以带皮药材砍伐,混有皮部,而皮部的显微特征最为特别。
3.4.1 性状 为形状、大小不一的木块,表面红棕色或暗棕色,横断面可见年轮,纵断面有纵直走向的条纹。质坚体轻。有特异的樟脑香气,味微苦而辛凉。
3.4.2 显微鉴别 横切面:木栓层由数十列细胞组成,细胞类长方形,壁略增厚,有石细胞散在,在靠近皮层内侧有石细胞环带。皮层较窄,有纤维和石细胞散在。韧皮部纤维极多,断续数十列,石细胞群散在。韧皮部射线1~2列细胞。韧皮薄壁细胞和射线细胞中含棕色物。木质部宽广,木射线宽1~2列细胞。导管类圆形或圆多角形,有的含棕色树脂。木纤维类圆形,壁稍厚,木化。
粉末黄棕色,韧皮纤维多数,胞腔狭小,孔沟不明显,壁略波状弯曲,直径17.8~48.5μm,长123.7~722.6μm。石细胞单个或成群,类方形,类长方形,类三角形,不规则长条状,直径21~59.8μm,长至184.5μm。淀粉粒类圆形,脐点点状、星状、人字状,3复粒偶见,直径4.0~22.1μm。木纤维成束,无色,木化,胞腔线形,直径7.8~23μm。导管主要为具缘纹孔导管,直径74~195μm。分泌物黄棕色。见图4。
图4 香樟木显微特征
3.5 接骨木 为忍冬科植物接骨木Sambucus williamsii Hance的干燥茎枝。全年可采收,干燥。
3.5.1 性状 茎呈圆柱形,长15~35cm,直径1~5cm。表面黄棕色、灰褐色或绿褐色,有纵裂纹及多数圆点状皮孔。质坚硬,不易折断,断面不平坦,皮部薄,木部黄白色至黄色,髓部疏松,呈棕黄色海绵状。气微,味淡。
3.5.2 显微鉴别 茎横切面:木栓层由10余列细胞组成。皮层由数层椭圆形薄壁细胞组成,内侧散在有纤维束,有的断续呈环,韧皮部薄壁细胞含草酸钙砂晶,形成层明显,木质部宽广。髓部细胞含红棕色分泌物。
粉末淡黄色。分泌道红棕色,直径32.4~77.1μm。砂晶散在薄壁细胞中。木栓细胞类长方形,木化。皮层纤维长条形,平直,腔体宽大,直径16.2~38.9μm。木纤维长条形,直径10.2~25.8μm,夹有射线细胞。导管多为具缘纹孔导管,直径15.5~30.7μm。见图5。
图5 接骨木显微特征
4 讨论
随着数码成像技术的发展,各种组织、粉末的显微特征不再以墨线图的形式出现,而是以彩色图片的形式更加形象、真实地呈现。同时随着各种智能化仪器和新技术的使用,也为显微鉴别工作打开了新的局面[1-2]。本研究采用冰冻切机切片,直接水合氯醛透化观察横切面的特征,为细胞后含物的保存提供了保证,避免了传统石蜡切片工艺复杂,细胞形态改变和后含物易丢失的缺点。
木槿皮、川桐皮、草大戟、香樟木、接骨木5种药材饮片,在不同省份有的有着不同的来源,有的有着不同的药用部位。本研究主要以《江苏省中药饮片炮制规范》[3-4]记载来源为准,收集药材,进行显微鉴别研究。
木槿皮虽然为树皮,但在饮片外观上却与杜仲、肉桂、厚朴等树皮类药材相差甚远,更易与土荆皮、五加皮、香加皮混淆。从显微特征上看,木槿皮的初生射线形状特殊,并含有大量草酸钙簇晶是鉴别要点,而土荆皮可见大量的黏液细胞,可见石细胞和树脂细胞,五加皮的显微特征为大量的树脂道和草酸钙簇晶,香加皮则含有乳汁管和草酸钙方晶[5-7]。川桐皮在饮片外观上,大型的钉刺很容易辨别,但饮片切制大小不一,钉刺也易脱落。川桐皮的显微特征鉴别点在于韧皮部十数列的纤维束环带,以及大型的簇晶和方晶合生草酸钙结晶。草大戟在饮片外观上和地骨皮较为类似,但地骨皮的显微特征为大量的砂晶,草大戟为大量的晶纤维和红棕色的分泌物。京大戟含草酸钙簇晶,红大戟含草酸高针晶,紫丹参无结晶类后含物[8]。香樟木在多省市的地方标准中多为去皮的木材[4-9],但实际饮片市场上以带皮多见,且皮部和近皮处的树脂量较心材处多。香樟木的鉴别点主要在于树皮部位,木栓层内侧有石细胞环带,韧皮部有断续数十列纤维群及石细胞群。接骨木的鉴别点与《中华本草》资料有所差别,《中华本草》记载其皮层有网状增厚的细胞群,韧皮部有红棕色物质[10],但在收集的3批饮片以及江苏地区采集的3批原药材中均未发现网状增厚的细胞群,韧皮部也未发现红棕色物质,却在髓部发现红棕色分泌道。推测接骨木的茎枝结构可能存在地区差异,或者不同生长阶段有着不同的特征,还需要进一步研究加以确证。
冷背药材由于使用量少,关注度低,文献资料偏少,甚至没有。现在随着冷背药材逐渐走向市场,易出现混伪品,因此对冷背药材进行生药学鉴别的研究迫在眉睫。本研究对江苏省内5种冷背药材进行了显微特征研究,找到各自的显微特征点,为今后的生药学鉴别和混伪品的区分提供参考。
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